第七章 转录与转录后加工

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1、第七章转录与转录后加工TranscriptionandProcessingofpost-transcription转录(transcription)生物体以DNA为模板合成RNA的过程。DNA的遗传信息传递给RNA的过程。转录RNADNA复制和转录的共同点:DNA模板依赖DNA的聚合酶碱基配对规律生成磷酸二酯键链延长方向5'→3'复制和转录的区别参与转录的物质原料:NTP(ATP,UTP,GTP,CTP)模板:DNA酶:RNA聚合酶(RNApolymerase,RNA-pol)其他蛋白质因子7.1模板和酶TemplatesandEnzymes7.1.1

2、转录模板模板链(templatestrand)DNA双链中按碱基配对规律能指引转录生成RNA的一股单链。编码链(codingstrand)DNA双链中碱基序列与RNA一致的一股链,又称有义链(sensestrand)。5′···GCAGTACATGTC···3′3′···cgtgatgtacag···5′5′···GCAGUACAUGUC···3′N······Ala·Val·His·Val······C编码链模板链mRNA蛋白质转录翻译反义RNA：以____链为模板合成的RNA，称为反义RNA。其序列与____链一致，能抑制mRNA的表达。编码模板反

3、义RNA能与mRNA分子特异性地互补结合，从而抑制该mRNA的加工与翻译，是原核细胞中基因表达调控的一种方式。5335模板链编码链编码链模板链结构基因转录方向转录方向不对称转录在DNA分子双链上某一区段，一股链用作模板指引转录，另一股链不转录。模板链并非永远在同一条单链上。7.1.2RNA聚合酶定义：以DNA为模板，催化三磷酸核苷（NTP）聚合形成RNA的酶。作用特点：DNA为模板不需引物，游离NTP能与RNA链或另一NTP聚合.3'-OH与5'-P聚合形成磷酸二酯键。方向：5'→3'。核心酶(coreenzyme)全酶(holoenzyme)

4、核心酶:转录延长;全酶：转录起始。σ70是辨认典型转录起始点的蛋白质。原核生物的RNA聚合酶E.coli中不同的因子可识别不同的启动子RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合真核生物的RNA聚合酶45S-rRNA，5S-rRNA：核糖体RNA成分。hnRNA：mRNA的前体。snRNA：参与mRNA剪切。真核RNA聚合酶结构特点：两个大亚基：分子量>100KDa，催化亚基，与原核β，β'亚基有同源性。50kDa亚基：分子量50kDa，与原核α亚基相似。小亚基：10，7，11个。羧基末端结构域(CTD)：(YSPTSPS)n：Y：Ty

5、r；S：Ser；P：Pro；T：ThrRNA-polⅡ大亚基C末端磷酸化，使转录进入链的延长阶段。RNA聚合酶与DNA聚合酶的区别RNA聚合酶DNA聚合酶大小(M)大，4.8×105dal小，1.09×105dal引物无有产物较短，游离较长，与模板以氢键相连作用方式一条链的某一段两条链同时进行外切酶活性无5’3’，3’5’校对合成能力无有修复能力无有7.1.3模板与酶的辨认、结合5335结构基因调控序列RNA-pol启动子(promoter):指能被RNA聚合酶识别、结合并启动基因转录的一段DNA序列。RNA聚合酶保护法分离启动子目录蛋白酶消化

6、开始转录TTGACAAACTGT-35区(Pribnowbox)TATAATPuATATTAPy-10区1-30-5010-10-40-205335原核生物启动子保守序列Sextamabox55RNA聚合酶保护区结构基因33大肠杆菌RNA聚合酶全酶所识别的启动子区T85T83G81A61C69A52T89A89T50A65A100原核生物启动子结构特点：一致性序列(concensus保守序列)：碱基序列相对稳定，不易发生突变。TTGACA：-35区，RNA聚合酶的辨认位点，σ亚基结合位点。TATAAT：-10区，Pribrow盒，RNA

7、聚合酶的稳定结合位点。β'亚基的结合位点。●真核生物启动子真核有三种不同的启动子和有关的元件启动子Ⅱ最为复杂，它和原核的启动子有很多不同真核生物启动子的结构核心启动子（corepromoter）上游启动子元件（upstreampromoterelement，UPE）1、核心启动子●定义：指保证RNA聚合酶Ⅱ转录正常起始所必需的、最少的DNA序列，包括转录起始位点及转录起始位点上游TATA区TATAbox常在-25bp左右，相当于原核的-10序列T85A97T93A85A63A83A50●作用：选择正确的转录起始位点，保证精确起始2、上游启动子元件●包括

8、CAAT盒（CCAAT）和GC盒（GGGCGG）等CAAT盒：-70--80bpGC盒：-80