高纯度低聚果糖制备研究进展

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1、高纯度低聚果糖制备研究进展2007年第2期(总第99期)米运宏1邓梁华1黄扩宇2(1.广西南宁化学制药有限责任公司,南宁530031:2.广西上思中学生物科研组,上思535000)摘要:本文主要概述了高纯度低聚果糖的质量标准及其在国内外制备方法研究进展,目前生产高纯度低聚果糖过程主要存在的问题。关键词:低聚果糖,固定化果糖基转移酶,葡萄糖界构酶,衙萄糖氧化酶,纳滤膜分离,色谱分离前言低聚果糖(fructooligsacchride,FOS)乂名蔗果低聚糖,寡果糖或蔗果三糖族低聚糖,分子式为G-F-Fn(n=l,2,3,G为匍萄糖,F为果糖

2、),它是由蔗糖和1〜3个果糖基通过B・l,2莒键与蔗糖中的果糖基结合而成的蔗果三糖(GF?),蔗果四糖(GF3)和蔗果五糖(GF4)等一类碳水化合物总称。具有明确生理功能及清晰功效成分,是近几年兴起的一种功能性低聚果糖。目両市场上的产站大都是通过微生物发酵产生的B-果糖基转移酶(B-fructosy1transferase,EC2.4.1.99)或B-吠喃果糖昔酶(P-fructofuranoside,EC3.2.1.26)作用于30-60%蔗糖溶液进行分子内果糖廿转移反应生成的,纯度只有50%-60%,其中,匍萄糖和果糖(1-3%)25

3、-38%,蔗糖山9%・25%,由于糖浆内杂冇葡萄糖、蔗糖和少量果糖,影响了低聚果糖生理功能,大部份低聚果糖特有的生理功能是指用高纯度的低聚果糖作实验血得结论,同时纯度不高吋影响其应用,如纯度50%低聚果糖浆,糖尿病患者食用后血糖会很快升高,空腹食用30亳升,30分钟后血糖很快从4.20mmol/l升至5.84mmol/l,而空腹食用纯度为93%的低聚果糖糖浆,30分钟后血糖波动很小,从4.12mmol/l升至4.18mmol/L为此,研制高纯度低聚果糖,提高其市场容量是各企业研究热点,木文以下介绍冃前高纯度低聚果糖几种制备方法。1.高纯度

4、低聚果糖质量标准⑷1.1感官指标糊浆为无色或淡黄色透明粘稠液体,带蔗果低聚糖清香,甜味柔和清爽,无异味,无肉眼可见杂质。糖粉为白色无定型粉末(颗粒为白色无定型颗粒),味甜,带蔗果低聚糖清香,无弄味,无肉眼可见杂质。1.2理化要求表1理化指标项FI糖浆指标糖粉(颗粒)指标P型糖浆(优级)P型颗粒(优级)P型粉末(优级)水份,g/100gW25.03.03・0nJ*溶性固形物(总糖),%75.0——pH值4.5-7.0——低聚果糖总含量(占总糖),%95.095.095.0匍萄糊+果糖+蔗糖之和(占总糖),%5.05.05.0硫酸灰份,%W0

5、.40」色度W0.2——透光率,%285——种(以As计),mg/kgW0.30.3铅(以Pb计),mg/kgW0.50.51.3卫生指标表2项冃名称指标菌落总数,cfll/g1000大肠菌样,MPN/100g30霉菌,ctu/g25酵母菌cfu/g25致病菌(系指肠道致病菌和致病性球不得检出2高纯度低聚果糖制备方法2.1分步结晶法G型低聚果糖是由蔗果三糖、廉果四糖、蔗果五糖、蔗果兀糖、蔗糖、葡萄糖和少果糖混合在一起的朵合物。由于不同的糖类有不同的结晶性,在混合液中葡萄糖和蔗糖比杂合物中其它糖类容易结品析出,利用此性质从G型低聚果糖糖浆中

6、分离出部分葡萄糖和蔗糖,以提高杂合物内低聚果糖含量。如把G型低聚果糖糖浆(低聚果糖含量为50-55%,占T•物质)浓缩到干物质75-80%,然后慢慢冷却到25-35°C时,加入2-5%,80-160@的葡萄糖晶种,用6-20W分搅拌,温度以每小时降0.2-0.5°C速度降至10-14°C,最后离心取上清液用高效液相色谱检测到低聚果糖含量70%左右。2.2色谱分离法此方法在日本和韩国是主流,是在含50-60%低聚果糖浆(FOS5())的基础上,通过色谱分离柱进行色谱分离的方法把FOS50产品屮葡萄糖和人部份蔗糖除去,得到低聚果糖含量95%(

7、FOS95)以上产品。国内也有专利报道⑵用HZ001树脂进行柱层析法分离FOS50产品,得到FOS含量为80%产品,但离高纯度的低聚果仍有一定差距。2.3发酵法国内有学者采用底物选择性髙微牛.物消耗FOS50产品的葡萄糖,而対低聚呆糖则不能利用作为其消耗底物。张涛、江波等⑶用选择性高的、耐高糖的酵母菌SK2.003作用于T物质25%的FOS50得到低聚果糖含最为82.85%产品,然后再用果糖基转移酶处理酵母反应液最后得到低聚果糖含量为85.23%的产品。2.4纳米膜分离技术纳米膜分离技术是介于超滤和反渗透之间的一种膜分离技术其截流分子量在

8、100-1000道尔顿Z间。选择合适的膜型可以将低聚果糖中的蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖和蔗果六糊等截流而分子最相对小的匍萄糊、果糖和部份蔗糖会通透过膜从而使低聚果糖得以分离出來。把FOS50

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