【生物工程专业】【毕业设计+文献综述+开题报告】天然色素生产菌的鉴定

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1、(20届)毕业论文(设计)天然色素生产菌的鉴定摘要:黑色素是广泛存在于生物界中的一类色素,是头发、皮肤、昆虫表皮、植物、动物、真菌等表现黑色的本源。本研究主要是从土壤中分离得到一株产黑色素菌株,根据菌落形态和常规生理生化初步鉴定为一株放线菌。为了进一步确定该菌株在分类学上的位置,对其进行16SrRNA的分子鉴定,结果显示:与链霉菌属的同源性为98%。关键词:黑色素;菌种鉴定;测序Abstract:Melaninisakindofpigmentthatwidelyexistsinbiological.Itisblacksourceofthehair,skin,insec

2、tcuticle,plants,animalsandfungietc.Thestudyinvestigatedthestrainproducingblackpigmentwasisolatedfromsoil.Thestrainwasidentifiedbytheshapeandgeneralphysiologicalandbiochemicalproperties.Theresultshowedthestrainwasactinomyces.Inordertoconfirmthelocationintaxonomy,16SrRNAsequenceofthestrai

3、nwassequencedandithadthesimilarityof98%withthatoftheStreptomyces.Keywords:blackpigment;strainidentification;sequencing摘要错误!未定义书签。Abstract错误!未定义书签。1绪论错误!未定义书签。1.1黑色素的性质11.2黑色素生产21.2.1应用分离出的细菌21.2.2发酵生产21.3黑色素的代谢调21.3.1遗传21.3.2疏氢基(-SH)31.3.3内分泌31.3.4紫外线31.3.5角航细胞因子31.4实验研究的内容与难点32实验部分52.1

4、实验材料、药品和器材52.1.1实验材料52.1.2实验药品52.1.2实验仪器52.2菌落及生理生化鉴定62.3.1菌种培养62.3.2基因组提取62.3.3凝胶电泳82.3.4PCR扩增82.3.5切胶回收92.3.6连接反应102.3.7感受态细胞的制备102.3.8转化反应102.3.9鉴定112.3.10质粒DNA的提取113结果与分析123.1菌落及生理生化鉴定123.2分子鉴定123.2.1基因组凝胶电泳图谱123.2.2PCR扩增133.2.3转化反应133.2.4导入后的PCR扩增143.2.5质粒提取142.2.6基因测序153.2.7构建进化树1

5、74结论18参考文献19致谢211绪论1.1黑色素的性质黑色素是广泛存在于生物界中的一类色素,它是头发、皮肤、昆虫表皮、植物、动物、真菌等表现黑色的本源⑷。微生物所产黑色素主要分为胞内、壁结合和胞外黑色素刃。黑色素能作为紫外线吸收剂⑶、抗氧化剂⑷、白由基清除剂⑸、阳离子螯合剂和新型天然的药物载体,也可以用来治疗•黑色素缺乏有关的神经系统疾病如着色性干皮病;具有体外抗HIV病毒的作用。黑色索通常不溶于水、酸溶液和普通冇机溶剂。黑色索的黑色是因为它吸收所冇波长的可见光。黑色素在紫外区的吸收率最高,随着波长的增加何逐渐降低,通常光吸收的降低与波长的增加是呈线性的。因此,光吸

6、收线性曲线的斜率可作为鉴定自然來源黑色素的特征参数。研究者认为,不同类型的黑色素其光吸收斜率值是不同的。但因黑色素氧化麻斜率的改变而不能把其作为黑色素分类的依据“J黑色索广泛存在于人体皮肤、眼睛及其它组织小,是目前所知道的唯一保护皮肤免受辐射伤害的天然生物聚合体⑹。因此,它在医疗、食胡和化妆晶工业中的应用潜力巨人。已有研究证明了链霉菌所产黑色素对苏云金芽抱杆(Bac订lusthuringiensis简称Bt)以色列亚种杀虫活性的光保护作用。国外学者对Bt库斯塔克亚种进行连续的紫外诱变,得到了能产黑色素的Bt突变株⑻。日前己经报道了多种微生物可产生黑色素。C00C00C

7、00*图1黑色素结构图(部分结构)1.2黑色素生产1.2.1应用分离出的细菌目而从武汉东湖中分离出-•株高产胞外黑色素的细菌(BFHM2002)。BFHM2002具有产黑色素速度快,产量高且不需要酪氨酸诱导等优点;而且经酪氨酸诱导可显著提高BF2HM2002胞外黑色素的产虽,初步鉴定BFHM2002属坚强芽抱杆菌(Sac〃皿力加财)。由于BFHM2002的产黑色索特性,它将成为芽抱杆菌属的一个新的菌种资源。1.2.2发酵主产链霉菌是一种很重要的次生代谢物产牛•菌种,有可能通过基因工程方法,使同一菌种既能产生黑色素,同时又能产生某种抗生素,通过优化其发

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