药学生物化学实验指导

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1、生物化学实验一、实验目的1.培养学生科学的思维方法和学习作风，独立工作能力。2.学习基础牛物化学实验方法，为今后的学习与研究准备更好的条件。3.培养学牛爱护国家财物、爱护集体、团结互助的优良道德站质。4•培养学生的书面及口头表达能力。二、实验的总要求1.按教研室予先公布的实验进度表，了解各次实验的貝体内容，并认真做好预习。弄清各步骤的意义,避免教条或机械式做实验。未预习者不得进实验室。2.进行实验不仅要求结果良好，而且要求敏捷高效。一切步骤都按正规操作方法进行；样品与试剂勿过屋取用；注意力集中，避免差错。3.实验中观察要仔细，记录要详尽、及吋与客观。无论实验成功与失败，都应直接记录在

2、实验报告本中，不得于实验后追记。对于失败的实验，要分析其原因。4.实验室是集体学习与工作的场所，实验时应保持肃静，不得大声啦哗，以免彫响他人的工作与思考。5.注意保持实验室内的整洁。实验用器具、试剂等应排列整齐有序。实验时切勿将试剂、标本溅洒于实验台面、地面及衣物上，如果有溅出应及时处理。实验后应清洗用过的仪器及清理白己的实验场所。实验所用的器材、设备不得随意乱动。实验室内的-•切器材物品严禁携出。6.实验时使用水、电、火、易燃易爆试剂、化学毒剂及传染标木等应注意安全，防止燃烧或爆炸，防止屮毒等事故之发牛。7.对师长尊敬，对同学要团结友爱。三、实验报告实验报告的书写是培养学生卩面表达

3、能力和科学作风的重要手段Z-,实验者应该重视。实验报告的内容包括下列各项：实验名称、实验口期、实验目的、实验原理、实验步骤，实验记录、计算、讨论或小结。实验记录应包描随做随记的原始记录。书写实验报告要字迹工整，语句通顺。书写工整的实验报告，是尊师的重要表现之一。四、玻璃仪器的洗涤i般玻璃仪器用吧皂或去污粉以毛刷洗涤即足以满足要求，洗麻应将肥皂或去污粉仔细冲掉，将水倾去后，器壁不挂水珠，视为合格。珞酸洗液仅用于毛刷不能洗净的仪器，切勿滥用普通玻璃仪器之洗涤。使用钻酸洗液时，仪器应干燥；过多的水份将使洗液迅速失效。用过Z珞酸洗液须加以保存以反复使用，肓至为绿色示方可舍弃；其舍弃法与浓硫酸

4、液相同。用洗液浸洗过的玻璃仪器，应先用白来水冲洗，然后再用蒸帑水或去离子水清洗，清洗时，宜采用“少量多次”原则以节约蒸饰水，同时清洗的效率也高。五、舍弃物的处理舍弃物必须依照其性质作适当的处理。以免造成实验材料的浪费，损坏水槽及下水管道，或污染实验环境。1.所有固体舍弃物（例如用过的滤纸、损坏的软木塞及橡皮物、玻璃渣、火柴樓等）。必须放入废物筒或篓中，切勿丢入水槽小。2.废硫酸或洗液，应先倾入大量水屮，再倒入水槽中，并以大量水冲走。3.实验完成后的沉淀或混合物，若含冇nJ提取或收回的贵重物品者，不可随意舍弃，应放入教师指定的回收器中。分光光度计的使用原理：冇色溶液颜色的深浅与其中呈色

5、物质的含量成正比关系。在定量分析中，利用比较冇色物质溶液的颜色深浅來测定物质含量的分析方法称比色法。被测物质屮，有的本身就是有色物质，但多数被测物质本身无色或颜色很浅，须加入某些化学试剂使测物质与之发牛反应生成有色物质。物质的颜色是由于物质吸收某种波氏的光线以后，通过或反射出某种颜色的结果。当一定波长的单色光通过该物质的溶液时，该物质都能有一定程度的吸光作用，单位体积内的溶液屮该物质的质点数越多，对光线吸收越多。利用物质对一定波长光线吸收的程度來测定物质含量的方法，称为分光光度法。分光光度法依据Lambert-Beer定律。设一束单色光To射入溶液，由于部分光线被溶液吸收，通过的光线

6、为h,则h/I。之比为透光度，若透光度T(%)。则T=It/IoXlOO%(1)透光度(T)的倒数(1/T)反映了物质对光的吸收程度。在实际应用时，取(1/T)的对数值，做为吸光度用A表示,即：A=Lg(1/T)=-LgT(2)吸收度(A)乂称消光度(E)或光密度(0D)。根据Lambert-Beer定律推导，当一束平行单色光通过均匀、无散射现象的溶液时，在单色光强度、溶液温度等条件不变条件下，溶液对光的吸收度(A)与溶液的浓度(C)及液层厚度(L)的乘积成正比。即：A二KCL(3)在实际比色时，标准溶液与被测溶液使用相同的比色杯，即液层厚度(D相同。K为常数。测定同一种物质时，K标

7、二K测。所以，将比简化为仅是溶液对光吸收度(A)与其浓度(C)之间的关系。即溶液的浓度越大，吸光度越大。可以通过测定吸光度求知某一溶液的浓度。设：测定管的吸光度和浓度分别为A浏和C妙标准管吸光度和浓度分别为A标和C标，根据(3)式A二KCL得知：A测：A标二C测：C标则C测二A浏/A标XC标上式中C标为已知，A测与A标可在比色时读出数值，把这些数值代入公式，即可求出测定管浓度。操作方法：1.接通电源，打开开关指示钮，打开比色箱盖，预热20分钟。2.预热后，