仪器分析课程实验指导书

《仪器分析课程实验指导书》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、浙江理工大学生命科学学院仪器分析实验指导书学生：教师：实验一紫外光谱分析实验二原子吸收分光光度法实验三红外光谱法定性分析方法4〜610〜12实验四高效液相色谱法定性定量分析实验五质谱法测定化合物的结构13〜14实验一、紫外光谱分析一、内容：紫外吸收光谱法测定苯的含量二、目的：1.了解紫外光度法测定苯的原理和方法。2.了解？型紫外可见分光光度计的构造、性能及使用。三、要求：能用紫外一可见分光光度法定量测定组分含量，绘制标准曲线，求出未知样浓度，交一份规范的实验报告。四、仪器、试剂：紫外一可见分光光度计，石英比色皿（1cm

2、）,容量瓶（lOmL）,吸量管（5mL）。苯（色谱纯），无水乙醇（分析纯）五、方法原理许多有机化合物或衍生物，在可见和紫外区有吸收光谱，各种物质分子有其特征的分子吸收光谱（吸收曲线）。吸收光谱的形状和物质的特性有光，可作为定性鉴定的根据，而在某选定的波长下，测量其吸光度即可对物质进行定量分析。紫外光谱用丁•定量分析符合朗伯一比尔定律，即A二KCL式中A为吸光度，K为吸收系数，C为溶液浓度，L为液层的厚度。如果溶液的浓度以摩尔浓度表示，液层厚度为lcm时的吸收系数称为摩尔吸收系数，并以一表示，A二八C吸收系数也可以用百

3、分比吸收系数（Elk）来表示,此时浓度C=l%（g/lOOml）,液层厚度为lcnio某物质在最人吸收波长处所得的吸收系数£杠或（E

4、是物质在一定条件下的特征常数，是鉴定物质的重要依据。六、实验步骤：1、苯标准溶液的配制：准确称取色谱纯的苯约50mg（准确到0.Img）于100ml容量瓶屮，加入无水乙醉溶解并稀释到刻度，摇匀，此苯标准溶液浓度约为0.1%。2、苯吸收曲线的绘制：吸取上述浓度为0.1%的苯标准溶液4mlT10ml容量瓶中，用无水乙醇稀禅至刻度，摇匀，此溶液浓度约为0.04%,然后用lcm石英比色皿，以无水

5、乙醇作参比溶液，在紫外分光光度计上，从波长240-270nm,扫描,分别测定该溶液的吸光度，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制苯在此波长范围内的吸收曲线，并找IBXiraxo3、乙醇试样中含量的测定：（1）标准曲线法：A、苯标准曲线的绘制分别吸取浓度约为0.1%的标准溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml于5只10ml容量瓶中,用无水乙醇稀禅至刻度，摇匀，川lcm石英比色皿，以无水乙醇为参比溶液，在入吨处分别测定其吸光度。以吸光度为纵朋标，苯的浓度为横朋标绘制标准曲线。B、测定乙醇试样中苯的含量：准确吸取含苯

6、的试样（吸样量视苯含量而定）于10ml容量瓶屮，川无水乙醉稀释至刻度，摇匀，用lcm石英比色皿，以无水乙醇为参比溶液，在入n和处分别测定试样溶液的吸光度。根据苯的标准曲线査得相应浓度C样。（2）对照法：与标准殆的己知浓度的比较：川1cm右英比色HIL，以无水乙醇为参比溶液，在入max处分别测定苯标准溶液及上述试样溶液的吸光度A标和A样。试样溶液中苯的浓度依下式计算：C=A标/A样XC标注：此法须为苯标准曲线呈线性时适用。七、讨论及练习：1.紫外、可见所用比色皿的材料有何不同？2.如何确定测定波长？八、结束整理数据清洗仪

7、器打扫卫生实验二原子吸收分光光度法一、内容：原子吸收分光光度法测定矿石中的铜二、目的：1.了解原子吸收分光光度计的基本结构和使用方法。2.观察了解空心阴极灯电流、火焰高度、火焰状态等凶素对吸光度值的影响。3.掌握原子吸收分光光度法进行定量测定的方法。三、要求：熟悉原子吸收光谱法的应用，掌握火焰原子吸收光谱仪的操作技术。四、仪器、试剂：原子吸收分光光度计，空心阴极灯(镁、铜灯各一只)，空气压缩机，乙烘钢瓶，容量瓶(50mL,100mL,1000niL),移液管(5mL),烧杯(100mL,250mL)五、方法原理原子吸收

8、光谱法基丁•从光源发出的被测元素的特征辐射通过样品蒸气时，被待测元素基态原子所吸收，由辐射的减弱程度求得样品中被测元素的含量。在锐线光源条件下，光源的发射线通过一定厚度的原子蒸气，并被基态原子所吸收，吸光度与原子蒸气中待测元索的棊态原子数间的关系遵循朗伯一比耳定律：^=log7o/Z=KLN式中力为吸光度；厶为入射光强度；/为经过原子蒸气吸收后的透射光强度；《为吸光系数，厶为光波所经过的原子蒸气的光稈长度，川为基态原子密度。在火焰温度低于3000K的条件下，可以认为原子蒸气屮皋态原子的数「I实际上接近于原子总数。特定的

9、实验条件下，原子总数与试样浓度d的比例是恒定的，所以，上式乂可以写成：这就是原子吸收分光光度法的定量基础。常川的定量方法为标准曲线法和标准加入法等。原子吸收分光光度计主要组成部分包括光源、原子化器、分光系统和检测系统。其光路如图2—1所示。图2-1原子吸收分光光度计光路图1.空心阴极灯；2.火焰；3.入射狭缝；4.凹而反射镜；5.