细菌形态学检查

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1、怎样在显微镜中观看细菌步骤:先在载玻片上滴加一滴生理盐水•把菌落用接种环挑起后，涂于生理盐水中央直径1CM左右要混匀——把载玻片放在酒精灯上加热烘干滴加草酸鞍结晶紫60秒——水洗——革兰氏碘液60S——95%酒精脱色30S——水洗——番红2分钟——干燥镜检。最终目的是要在显微镜屮看见清晰的细菌形状，所以在染色后脱色和水洗最重要，如脱色和水洗不净就会造成细菌和没洗净的颜色混在一起分不清。革兰式染色及其原理:上面的就为革兰氏染色步骤，主要针对的是细菌的检验，因为它们极小。其他的如酵母菌等形状很大不用染色。细菌Z所以能被染色主耍是和它的结构有关，而且有些能被染成蓝色，有些能染成红色，以此来分

2、为革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌.对于革兰氏阳性菌它们的细胞结构中脂类含量少，当用结晶紫染色后再用酒精脱色吋，将脂类溶解抽提出来，使肽聚糖孔径变小通透性降低，结晶紫不易被抽提出來所以能保持蓝色。对丁•革兰氏阴性菌它们的肽聚糖少而脂类多，所以酒精很容易把结晶紫染料提取出来，再经过第二次用番红复染时便染上了红色。关于测定细菌的大小：细菌可以用测微尺测定。它包括目微尺和镜台微尺，目微尺无刻度镜台微尺有刻度。使用时先把镜台微尺放在镜台上用口微尺找到镜台微尺后使用换算把0微尺刻度进行标定，然后就可心测量细菌的大小了。从显微镜屮观察细菌是件很有意思的事情，在你没找到Z前会着急，在找到后又会十分有惊喜感

3、。你会感叹世界竟会有如此小的生命。第一节细菌形态检查法2009-06-0319:56细菌形态学是研究细菌的一个重要方面，了解细菌的形态和结构对研究细菌的牛理活动、致病性和免疫性，以及鉴別细菌、诊断疾病和防治细菌性感染等均有重耍的理论和实际意义。由于细菌个体微小，常以微米3m）为测量单位，肉眼不能直接看到，必须借助显微镜放大后才能观察。根据不同的研究冃的和要求,可分别选择普通光学显微镜、相差显微镜、暗视野显微镜、荧光显微镜和电子显微镜等。另外，由于细菌呈半透明状，要想更清楚地观察其大小和形态，需要进行染色。显微镜检查有不染色标木检查法和染色标木检查法两种。一、不染色标木检查法不染色标本主

4、要用于检查活菌的动力及运动状况。细菌未染色时无色透明，在显微镜下主要靠细菌的折光率与周围环境的不同来进行观察。有鞭毛的细菌运动活泼，无鞭毛的细菌则呈不规则布朗运动。梅毒苍白密螺旋体、钩端螺旋体、弯曲杆菌等的活菌各有特征鲜明的形态和运动方式，具有诊断意义。常用方法有压滴法或悬滴法，置于普通光学显微镜或暗视野显微镜下观察。1.压滴法取菌液一滴，置于清洁载玻片中央，覆上盖玻片，于高倍镜下观察。制片时菌液要适量，不可有气泡，不可外溢。这是观察细菌动力的一种简便方法。2•悬滴法取洁净的凹窝载玻片及盖玻片各1块，将凹孔四周的平而上涂上一层凡士林，取一个环菌液置盖玻片中央，将凹窝载玻片的凹面向下，对

5、准于盖玻片的液滴上，然后迅速翻转玻片，用小银子轻压盖玻片使之与凹孔边缘粘紧。镜下观察时先低倍后高倍，不可压碎盖玻片。冇动力的细菌可见细菌从一处移到另一处，无动力的细菌呈布朗运动而无位置的改变。3•暗视野荧光法由于细菌微小而何半透明，不染色时在普通显微镜下不易看清楚，如使显微镜视野变暗，使菌体发亮，则更容易观察。二、染色标木检查法细菌个体微小呈半透明状，经染色后才能观察的较清惣。通过对标本染色，能观察细菌的形态、大小、排列、染色特性以及荚膜、芽抱、异染颗粒等结构，有助于细菌的初步鉴定。实验室所用的染液都是苯的衍生物，如结品紫、美蓝、孔雀绿等，是人工合成的染料，它们带色基团与染料分子中含有

6、的不饱和双键有关，含双键的部位的化学性质极不稳定，所以容易吸收光线而显色。而细菌的等电点比较低一般在pH2〜5之间，如果在中性、碱性或弱酸性溶液中，整个菌体带的是负电荷，容易被碱性染料染上色，这些染料对菌体的核蛋口或细胞壁的成分冇特别的亲和性。常用的染色法有单染法和复染法两种：①单染法：只用一种染料染色，可观察细菌的形态、大小和排列情况，但不能用于细菌的鉴别。操作过程：涂片一固定一染色一水洗一干燥一镜检。②复染法：用两种或两种以上的染料染色，可将细菌染成不同的颜色，除口J以观察细菌的形态外还能显示出细菌的特殊结构，在细菌的鉴别上有一定的意义。常用的有：1.革兰染色法细菌的革兰染色是最常

7、用的鉴别染色法，由丹麦细菌学家革兰于1884年创建，根据其染色结果将细菌分为革兰阳性菌和革兰阴性菌。操作过程：涂片一固定一染色一水洗一干燥一镜检。染色具体方法为：初染：用结晶紫，染色1分钟，水洗。媒染：加碘液覆盖1分钟后水洗。脱色：连续滴加95%乙醇，约30秒，直到滴卜•的乙醇无色为止，水洗。复染：加番红染色1分钟，水洗。2.芽他染色（1）原理：细菌的芽泡壁比营养细胞壁厚，致密，透性差，着色和脱色都比营养细胞困难，故一•般采用一种碱性染料并在微