免疫学发展的研究

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1、免疫学发展的研究基础医学部检验专业综述综述题目:_免疫学发展的研究姓名:—胡佳凤班级:—医检(2)班学成绩:免疫学发展的研究摘要:免疫学检验技术在临床医学和科研分析屮占有重要作用,其发展也会为其他医学学科提供理论依据和技术支持。现代免疫学检验技术源于标记技术在免疫学屮的应用。科技的进步推动免疫检验技术的迅速发展,正从单一的免疫诊断技术向单细胞、多基因、微量化等方面发展。而哮喘、器官和骨髓移植、自身免疫性疾病、变态反应、淋巴细胞和浆细胞的恶性肿瘤以及继发性和原发性免疫缺陷的临床诊断都客观要求免疫学检验技术更

2、加精确,并且能够定量评价临床治疗的有效性。关键词:免疫学检验技术;荧光素标记;晦标记一、研究进展1」荧光素标记抗体技术1」」流式细胞免疫荧光分析技术是建立在免疫荧光、免疫微球和流式细胞分析等实验技术基础上的一种新的血清学实验方法。利用荧光对抗体进行染色可以获得所需信息的原理而研制的流式细胞仪,貝有激光技术、电子计算机技术和单克隆抗体技术特点,主要用于细胞表型、细胞内及核膜成分、DNA含量等领域的分析。它在同一试管中同步检测多种靶物质的潜在特征,受到许多临床检验学者的关注。迄今尚未进入临床应用。1」.2四聚

3、体分析技术利用T细胞表面的TCR可与构建的四聚体的表位肽相互作用而精确识别,从而可以高亲和力结合,进而达到检验抗原特异性T细胞的作用[1]。在此分析技术上衍生的检验方法主要有MHC-肽四聚体流式细胞技术、原位MHC・肽四聚体染色法、MHC-肽四聚体磁分离技术、MHC-肽四聚体ELISA技术、MHC-肽四聚体分子微阵列技术等,主要用于肿瘤抗原特异性T细胞、病毒等的检验。1」.3间接免疫荧光技术用作细胞内抗原定位或相应抗体检测的对照标准,主要用于抗病原体、抗核抗体、抗平滑肌抗体等以及其他呼吸道病原体抗体的检测

4、等。可降低手工操作的谋差以及提高标准化检测和自动化程度。该技术比较成熟,已经可以进行商殆开发。1.2酶标记免疫检验技术1.2.1晦联免疫吸附试验技术理论上只耍是某一抗原纯品或相应的抗体,都可以用陋联免疫技术进行检测,因此,町溶性抗原、抗体系统都町以用该技术进行检测,广泛应川于各种微量蛋口(例如细胞因子、小分子激索、肿瘤标志物等)和血源病原体(抗原和抗体)。酶联免疫吸附试验技术(ELISA)以免疫过氧化物技术为基础,敏感性高,特异性强,操作简便,易于观察,便于大规模检查。已经用于临床应用。1.2.2B联免疫

5、斑点技术是一种用于测定B细胞分泌免疫球蛋白、T细胞分泌细胞因子功能的分析技术,是定量酶联免疫吸附试验技术的发展和延伸。酶联免疫斑点技术的原理是在微孔培养板底部植入抗CK或Ig的特异性单克隆抗体。待检测样木进入微孔板内培养时,在有丝分裂原或者特异性抗原的作用下,活化记忆型T细胞或B细胞,产牛CK或Ig0细胞下方的固相单克降抗体就会捕获CK或Ig物质。细胞被清洗后,加入生物素化的第二抗体,抗体和CK或lg物质结合后,再加以酚做标记的生物素或亲和素反应,以酶底物显色,阳性细胞就可形成直径约50〜200pm人小不

6、等的圆形着色斑点[2],每一个斑点对应分泌CK或Ig的一个细胞,而特定阳性T、B细胞族群的产生则可以通过斑点胃径的人小可以直接反映。酶联免疫斑点技术既可用于分泌抗体的B细胞,也可用于分泌各类CK的T细胞。卿联免疫斑点技术也是T细胞功能检测的标准技术,具有较高的检测灵敏度[3]。1.3新型标记免疫检验技术131元索标记免疫检验技术元索标记免疫检验技术屮的标记元索主要有鋼系元索(Eu3+,Tb3+,Sm3+)和钉元素(Ru),其检验技术分别是分辨荧光免疫分析技术和电化学发光免疫分析技术。前者可以应用在两种指标

7、的同时测定[4],后者可以在电场作用下反复被激发而使信号得以放人。1.3.2核酸标记免疫检验技术其设计原理是核酸的扩增或转录翻译[5],扩增是DNA通过聚合酚链反应在较短的时间内按几何级数扩增,对以达到数百万倍;血转录翻译则是通过标记的抗体DNA与抗原反应示进行胞外转录翻译成相应的酶进行测定。这两种方法的检测都有较大的灵敏性,但还处在研究阶段。1.3.3量子点标记免疫检验技术在传统的标记免疫分析技术中,放射免疫分析存在污染,酶免疫分析灵敏度较低,发光免疫分析和荧光免疫分析发光时间短,容易淬灭。早在20世纪

8、70年代就引起科学家重视的虽了点由于良好的光电性能重新引起「人们的广泛关注,开始在标记免疫分析中初步应用,并取得了令人满意的效果。最子尺寸很小,电子和孔穴被量子陷域,连续能带变成分立能级结构,能够接受激发产生荧光,因此它实际上是一种探针。目前应用较多的是II〜VI族或III〜V族元素组成的纳米微粒。研究较多的主耍集中在CdX(X=S、Se、Te),粒径范I韦I为2〜20nm,还有一些复合结构以及多层结构。在免疫示踪定位、生物多

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