核桃不同品种(系)对细菌性黑斑病的抗性鉴定

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1、核桃不同品种(系)对细菌性黑斑病的抗性鉴定核桃不同品种(系)对细菌性黑斑病的抗性鉴定摘耍:选取辽宁地区12个核桃(Juglansregia)主栽品种(系)的两年生嫁接苗，采用5种方法分别接种核桃细菌性黑斑病菌(Xanthomonascampestris)进行抗病鉴定，并比较各品种(系)苗期抗性差异，同时比较及筛选接种方法。关键词：核桃(Juglansregia)；抗性；细菌性黑斑病病菌(Xanthomonsscampestris)中图分类号:S664.1；S436.612.14文献标识码:A文章编号:0439-8114(2014)05-1058-03胡桃(Juglansregial)原产

2、中亚,又叫核桃、羌桃、合桃等。是胡桃科(Juglandaceae)胡桃属(Juglans)多年生落叶乔木。中国的核桃栽培历史悠久，种质资源丰富。核桃仁中含有丰富的脂肪、蛋白质、碳水化合物及微量元素，具有较高的营养价值。中医认为核桃性温、味甘、无毒，有健胃、补血、润肺、养神等功效［1］。20世纪90年代以来，各国科学家通过营养学和病理学研究认为，核桃对于心血管疾病、II型糖尿病、癌症和神经系统疾病有一定的康复治疗和预防效果。随核桃的种植面积扩大，核桃病害发生越来越严匝，核桃细菌性黑斑病的发生最为严重，尤其是在辽宁地区，造成大量的落叶、落果，引起巨大的经济损失。药剂试验证明用锌铜波尔多液和细

3、菌灵防治效果较好。本研究对我国核桃黑斑病的研究现状进行了分析，选取辽宁地区12个核桃主栽品种(系)，采用5种接种方法，系统地测定了不同核桃品种(系)对细菌性黑斑病菌(Xanthomonascampestris)的抗性差异，从而为核桃的抗病育种及科学防治提供一定的理论基础。核桃在幼杲期受害后，果面上出现黑色小斑点，病斑扩大，呈不规则下陷斑，并深入果肉，果实黑腐早落。成熟果实发病后，外果皮变黑，果仁呈现不同程度的干瘪和黑斑，出油率和食用价值大大降低。叶片受害后，在叶脉处形成多角形病斑，严重吋病斑相互融合，病叶皱缩畸形。嫩梢受害后，病斑长条形、褐色稍凹陷，病斑包围枝条一圈时，病斑以上枝条枯死［

4、2］。病菌在病枝、芽内及病斑内越冬，翌年春季核桃展叶期借雨水和昆虫活动进行传播。先感染叶片，病芽初展开时嫩叶极易受害，然后由叶片传播到果实和枝条上。花序也易受侵染而产生水渍状斑。雄花受侵染吋，花粉也可以传病。呀虫、蜜蜂、壁虱、蚂蚁和举肢蛾也能传播病害。气温在4〜30°C吋对叶片感病，5〜27°C对果实能感病、潜育期10〜15d,侵入的细菌主要破坏柔膜组织。发病的轻重与雨水有关。温度高湿度大的雨季发病高峰期一般在核桃展叶期至开花期［3］o陈善义等［4］采用针刺法接种健康核桃枝条和叶片进行致病性测定，并通过对病原菌的分离、致病性测定和16SrDNA序列分析，确定其病原菌分类地位，分析证明该病

5、原细菌为Xanthomonascampestriso1材料与方法1.1栽培品种（系）核桃品种（系）辽宁1号、辽宁4号、辽宁5号、辽宁6号、辽宁7号、礼品1号、礼品2号、寒丰、薄壳香、“30301”、“19-12”、"19-21"共计12个，均为两年生嫁接苗，由辽宁省经济林研究所核桃研究室提供。其中“30301”、"19-12"、"19-21"为选育的优系；辽宁5号、“30301”、以核桃楸为砧木，其他品种（系）是以核桃为砧木。4月定植于温室大棚中，5月底进行接种试验。1.2菌株准备采用常规分离法进行病原菌分离和纯化［5］o在肉汁月东培养基平板上划线并于28°C下培养。分离纯化后所得菌株于

6、斜面中4°C保存。挑取单菌落用肉汁月东培养基扩大培养,4d后接种，菌体悬浮液接种，浓度为108CFU/mLo1.3接种方法釆用5种方法进行接种。（A）喷雾接种叶片。接种前24h喷雾保湿，以保证叶片气孔张开，每棵植株随机选取20片叶片做好标记并用菌体悬浮液喷雾接种，重复3次（共60片）；（B）针刺喷雾接种叶片。每棵植株随机选取10片叶片做好标记并针刺后用菌体悬浮液喷雾接种，重复3次（共30片）；（C）针刺涂抹接种叶片。每棵植株随机选取10片叶片做好标记并针刺后以棉签涂抹接种，重复3次（共30片）；（D）针刺喷雾接种新梢。每棵植株上随机选取5个新梢做好标记并针刺后用菌体悬浮液喷雾接种，重复3

7、次（共15枝）；（E）针刺涂抹接种新梢。每棵植株上随机选取5个新梢做好标记并针刺后以棉签涂抹接种，重复3次（共计15枝）。以上每种处理以不接种病原菌为对照。接种后48h内控制湿度90%,接种后15〜17d调查各处理的发病率。发病率二・X100%2结果与分析不同核桃品种（系）对核桃细菌性黑斑病菌抗性鉴定结果见表1O由表1可知，12个品种（系）的核桃苗接种后感病情况差异较大。由于A、B两种方法最接近田间自然发病条件，因此苗期核桃抗性以方