蝮蛇化学成分的研究

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1、硕士学位论文蝮蛇化学成分的研究学位申请人指导教师姓名专业名称培养学位方式申请学位类型论文提交日期王贵金张辉教授中药学全日制科学学位2008年4月密级编号分类号UDC硕士学位论文蝮蛇化学成分的研究王贵金指导教师姓名：张辉教授（长春中医药大学）申请学位级别硕士专业名称中药学论文提交H期2008年4月论文答辩E1期2008年6月学位授予单位和H期长春中医药大学2008年6月答辩委员会主席评阅人长春中医药大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写

2、过的作品成果。对木文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名年月FI关于学位论文成果归属权的声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是木人在导师指导下自选课题或导师承担的国家立项资助的计划课题的一部分，系本人在导师指导和资助下独立进行研究工作所取得的成果，归属权为长春中医药大学和本人导师所有。特此声明，本声明的一切法律责任由本人承担。论文作者签名论文导师签名年月日关于学位论文使用授权的声明本人完全了解长春中医药人学有关保留使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允

3、许被查阅和借阅。本人授权长春中医药大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入冇关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。（保密论文在解密后应遵守此规定）论文作者签名论文导师签名年月FI中文摘要II第二章蝮蛇化学成分的捉取分离及成份比较12英文摘耍第一章绪论3I蝮蛇的化学成分及药理作用研究进展31.1化学成分31.2药理作用52液质联用技术(LC/MS)在中药现代化研究中的应用62.1中约成分分析72.2屮药及植物药化学成分的快速筛选72.3中总勺材品种鉴别82.4中药指纹图谱研究82.5屮药质量标准研究82.6中药药代动力学研究92.7中药有效单体成

4、分的药代动力学研究93天然药物在抗氧化活性中的应用93.1生药学领域93.2现代医学领域103.3营养学领域10I仪器与材料121.1纱材來源121.2试剂12121.3仪器2.1蝮蛇化学成分的提取132.2蝮蛇化学成分的分离、纯化132.3化合物的鉴定142.4蝮蛇各部位化学成分比较16仪器及材料1919191919第三章蝮蛇水溶性成分(HPLC/ESI/MS?)分析12」色谱条件192.2质谱条件192.3溶液的配制193蝮蛇水提液中主要成分的分析203」色谱图203.2紫外图谱和一级和二级质谱解析213小结254讨论254.1检测波长的选择255.2流动相的选择255.3

5、HPLC/ESVMS2分析结果25第四章蝮蛇水溶性成分抗氧化活性实验261材料与仪器261.1药材来源261.2试剂261.3仪器262原理与方法262.1原理262.2储备液配制272.3蝮蛇水溶液的制备272.3测定波长的选择272.4实验方法273结果与讨论283」实验结果283.2讨论29第五章蝮蛇质量标准301蝮蛇质量标准建立302质量标准起草说明312.1名称312.2來源312.3炮制312.4性状3267Z2.2140参考文献4144中文摘要本文首先利用缓冲盐将蝮蛇肉中的蛋白质进行提取，剩下小分子部分采用石油醴、氯仿-甲醇（2：1）和甲醇进行提取，用加压柱层析对

6、石油醛提取物进行分离。经GS-MS检测在石油瞇提取物中鉴定出了胆箱-3-醇，十六烷酸，十八烷酸，9-十八烯酸；并分离岀一针状结晶，与胆當醇标准品在同一薄层板上经三种展开剂展开，证实为胆當醇，另外，在甲醇提取物中采用固相萃取小柱，反相柱层析分离纯化出3个单体化合物，经'IINMR和13CNMR鉴定分别为次黄卩票吟、床II密噪和腺昔。采用屯泳方法进行双血计检验,定性比较了蝮蛇头、皮、肉三个部位的蛋白质成分差异，另外，对头、皮、肉三个部位水溶性成分建立了指纹图谱比较，三个部位化学成分相似但含量有很大差异，主耍成分在蝮蛇肉中含量最多。建立了蝮蛇肉水提液化学成分的HPLC/ESI/MS2

7、定性分析方法，采用该方法得到了蝮蛇肉的紫外（UV）色谱图、萃取离子色谱图（EIC）,以及相应色谱峰的ESI/MS2的质谱图，对其进行解析，加Z与对照品的tR和UV的比较，鉴别出蝮蛇肉水提液中主要含有尿卩密喘、次黄卩票吟、肌昔和鸟昔4种成分。对蝮蛇肉的水溶性成分进行了抗氧化实验，采用对DPP1I自由基的清除率为指标，证明蝮蛇肉水溶性成分具有一定的抗氧化活性。对蝮蛇药材建立了完整的质量标准。关键词：蝮蛇生物碱高效液相色谱/质谱抗氧化活性质量标准ABSTRACTFirst,weextractedA