江苏专用2019高考生物二轮复习专题十现代生物科技专题考点29基因工程蛋白质工程和细胞工程学案

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1、考点29　基因工程、蛋白质工程和细胞工程[直击考纲]　1.基因工程的诞生(A)。2.基因工程的原理及技术(含PCR技术)(B)。3.基因工程的应用(B)。4.蛋白质工程(A)。5.植物的组织培养(B)。6.动物细胞培养与体细胞克隆(A)。7.细胞融合与单克隆抗体(B)。8.动物胚胎发育的基本过程(A)。9.胚胎工程的理论基础(A)。10.胚胎干细胞的移植(A)。11.胚胎工程的应用(B)。12.转基因生物的安全性(A)。13.生物武器对人类的威胁(A)。14.生物技术中的伦理问题(A)。15.生态工程的原理(A)。16.

2、生态工程的实例及应用(B)。1．基因工程常考的3种基本工具(1)限制性核酸内切酶：识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并在特定位点上切割DNA分子。(2)DNA连接酶：①E·coliDNA连接酶只能连接黏性末端；②T4DNA连接酶能连接黏性末端和平末端。(3)载体：①能在宿主细胞内稳定存在并大量复制。②有一个至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段(基因)插入其中。③具有特殊的标记基因——以便对含目的基因的受体细胞进行鉴定和选择。2．基因工程的4大操作程序(1)目的基因的获取：①从基因文库中获取。②利用PCR技术扩增：

3、a.原理：DNA双链复制。b.条件：模板DNA、引物、游离的脱氧核苷酸、热稳定的DNA聚合酶。③用化学方法直接人工合成。(2)基因表达载体的构建①基因表达载体模式图②基因表达载体的构建过程(3)将目的基因导入受体细胞①导入植物细胞：农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法。②导入动物细胞：显微注射技术。③导入微生物细胞：感受态细胞法(用Ca2＋处理)。(4)目的基因的检测与鉴定①插入检测：DNA分子杂交技术。②转录检测：DNA—RNA分子杂交技术。③翻译检测：抗原—抗体杂交。④个体水平检测：抗性接种实验。3．图解记忆蛋白质工

4、程4．比较记忆植物组织培养与动物细胞培养项目植物组织培养动物细胞培养取材植物幼嫩部位动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织过程结果获得植株个体，可以体现全能性新的细胞，不形成个体，不体现全能性条件①无菌；②营养；③适宜条件①无菌、无毒；②营养、血清等；③温度和pH；④气体环境：O2、CO25.植物体细胞杂交与单克隆抗体制备过程比较步骤植物体细胞杂交过程单克隆抗体制备过程第一步原生质体的制备(酶解法)正常小鼠免疫处理第二步原生质体融合(物理、化学法)动物细胞融合(物理、化学、生物方法)第三步杂种植株的筛选与培养杂交瘤细胞

5、的筛选与培养第四步杂种植株的诱导与鉴定单克隆抗体的提纯相同点①两种技术手段的培养过程中都进行有丝分裂，都是无性繁殖，都可称为克隆，都不涉及减数分裂；②均为无菌操作，需要适宜的温度、pH等条件(1)诱导融合的方法分别有哪些？融合的细胞类型有哪几种(仅考虑两两融合的细胞)?提示　①诱导植物体细胞的原生质体融合的方法主要有离心、振动、电激或用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂。②动物细胞融合常用的诱导因素有聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒(诱导动物细胞融合的特有因素)、电激等。融合的细胞类型：前者—AA、BB、AB。后者—瘤瘤、B瘤、

6、BB。(2)各自的原理分别有哪些？提示　前者有细胞膜的流动性和植物细胞的全能性，后者有细胞膜的流动性和细胞增殖。6．掌握克隆动物培育的流程7．理清单克隆抗体制备的过程题组一　基因工程和蛋白质工程1．(2018·南通、泰州联考)乙型脑炎和伪狂犬病是猪的两种常见传染病。如图是利用基因工程技术生产能同时预防这两种病疫苗的流程图，其中PrM为乙型脑炎的特异性抗原基因，PK、gG、gD为伪狂犬病的主要抗原基因，TK为伪狂犬病的毒性基因，pgG为启动子，BamHⅠ和EcoRⅠ为两种限制酶，其识别序列及切割位点分别是G↓GATCC、G

7、↓AATTC。请回答下列问题：(1)过程①所需的酶有____________和____________。下列四种引物中适用于过程①的一对引物是________。P1：5′TTGGATCCATGGAAGGCTCAATCATGTG3′P2：5′CACAAGCTTAGATGACGTATCCAAGGAG3′P3：5′TACGGTACCTTAGGGGTTAAGTGGG3′P4：5′GCGAATTCTAACTGTAAGCCGGAGCG3′(2)过程②所需的酶有__________________________。过程③中要用Ca2＋

8、处理大肠杆菌，其目的是________________________________________。(3)重组伪狂犬病毒中不带TK基因的优点是________________________________。(4)将获得的病毒疫苗注射到猪体内，一方面病毒中抗原基因在猪细胞中大量表达，诱导猪获得__________