【精品】生物芯片类检测试剂注册技术审查指导原则

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1、附件5生物芯片类检测试剂注册技术审查指导原则—、前言本指导原则主要针对生物芯片类检测试剂的主要原材料、生产工艺及反应体系、产品质量控制等环节提出指导性技术要求。本指导原则系对生物芯片类检测试剂的一般要求，申请人应依据产品特性确定其中的具体内容是否适用，若不适用，需详细阐述其理由及相应的科学依据。本指导原则是对申请人和审查人员的指导性文件，但不包括注册审批所涉及的行政事项，亦不作为法规强制执行，如果有能够满足相关法规要求的其他方法，也可以采用，但是需要提供详细的研究资料和验证资料。应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。本指导原则是

2、在现行法规和标准体系以及当前认知水平下制订的，随着法规和标准的不断完善、科学技术的不断发展，其相关内容也将进行适时的调整。二、适用范围根据芯片制作的主要原料和方法，生物芯片可分为核酸芯片、蛋白芯片、细胞芯片、组织芯片等。本指导原则是针对核酸和蛋白为检测靶分子生物芯片的注册技术审查指导原则，其他类型靶分子检测的芯片诊断试剂可参考本指导原则。三、基本要求(—)基本原则1.试剂研制、生产用各种原料、辅料等应制定相应的质量标准，并符合有关法规的要求。2•试剂生产企业应具备相应的专业技术人员、仪器设备以及适宜的生产环境，获得《医疗器械生产许

3、可证》；同时，应按照《体外诊断试剂生产实號细则（试行）》的要求建立相应的质量管理体系，形成文件和记录，加以实施并保持有效运行；还应通过《体外诊断试剂生产企业质量管理体系考核评定标准（试行）》的考核。3•生物芯片类试剂在研制时，应当按照科学、规范的原则组织研发,各反应条件的选择和确定应符合基本的科学原理。4•试剂研制、生产过程中所用的物料及工艺，应充分考虑可能涉及的安全性方面的事宜。5•生产和质量控制的总体目标：保证试剂使用安全、质量稳定、工艺可控、检测有效。（二）原材料质量控制1・核酸检测芯片核酸芯片检测时，从生物样本中提取的核酸

4、可用荧光标记、金标记和酶标记；检测方法包括光谱学方法和化学显色。下面为荧光标记芯片技术指导原则，采用金标记和酶联显色等的生物芯片诊断试剂可参照核酸芯片和蛋白芯片相关部分。（1）主要生物原料核酸检测芯片的主要生物原料包括模板DNA、dNTPs、引物、探针、标记物等。主要生物原料若为企业自己生产，其工艺必须相对稳定，企业应按照工艺要求对这类生物原料进行质量检验，以保证其达到规定的质量标准；若购买，其供应商要求相对固定，不能随意变更供应商，同时，供应商应提供相应的质量保证证明和相应的质检报告，达到生产规定的质量标准。如果主要原料（包括工

5、艺）或其供应商有变更，应依据国家相关法规的要求进行变更申请。%1模板DNA重组DNA：经测序验证，关键碱基或序列没有错误。lxTE溶解，浓度为lOOng/pl以上，-2（TC保存。作为阳性参考品时，其稀释度由企业根据产品标准确定。%1dNTPs（dATP/dUTP/dGTP/dCTP/dTTP）HPLC纯，PCR级，无DNase.RNase污染，-20°C以下保存。%1引物生产中的引物原材料为冻干粉，PAGE纯或HPLC纯。用标准DNA模板扩增，电泳检测，谱带单一，大小正确，与对照引物比较，产物量一致。符合视为合格引物，-20€以

6、下保存。%1探针（用于阵列制备）重组DNA,冻干粉（或lxTE溶解液）：至少满足一个批次的用量，酶切鉴定分析图谱。PCR产物，冻干粉（或lxTE溶解液）：至少满足一个批次的用量，PCR电泳鉴定图谱。合成寡核昔酸：PAGE纯或HPLC纯，至少满足一个批次的用量，提供该产品的PAGE电泳分析图谱或HPLC分析图谱。探针序列的正确性：应用克隆鉴定的标准DNA杂交鉴定或测序鉴定。纯度和浓度检测：采用电泳方法，电泳图谱没有杂带，目的条带的强度与已知浓度的标准DNA条带进行参比计算其强度。纯度较高的DNA,可用紫外分光光度计进行定量。检验合格

7、后入库，避光、-20°C以下保存。%1标记物含有激发光波长和发射光波长介于280〜680mn的所有荧光分子，HPLC纯。@TaqDNA聚合酶SDS-PAGE检测，纯度＞95%,具有DNA聚合酶活性，无核酸内切酶活性；具热稳定性，94C保温1小时后仍保持50%活性。产品-2(TC保存。%1尿喀唳糖基化酶(UNG)具尿囉唳糖基化酶活性，无核酸外切酶及核酸内切酶活性。1UUNG371处理3分钟后，1(T拷贝以下含U模板被降解后不能产生扩增产物。产品-20C保存。%1逆转录(RT)酶具有逆转录活性，无核酸内切酶活性，-2(TC保存。%1R

8、T-PCR酶具逆转录酶活性和DNA聚合酶活性，无核酸内切酶活性，具热稳定性，94°C1小时后仍保持50%活性。产品-2(TC保存。%1缓冲液各类酶制品所需的反应缓冲液由厂家随酶制品提供，-20€保存。(2)主要生物辅料主要生物辅料包括酶类(蛋白酶、