【精品】几种真菌的分离与鉴定

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1、常见真菌的分离与鉴定病原真菌的一般特性真菌（Fungi）是微生物中的一个大类，是一群数冃庞大的细胞生物，估计全世界已有记载的真菌有10万种以上。它们的子实体小者用显微镜才能见到，大者可达数十厘米,它们共同特征是具有真正的细胞核，产生抱子和不含叶绿素,以寄生或腐生等方式吸取养料，仅少数类群为单细胞，其他都有分支或不分支的丝状体，能进行有性或无性繁殖，具有纤维素（或其他葡聚糖）或儿丁质的微纤维或两者兼有的细胞壁的有机体。对人类和动物致病的真菌大约100余种，加于病原真菌。一、基本性状（―）形态结构真菌分单细胞真菌与多细胞真菌两大类，前者属于酵母菌（yeast）

2、—般呈球形或卵圆形，后者称为霉菌（mold）或丝状真菌，呈丝状分枝，菌丝交织象绒球状,另有一些真菌可因寄生环境及培养条件（养料、温度、氧气等）的不同可交替出现两种形态，即在室温中呈霉菌型，在37°C或体内呈单细胞的酵母型，这类真菌有双相性，所以称Z为双态真菌或二相真菌。么口真菌的细胞结构与一般植物细胞相似，有定型的细胞核及完善的细胞器,但胞壁与细菌胞壁不同，不含粘肽而是由角质及葡聚糖组成，也含有脂多糖蛋白质，其中酵母菌及类酵母菌皆以出芽增殖，不生长真菌丝，革兰氏染色呈阳性，丝状真菌分菌丝及抱子两部分，形态多种多样，分述如Fo1.菌丝（Hypha）真菌在合适

3、的环境中，由砲子生出嫩芽，称为芽管。芽管逐渐延长呈丝状，称菌丝。菌丝继续生长并生长分枝，增殖的菌丝交织组成菌丝体。其中一部分菌丝深入被寄生的物体或培养基中吸取养料，称为营养菌丝休。另一部分菌丝向空间生长，称为气生菌丝体。气生菌丝体能产生他子者称为生殖菌丝体。菌丝屮各个细胞间有明显分隔者，称为有隔菌丝。主要见于病原性真菌。很多非病原真菌的菌丝无明显分隔，称为无隔菌丝。有些菌丝可呈各种特殊形式,如球拍状、破梳状、螺旋状、结节状、关节状、鹿角状、假菌丝。2.孑包子生成砲子是真菌扩大繁殖的一种方式。真菌孑包子的抵抗力、形态及作用等均与细菌芽胞不同，分为无性抱子及有

4、性抱子两人类。不经过两性细胞的结合而形成的砲子叫无性抱子，这一繁殖过程称为无性繁殖。常见的无性砲子有5种：关节砲子、厚壁抱子、砲子囊砲子、芽砲和分生抱子。病原真菌属于不完全菌纲，很少产生有性抱子，人多数是无性抱子。（1）厚壁抱子：当真菌在不利环境中，曲菌丝内胞浆缩浓和胞壁增厚而成,呈圆形。当环境好转时可生成芽管成长为菌丝。（2）关节孑包子：菌丝断裂形成长方形两端略钝圆的孑包子叫关节砲子。如口地霉和粗球孑包子菌。（3）孑包子囊孑包子：为鞭毛菌和接合菌的无性生殖形式。砲子囊中所含的孑包子来源于分枝菌丝或胞囊梗顶端膨大形成砲子囊，囊内原生质浓缩集聚，割裂而成，一

5、般数H较多，孑包子囊形态多样，因种而异。（4）芽生砲子：由菌细胞出芽生成，见于念珠菌及隐球菌，前者（类酵母菌）岀芽后砲子伸长呈丝状，但不见与母细胞分离，称为假菌丝，在假菌丝上的收缩点也可出芽成芽生抱子。（5）分生抱子：是子囊菌和半知菌的无性他子，也是半知菌分类的主要依据，单细胞的分生抱子称小分生抱子，有蒂或无蒂，侧生或游离，分散或成群，圆形、梨形、卵圆形或其它形状，表面粗糙或光滑，或有或无各种纹饰。多细胞的分生抱子称大分生砲子，有纺锤形、棒形、球棍形、镰刀形及其它形状，两端尖或圆或一端圆，厚壁或薄壁，壁光滑或粗糙，有色或无色，分隔有多有少。（-）培养特性及

6、繁殖方式1.培养特性大多数真菌对营养要求不高，只需要水、盐，简单的氮源及碳水化合物就可生长，--般常用沙堡氏琼脂基（主要成分葡萄糖4%、蛋白脓1%、琼脂2%）培养都能生长。但需要弱酸性（pH4〜6）、较低孵育温度（22〜28°C）,充分温度和氧气供应才能生长良好。侵害内脏的某些真菌在37°C含血的培养基中生长良好。真菌生长都比较缓慢，大多需孵育数天后才成明显菌落，菌落有下列三种类型：（1）酵母型菌落：外观湿润稠软致密，类似一般细菌菌落，镜检只见有圆形或椭圆形生芽细胞（例如隐球菌的菌落）。（2）类酵母型菌落：外观性状似酵母型菌落，镜检除见有出芽的细胞外，尚可

7、见到假菌丝（例如念珠菌的菌落）。（3）丝状型菌落：由多数分枝的菌丝体向上生长组成疏松的绒球状，表面有很多砲子，显示各种色泽，菌落可呈棉絮状绒球状粉末状或石膏样，其正面和背面可显示各种不同色素，常作为鉴定菌种的参考。镜检可见有纵横交织的菌丝及各种他子（例如各种癣菌的菌落）。2.繁殖方式有多样性，包括出芽增殖，菌丝增长，菌丝分枝和断裂，产生无性抱了及有性抱了进行繁殖，因此它繁殖力很强，但生长速度较慢。（三）变异性和抵抗力真菌很容易发生变异，在人工培养基中多次移种或孵育过久，就可出现形态结构、菌落性状、色素以及各种生理性状（包括毒力）的改变，用不同的培养基和温度

8、培养真菌，具性状也有改变，真菌对干燥阳光紫外线及一般化学消毒剂耐受