公猪精液保存的研究进展

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1、公猪精液保存的研究进展林永利1,2,薛永柱2(1•福建农林人学动物科学学院，福建福州350002；2.永诚畜牧有限公司种猪场，福建福清350319)摘要:木文阐述了近年来公猪精液的常温保存和冷冻保存两种楮液保存方法的研究概况，比较了两者的优点和缺点，并捉岀了将来此项研究工作的一点意见。关键词：精液；常温保存；冷冻保存我国自1950年以来，猪的人工授精技术已经渐渐地普及开来，经过不断的研究，目前此项技术已较为完善，大大提高了公猪的配种效能，加速了改良品种的增殖，并II在一定程度上防止了疫病的传播［1］。人工授精技术Z

2、所以能够得到如此广泛的推广与应用，这当中自然离开不了精液保存技术的研究与发展。一般来说，公猪精液的保存方法分为常温或低温保存和冷冻保存两种。我国对公猪精液保存的研究已经逐渐成熟。据1976年资料统计［1］,广西、广东、上海、江苏、山东、陕西、北京等地有近百万头母猪接受了常温保存精液人工授精，受胎率达到了80%；1986年，广西、北京、四川、黑龙江等6个省市的统计数字表明［2］,冷冻精液累计配种母猪6万余头，第一情期受胎率达70%以上；2003年，李青旺等［3］经研究获得了53%的公猪冷冻精液冻后活率。本文将结合近年

3、来国内外关于公猪精液保存的最新研究成果，详细论述公猪精液的常温保存和冷冻保存两种保存方法的研究进展。1常温保存1.1操作方法精液稀释前，多用纱布将精液的胶状物质过滤掉，由于精液包含精子和精清，精清屮的电解质成分会促进精子早衰［4］。周歧生等［5］实验表明，精子采出后立刻稀释，或者静置0.5h和1.5h后再稀释，精子的抵抗力和保存效果均不如静置lh后稀释的效果好，可见精清对精了的影响有好有坏，关键是耍控制好静置的最佳时间。另外，有人利用离心的方法将精清与精子分离后再加入稀释液，此方法比未经处理的精液的受胎率捉高了61

4、%［6］01.2保存温度研究表明［7］,在精子体外存活的坏境因素中，温度相当重要，较低的温度能够降低精子的能量消耗和有害代谢物生成。但许多研究人员对温度的要求有着各自不同的观点。周歧生等［5］认为8°C〜10°C对保存精子有利，而12°C〜15°C温度则稍高，有利于细菌的繁殖。霍秀否［8］在猪精液保存方法试验中发现，梅山猪、约克夏猪精液保存15°C极明显好于10°C、20°C、25°Co董载勇等［9］的配方筛选试验也显示了在16°C〜1&C恒温保存时,精子的总存活时间和生存指数都较好。VernoPursel(197

5、9)则认为15°C以上的贮存温度能够很好地保存精子的受精力。目前，大量有关温度影响的试验仍在不断进行，所以如何寻找一个适宜精子生存和保持其受精力的温度，成为今后研究的一个方向。1.3稀释液配方稀释液的配方一般要满足以下几点要求：1、对精子无侵害作用；2、能供给精子营养；3、酸碱环境适合精子生存；4、渗透压适当；5、原料价格合适、配置简便［10］o稀释液的配方成分一般为葡萄糖、EDTA、卵黄、抗生素、碳酸氢钠或者柠檬酸钠和某些添加剂。有研究人员［5］认为用蜜糖代替葡萄糖效果更好，这是由于蜜糖中含葡萄糖、果糖、蔗糖和其

6、他营养成分，并且有抗菌效果，价格低，蜜源丰富。EDTA是稀释液屮相当重要的一个成分，它是一种螯合剂，能够与稀释液中的52+等冇害金属离子结合成稳定的络合物,增加精了的存活率［5,11］。碳酸氢钠或者柠檬酸钠可用來调节精液的PII值，研究发现［5］PH在5.8较适宜，因为精子本身PH值在7.0〜7.5Z间，为弱碱性，只冇在弱酸性的环境中才能降低其代谢率，延长其寿命。稀释用水一般为双蒸水，但是它费用昂贵，季木林等［12］进行了用自来水、自制双蒸水、天然降水、井水等来充当稀释用水的实验，结果发现天然降水（煮沸沉淀时24h

7、的上清液）做成的稀释液与双蒸水的效果差异不显著，精了存活率、受胎率及产仔数均未卜•降。此外，稀释液中一定的渗透压是维持精子存活的必要条件，猪精子可耐受的渗透压为240mosM〜380mosM,稀释液的渗透压主要由非离子物质（如葡萄糖等）维持［11］。精子对一定范围以内的渗透压都能适宜，但在其他条件都相同的情况下，精子更适应高渗透压，因为较低的渗透压更容易破坏精子的顶体。1.4稀释液中的添加成分精子呼吸代谢能产生活性氧族（ROS）,携带有氧自由基，造成过氧化损伤，这是受精能力下降的重要原因。因此添加抵抗自由基的成分是

8、十分必要的EllJo半胱氨酸、维生素E均有抗氧化的功效。近来研究发现褪黑激素有较强的抗自由基的作用，还可增加谷胱甘肽氧化晦的活性，还可通过对调节抑制基因bel-2的调控作用而控制细胞程序化死亡,延缓精子的衰老。马忠兰［13］在稀释液中（葡萄糖、柠檬酸钠碳酸氢钠、EDTA钠、Tris,柠檬酸、半胱氨酸,BSA）加入1X105mol/L的褪黑激素，使精液保存时间