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《《论文_灵芝成分灭菌方法研究(定稿)》》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、不同灭茵方法对灵芝成分的影响摘要：H的：建立灵芝质量可靠且经济的灭菌方法。方法：采用热压灭菌、微波灭菌、紫外线灭菌、干热灭菌和环氧乙烷气体灭菌方法対同一批灵芝灭菌，采用高效液相色谱法测定不同灭菌方法対灵芝中灵芝多糖含量的影响。结果：环氧乙烷灭菌法可作为灵芝可靠且经济的灭菌方法。引言灵芝为灵芝科(Ganodei*mataceae)真菌赤Ganodermalucidum(W.Curt.Fr.)Karst的干燥子实体。灵芝一般牛长在湿度高且光线昏昭的山林中，主耍牛长在腐树或是其树木的根部。灵芝是一种坚硬、多他子和微带苦涩的菌类植物，当达到成熟期的灵芝就会喷出粉状的抱子，从而述行繁殖。
2、灵芝的笏理成分非常丰富，其中有效成分可分为十大类，包括灵芝多糖、灵芝多肽、三祜类、16种氨基酸(其屮含有七种人体必需氨基酸)、蛋白质、帑类、廿露胛、香豆粘昔、生物碱、有机酸(主含延胡索酸)，以及微量元索Ge、P、Fe、Ca、Mn.Zn等。灵芝对人体具有双向调节作用，研究表明灵芝具有滋养强壮、调节免疫、抗衰老等多种药理作用，所治病种，涉及心脑血管、消化、神经、内分泌、呼吸、运动等各个系统，尤其对肿瘤、肝脏病变、失眠以及衰老的防治作用十分显著。现代药理和临床试验证明，灵芝对多种疾病具有十分显著的疗效。其中灵芝多糖被认为是灵芝扶正固本的主要有效成分之一。由于灵芝打成药粉入药时，需要在
3、入药前对灵芝粉进行灭菌并进行微生物限度检查，为考察灭菌方法对灵芝成分的影响，故采用灵芝多糖作为指标成分，本文采川热压灭菌、微波灭菌、紫外线灭菌、干热灭菌和坏氧乙烷气体灭菌方法对同一•批灵芝进行灭菌,采用高效液相色谱法测定了不同灭菌方法对灵芝中灵芝多糖含量的影响，实验结杲如下。1、实验部分1」仪器与试药Agilent1100高效液相色谱仪(安捷伦科技有限公司)，VWD紫外检测器，Agilent化学工作站。KQ-600B超芦波淸洗仪，热压灭菌锅，紫外灯。D-无水葡萄糖对照品市中国药品牛物制品检定所提供，批号为110833-20050,硫酸、无水乙醇为分析纯，环氧乙烷。灵芝为我校食用
4、菌实验室自己培育。1.2灭菌方法原理热压灭菌法(autoclavesterilization)^用饱和蒸汽的湿热在一定压力下所釋放的潜热杀灭病原微生物、细菌繁殖体、芽胞和病毒的方法。特点：温度髙、穿透力强，效果可靠热力消毒灭菌法。微波灭菌法使菌体蛋白受热变性，破坏核酸及酶的活性，特点：穿透力强，简单方便。紫外线灭菌法利川紫外线，使菌体蛋白质光解变性而死亡。常用紫外线灯管消毒法，最佳杀菌波长：253.7nm；有效距离：物品：25〜60cm,空气：小于2m；照射时间：灯亮5〜7min后开始计算应大于30min；适用：室内空气、物体表面；特点：简单、方便、无损物品。T热消毒灭菌法:是
5、利用热力破坏微生物的蛋口质、核酸、酶、细胞壁和细胞膜等，从而达到灭菌的目的。环氧乙烷气体消毒使菌体蛋白凝固变性，干扰细胞酶的活性，改变细胞膜通透性，适用于不宜使用高温消毒、耐湿的物品，特点：穿透力强，毒性大、易燃易爆不亢使用高温消毒、耐湿的物品。1.3灵芝粉的制备取灵芝80~100°C干燥后，于-10—15°C冰箱冷冻后立即粉碎成80-100口细粉。1.4不同灭菌方法灵芝粉样品的制备取灵芝粉，分装在牛皮纸袋屮，分别采川热压灭菌、微波灭菌、紫外线灭菌、干热灭菌和环氧乙烷气体灭菌。1.5样品不同灭菌方法的微生物限度检查结果(见表1)将原粉定为样品1，热床2、微波3、紫外4、干热5和
6、环氧乙烷6,微生物限度检查方法为平皿法。表1结杲表明，灵芝环氧乙烷灭菌方法灭菌效杲较好。1.6不同灭菌方法灵芝的含量测定1.6.1色谱分析原理用十八烷基键合硅胶为填充剂；XDB-C18
7、
8、：(4.6mmx200mm,)；硫酸■水((6：1000)为流动相；检测波长为200nm,流速0.6ml/min,述样量20pil,柱温30°C；理论板数按D・无水窗萄糖峰计算应不低于3000。1.6.2对照品溶液的制备秸密称取减压干燥48小时的D-无水匍萄糖对照品适量，加流动相制成每lml含2mg的溶液，滤过，即得。1.6.3供试品溶液的制备分别取各种灵芝粉末l.Og,精密称定，置10ml的
9、离心管中，加正己烷8ml,振摇2min后，离心(3000i7min)10min,弃去正已烷层，再重复上述步骤一次，水浴挥去残留正己烷，转移至10ml量瓶中，加水适量，100°C水浴加热lh,补足水分至刻度,混匀，滤过，取续滤2.0ml,置10ml的离心管中，加无水乙醇8.0ml,摇匀并放置2min,离>L'(3000r/min)10min,弃去上清液,沉淀物用2.0ml流动相100°C水浴水解lh,即得。1.6.4测定分别精密吸取对照品溶液与各种供试品溶液各20pI,注入液相色谱仪，测定，即
