基因工程及其应用附

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1、最新款的摩托车你想过吗?谁能告诉我这是ＷＨＡＴ？谁能告诉我这是ＷＨＡＴ？谁能告诉我这是ＷＨＡＴ？问题探讨为什么能把人的基因“嫁接”到细菌上吗？你能推测出，这种基因的“嫁接”是怎么实现的吗？你能举出一些类似的、与你的生活关系很密切的例子吗？不同生物的DNA在结构上具有统一性、几乎所有的生物都共用一套遗传密码等。能发光的水母不能发光的热带斑马鱼能否能否让热带鱼也能发光?设想抗虫害的玉米抗虫棉能产生人胰岛素的大肠杆菌基因工程：即。通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造

2、，然后放到另一种生物的细胞里，地改造生物的。原理：操作水平：结果：基因工程基因重组DNA分子水平定向地改造生物的遗传性状，获得人类所需要的品种。基因拼接技术或DNA重组技术定向遗传性状1、限制性核酸内切酶——基因的剪刀（简称：限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离和纯化。（可以从细菌和霉菌中提取）（2）作用：识别双链DNA中某特定的核苷酸序列。（作用特点是具有专一性）（3）结果：产生黏性末端一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子。二、基因工程的工具限制酶A磷酸

3、二酯键GA例如：大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开黏性末端黏性末端限制酶什么叫黏性末端？被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。限制性内切酶（EcoRⅠ）作用过程点击播放被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端？思考:形成的黏性末端不同不同的限制酶呢？具有2、基因工程的指“DNA连接酶”“”作用：将互补配对的两个粘性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子DNA连接酶的作用过程

4、点击播放基因的针线DNA连接酶GAATTCCTTAAGGAATTCCTTAAGGCTTAAAATTCGGCTTAAAATTCGGCTTAAAATTCG用同种限制酶切割磷酸二酯键磷酸二酯键DNA连接酶和DNA聚合酶是有区别吗？有区别。DNA连接酶和DNA聚合酶均是催化成磷酸二酯键。两者的差别主要体现在：（1）DNA聚合酶只能将单个核苷酸相连，DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成键。（2）DNA聚合酶是以一条DNA链为模板，DNA连接酶是将DNA双链的两个缺口同时连接起来。要让一个从甲生物细胞内取

5、出来的基因(如人胰岛素基因),送入受体细胞(如大肠杆菌),还需要有运输工具,这就是运载体。3、基因的运输工具——运载体常用的运载体：质粒、噬菌体和动植物病毒大肠杆菌的质粒最常用的质粒是大肠杆菌的质粒，其中常含有抗药基因，如四环素的标记基因。质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性作用，但复制只能在宿主细胞内进行。细胞染色体（拟核DNA分子）以外能自主复制的小型环状DNA分子。作为运载体必须具备哪些条件？1.能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。2.具多个限制酶切点，以便与外源基因连接。3.具有标记基因

6、，便于进行筛选。如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因、荧光基因等。举例说明什么是目的基因？什么是供体细胞﹑受体细胞？怎样确定目的基因是否导入？三、基因工程的操作步骤1、获取目的基因基因工程的第一步，是取得人们所需要的特定基因，也就是目的基因如抗虫基因、人的胰岛素基因、干扰素基因等都是目的基因。1、直接分离基因2、人工合成基因目的基因的提取方法2、目的基因与运载体结合用与提取目的基因相同的限制酶切割质粒使之出现一个切口，将目的基因插入切口处，让目的基因的黏性末端与切口上的黏性末端互补配对后，

7、在连接酶的作用下连接形成重组DNA分子。细菌供体细胞取出质粒取出DNA用限制酶切断DNA用连接酶连接目的基因3、将目的基因导入受体细胞将重组DNA导入受体细胞扩增4、目的基因的检测和鉴定大量的受体细胞接受不多的目的基因。处理的受体细胞中真正摄入了目的基因的很少，必须将它从中检测出来。将每个受体细胞单独培养形成菌落，检测菌落中是否有目的基因的表达产物。淘汰无表达产物的菌落，保留有表达产物的进一步培养、研究。无表达产物无表达产物有表达产物无表达产物1、要使目的基因与对应的载体重组，所需的两种酶是（）

8、①限制酶　　②连接酶　③解旋酶　　④还原酶　　　Ａ．①②　　　Ｂ．③④Ｃ．①④　　Ｄ．②③A4﹑实施基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限制性内切酶．一种限制性内切酶能识别ＤＮＡ分子中的ＧＡＡＴＴＣ顺序，切点在Ｇ和Ａ之间，这是应用了酶的（　　）Ａ高效性Ｂ专一性Ｃ多样性Ｄ催化活性受外界条件影响Ｂ5﹑上海医学遗传研究所成功培育出第一头携带白蛋白的转基因牛，他们还研究出一种可以大大提高基因表达的新方法，使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高３０多倍，转基因动物是指（　　）