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1、XX大学毕业论文硫醇类荧光探针研究进展姓名：2014年6月25日硫醇类荧光探针研究进展作者：尹伶灵陈棊棊佟丽丽徐克花唐波【摘要】硫醇是生物体中许多蛋白质和小分子的重要组成部分，在细胞的抗氧化系统屮具有重要的作用，定量检测硫醇在生物化学和临床化学屮具有重要的意义。荧光法由于其具有灵敏度高、能够实现对活体甚至单个细胞的实时可视化示踪的优点，成为目前广泛采用检测细胞内硫醇类物质的一种重要手段。本文引用文献51篇，按荧光探针与筑基作用机理的不同分类，就近年來该领域的研究进展做了比较系统的评述，并展望了此类
2、探针的发展趋势和应用前景。【关键词】硫醇，荧光探针，综述AbstractThiols,whicharecomponentsofmanyproteinsandsimplemolecules,playanimportantroleinthecellularantioxidantdefensesystem.Thequantitativedeterminationofthiolsisimportantinbiochemistryandclinicalchemistry.Fluorescentprobes,
3、whichhaveitsapparentadvantagesinsensitivityand,mostimportantly,inimagingthiolsinvivo,eveninsinglelivingcells,appeartobeparticularlyattractive.Inthisreview,weclassifythefluorescentprobesbasedontheirdifferentreactionmechanismswiththiolsandsummarizethere
4、centprogressesofthiolsfluorescentprobeswithfiftyonereferences-Particularly,theresearchactuality,thedevelopingtrendsandprospectsinthefuturewerealsodiscussed.KeywordsThiols,fluorescentprobe,review1引言硫醇是生物体中许多蛋白质和小分子的重要组成部分，在细胞的抗氧化系统中具有重要的作用［1］。小分了硫醇包括半胱
5、氨酸（Cys）、谷胱甘肽（GSH）、硫辛酸和辅酶A;大分了硫醇包括含筑基的多肽、酶和生物膜。大量的生物现象被认为依赖于这些包含铳基的硫醇类物质，如氧化还原反应、甲基转移反应、二氧化碳固定反应以及辅酶A参与的反应等［2］。谷胱甘肽(GSH)是细胞内含量最高的小分子硫醇(1〜10mmol/L)［3〜5］,它存在氧化型谷胱甘肽(GSSG)和述原型GSH的氧化述原动态平衡［6］。大量资料显示［7〜11］,谷胱廿肽在维持细胞的氧化还原动态平衡、氧化应激和在细胞的生长、功能中起着重耍作用，而且谷胱甘肽的水平还
6、与许多疾病和癌症冇着直接的联系。因此，定量检测生物体系屮硫醇的浓度在生物化学和临床化学屮具有重要意义。目前已报道的用于检测硫醇的方法主要冇：高效液相色谱法［12〜14］、电化学法［15〜17］、荧光法等。荧光法由于其探针特殊的光物理和光化学特性而具有灵敏度高、动态响应范围宽的特点，更重要的是能够实现对活体甚至单个细胞的实吋可视化示踪，成为口前广泛采用的检测细胞内硫醇类物质的一种重要手段。本文按荧光探针与筑基作用机理的不同分类，就近年来该领域的研究进展做了比较系统的评述，并展望了此类探针的发展趋势和
7、应用前景。2利用疏基的亲核性检测硫醇的荧光探针2」利用铳基对缺电子双键的亲核加成反应检测硫醇利用筑基对缺电了双键的亲核加成反应检测硫醇的探针主耍为氮取代的马来酰亚胺类衍生物。马来酰亚胺通常易与硫醇类化合物发生亲核加成反应，在室温下pH5〜8吋几分钟即可完成。Kanaoka等发现氮取代的马来酰亚胺类的大多数化合物自身没有荧光或荧光很弱，当它与包含毓基的化合物反应后形成具有强荧光的加成产物［18,19］,并于1970年开发了第一个比较实用的马来酰亚胺类荧光试剂1［20］。试剂1是一个非常灵敏的检测筑基
8、类化合物的荧光试剂，缺点是激发和发射均处于紫外区，11水溶性差。经过对荧光发射团系统的研究后，Machida等［21］又进一步开发了波长较长水溶性较好的试剂2。试剂2的激发和发射波t分别为400和480nm,该探针在设计时为了增加水溶性引入了极性的香豆素荧光团和二甲氨基基团。试剂1和2被称为Kanaoka试剂，通常被用作荧光探针來共价标记蛋白质中的疏基活性点。近年来，许多氮取代的马来酰亚胺类硫醇荧光探针被开发[22〜28],用来检测动物血清、肝脏、尿液等生物样品中的GSH、Cys等
