2020版高考生物一轮复习 课时规范练36 基因工程(含解析)苏教版

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1、课时规范练36 基因工程非选择题1.(2018全国Ⅱ理综)某种荧光蛋白(GFP)在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光,这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达,某科研团队将某种病毒的外壳蛋白(L1)基因连接在GFP基因的5'末端,获得了L1-GFP融合基因(简称为甲),并将其插入质粒P0,构建了真核表达载体P1,其部分结构和酶切位点的示意图如下,图中E1~E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。回答下列问题。(1)据图推断,该团队在将甲插入质粒P0时,使用了两种限制酶,这两种酶是      ,使用这两种酶进行酶切是为了保证      

2、,也是为了保证          。 (2)将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后,若在该细胞中观察到了绿色荧光,则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了    和    过程。 (3)为了获得含有甲的牛,该团队需要做的工作包括:将能够产生绿色荧光细胞的    移入牛的        中,体外培养、胚胎移植等。 (4)为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中,某同学用PCR方法进行鉴定,在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的    (填“mRNA”“总RNA”或“核DNA”)作为PCR模板。 答案(1)E1和E4 甲的完整 甲与载体正确连

3、接 (2)转录 翻译 (3)细胞核 去核卵母细胞 (4)核DNA解析本题考查基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关内容。(1)由题意可知,E1~E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同,将甲(L1-GFP)插入质粒时,使用E1和E4两种限制酶进行酶切,既保证了甲的完整,又防止了甲的自身环化,保证了甲与载体的正确连接。(2)将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后,若在该细胞中观察到了绿色荧光,则说明该细胞中合成了荧光蛋白,即L1基因在牛皮肤细胞中完成了遗传信息的转录和翻译。(3)为了获得含有甲的牛,可通过体细胞核移植技术、体外培养和胚胎移植来实

4、现。(4)克隆牛的不同组织细胞中的基因选择性表达,转录出的mRNA不同,总RNA也不同,但不同组织细胞中的核DNA相同,因此检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中,用PCR方法进行鉴定时,应以核DNA作为模板。2.P5CS是植物合成脯氨酸的关键酶,脯氨酸有助于植物抵御干旱。下图是将P5CS基因转入烟草细胞获得耐旱烟草植株过程的示意图。请回答下列问题。(1)要将P5CS基因成功插入Ti质粒中,Ti质粒的           中应含有HindⅢ、SalⅠ限制酶切割位点。③过程需在培养农杆菌的培养基中添加           才能筛选

5、出含P5CS基因的Ti质粒的农杆菌。 (2)检测P5CS基因是否整合到烟草细胞染色体DNA上,采用              技术,判断转基因是否成功,可以直接在个体水平上对转基因植物与非转基因植物的        性进行比较。 (3)将转入P5CS基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用               技术,愈伤组织通过               发育成完整植株,在此过程中,除营养物质外,还必须向培养基中添加                    。 答案(1)T-DNA 四环素 (2)DNA分子杂交 抗旱(耐旱)

6、 (3)植物组织培养 再分化(细胞增殖和分化) 植物激素(生长素和细胞分裂素)解析(1)质粒中的T-DNA又称为可转移的DNA,可以将携带的目的基因转移到受体植物细胞的染色体中去,所以该基因工程要成功,最好将目的基因重组到T-DNA中;因此Ti质粒的T-DNA中应含有HindⅢ、SalⅠ限制酶切割位点。由于重组质粒中含有完整的抗四环素基因,因此③过程需在培养农杆菌的培养基中添加四环素才能筛选出含P5CS基因的Ti质粒的农杆菌。(2)检测目的基因(P5CS基因)是否整合到烟草细胞染色体DNA上,应采用DNA分子杂交技术;根据题意,

7、P5CS是植物合成脯氨酸的关键酶,脯氨酸有助于植物抵御干旱,因此转基因是否成功可以直接在个体水平上对转基因植物与非转基因植物的抗旱性进行比较。(3)将转入目的基因(P5CS基因)的烟草细胞培育成完整的植株需要用植物组织培养技术,愈伤组织通过再分化成完整植株,此过程除营养物质外还必须向培养基中添加生长素和细胞分裂素。3.(2017全国Ⅱ理综)几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分,几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内,可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题。(1)在进行基因工程操作时,若要从植物体中提取几丁质酶

8、的mRNA,常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料,原因是                 。提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是         。 (2)以mRNA为材料可以获得cDNA,其原理是                         

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