放免作业指导书

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1、［仪器］放射免疫Y计数器［方法］放射免疫分析法［原理］将甲状腺制成衍生物（T3X）后，与血清蛋口的结合能力失去或大大减弱，但仍完全保持原有的与相应抗体的结合能力•在反应休系中，当血淸蛋口、抗血淸同时存在时，几乎不与血淸蛋片结介。人血清屮的FT3抗原和一定量的血

2、-T3X与限量的T3抗体竞争结合，形成抗原抗体复合物。加如免疫分离剂，使免疫复合物沉淀出來。离心片，抽弃上清液，用Y计数仪测量沉淀的放射性计数（cpm）o血清屮FT3含量越高，试管中沉淀的cpm值越低；血清屮FT3含量越低，试管屮沉淀的cpm

3、值越高。血清屮FT3含量可通过标准曲线反算岀來。［步骤］1、静脉全血2・5ml2、2小时内分离血清。3、首先对试管标号:T（总计数），NSB（非特异结合）,So（最大结合）和S】至S6,QC（质控品）以及u（样本），然后按卜•表加样顺序操作。（单位M）试剂、TNSBSoSi-S6QCu零标准100100标准品100质控品100样本100标记物100100100100100100蒸韬水100抗体100100100100摇匀后,37°C温育1小时分离剂500500500500500摇匀厉，室温放置15分

4、钟;3500rpm离心20分钟，抽弃上清液（T管除外），测沉淀cpm.4、反应类型：放射免疫技术5、止常范围：＜3.19^9.15pmol/L［校准］使用国家质控品进行校准。［试剂］1、标准品:7瓶,So"S6,So液体2mL,S.-Se浓度分别为0.3、1、3、9、27、81pmol/Lo使用时，加1.OmL蒸馅水溶解，轻轻摇动，静置10分钟厉使用。2、⑵

5、—标记物：1瓶，红色。含放射性强度小于5MCi的125I-T3X及稳定剂等。3、抗体：1瓶，蓝色。含T3抗血清及稳定剂等。4、免疫分离剂：1瓶

6、，内含PEG、二抗血清等。加样前必须摇匀。5、质控品：3瓶，（低、中、高）。厂家：潍坊三维生物工程集团有限公司。［注意事项］1.试剂和样本量可按比例改变。2.标本尽快测定，否则应冰箱冷冻。［储存条件和效期］2°C-8°C避光保存可稳定至有效期。［临床意义］T4、T3被水解后进入血液,99.98%的几和99.8%的T3以非共价健与血浆蛋白结合，其余为FT.O.02%和FT30.2%0而FT：,、是实际进入靶细胞与受体结合而发挥作用的激素物质。故甲状腺的机能状态与循环屮FT：,、F「的水平密切相关。可以

7、做为区别甲亢、甲低及甲功的亚临床状态。其正常值不受TBG各种情况卜•增加和减少的影响，是反应甲状腺功能的灵敏指标，1989年Hamburger推荐以高灵敏度的TSII、F%和FT-为甲状腺功能测定的首选方法已被临床界广泛采纳。［仪器出现故障采取的措施］1.仪器出现任何故障则应上报科主任和设备科。2.作相应保养、检测措施。3.设备科丄程师不能处理，则联系厂家丄程师：上海核福光电仪有限公司。［质量保证措施］（1）人员要求：操作人员必须是专门进修或培训过的人员，或者在专门进修或培训过的人员指导下才能操作。

8、（2）实验条件：温度：18-25°C，测定时温度在±2°C以内；湿度：30-70%RIIo（3）仪器保养：表面清洁、紧固易松动的螺丝和零件，检查运转是否正常，零部件是否完整。清洁内部，检查有无异常情况（声音、湿度、指示灯）。（4）试剂要求：a、精密度：批内W6%,批间相对极差W6%。b、准确度：测定质控血清，偏差W20%。（5）室内、室间质控：开展室内、室间质控。（6）干扰因素纠正：严重脂浊、黄疸、溶血等标本应建议重留标木测试。（7）病人准备、标本要求：抽血时，最好空腹、不要输液。（8）参考资料：來

9、源于厂家仪器、试剂使用说明书。作业指导书3.12.2游离四碘甲腺原氨酸（FT4）版本第1版版次第0次修改页码第617页共38页文件编号JY/FMZY/002受控状态在控［仪器］放射免疫Y计数器［方法］放射免疫分析法［原理］本项忖采用竞争性放射免疫分析方法，将卬状腺激素制成衍生物（T4X）后，与血清蛋白的结合能力失去或大大减弱，但仍完全保持原冇与相应抗体的结合能力。在反应体系中，当血清蛋口、抗血清同时存在时，几乎不与血清蛋白结合。人血清中的FT4抗原和一定量的I一T4X与限量的T4抗体竞争结合，形成抗

10、原抗体复合物，加入免疫分离剂，使免疫复合物沉淀岀來，离心后，抽弃上淸液，用Y计数仪测量沉淀的放射性计数（cpm）o血淸中FT4含量越高，试管中沉淀的cpmffi越低；血淸中FT4含量越低，试管中沉淀的cpm值越高。血淸中FT4含量可通过标准曲线反算出来。［步骤］1、静脉全血2.5ml2、2小时内分离血清3、首先对试管标号：T（总计数），NSB（非特异结合），So（最大结合）和Si至S6,QC（质控品）以及U（样本），然后按下表加样顺序操作。（单位M）试剂'TNSBSo