川贝母组培苗快速繁殖研究

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1、2013年11月四川师范大学学报(自然科学版)Nov．，2013第36卷第6期JournalofSichuanNormalUniversity(NaturalScience)Vo1．36，No．6川贝母组培苗快速繁殖研究王跃华，江明殊，何诗虹，郭翠平，刘涛，王晓蓉(1．成都大学生物产业学院，四川成都610016；2．四川师范大学生命科学院，四川成都610101；3．成都恩威集团(投资)有限公司，四川成都610041)摘要：建立川贝母组培苗快繁体系，为实现川贝母工业化育苗、保护野生植物资源和发展人工育种技术提供新的途径．研究

2、植物激素对川贝母鳞片叶形成愈伤组织、分化小鳞茎和诱导鳞茎抽苗以及无根苗生根的影响，筛选出最佳培养基配方．结果表明，愈伤组织诱导最佳培养基为Ms+6一BA1．0mL+2，4一D0．5mg／L，诱导率为84．33％；诱导产生小鳞茎的最佳培养基为MS+KT2．0mL+NAA0．3mg／L，诱导率为82．77％；鳞茎抽苗的最佳培养基为MS+6一BA3．0mg／L+IBA0．3mg／L，抽苗率为85．39％；无根苗生根最佳培养基为MS+NAA0．3mgCL，生根率为83．20％．关键词：川贝母；组培苗；繁殖中图分类号：R282．71

3、文献标志码：A文章编号：1001—8395(2013)06—0941—04doi：1O．3969／j．issn．1001—8395．2013．06．026川贝母(FritillariacirrhosaD．Don)为百合科贝为基本培养，蔗糖质量浓度为3OL和琼脂质量浓母属多年生草本植物，以其地下鳞茎入药，为名贵度为6．8L；在光照强度1000～l500lx，培养温的川产道地药材之一．药用植物川贝母生长在海拔度为20℃的条件下培养45d后统计愈伤组织诱导2800—4700m的高山灌丛或草地中J，主要依靠率并记录愈伤组织生长情况

4、．种子进行有『生繁殖，但因其种子存在形态和生理后1．2．2小鳞茎诱导的激素配比研究选取质地较熟的特性J，因此存在Jrl贝母种苗培育难度大、花紧密、生长速度快和颜色为黄色或淡黄色的愈伤组费时间长和繁殖系数低等问题．织，切成适当大小接入附加6一BA、NAA和KT组本文开展了川贝母组培苗快速繁殖技术的研合的培养基中，激素配比见表2．培养条件与1．2．1究，并对川贝母鳞片叶形成愈伤组织、分化小鳞茎相同，在培养45d后统计小鳞茎的诱导率．小鳞茎和诱导鳞茎抽苗以及元根苗生根的过程进行了较诱导率=产生小鳞茎的愈伤组织数／接种的愈伤组深入

5、的研究，旨在为实现川贝母工业化育苗技术提织个数X100％．供科学依据．表1不同激素配比对鳞片叶产生愈伤组织的影响Table1Efectsofdiferentplanthormonesonproductionofea~usofscaleleaf1材料与方法1．1材料本实验材料选自成都大学组培室培育的川贝母鳞茎．1．2方法1．2．1鳞片叶外植体产生愈伤组织的激素配比研究选择生长健康的川贝母组培再生鳞茎，在超净台上迅速将鳞片叶切下，分别接种于附加6一BA和2，4一D组合的培养基中，激素配比见表I．以MS注：培养45d统计结果收稿

6、日期：2013—05—10基金项目：成都市经济和信息化委员会科研项目(2012)，成都市科技计划项目(12GGYB413SW-001)和四川省科技支撑计划(20I1SZDO07)资助项目作者简介：王跃华(1963一)，女，教授，主要从事生药学的研究，E—mail：1961689636@qq．corn四川师范大学学报(自然科学版)第36卷1．2．3鳞茎抽苗的激素配比研究当小鳞茎直径织产生有毒效应，随着浓度的增加，生长后期加速生长到0．6cm左右时，转入附有6一BA和IBA组衰老，死亡]．合的培养基中，激素配比见表3；光照强度

7、1500～2．2愈伤组织分化产生小鳞茎的研究选取在上2000lx，其它培养条件与1．2．1相同，培养45d后述A培养基上继代培养2次、颜色为黄色和淡黄统计鳞茎的抽苗率．色质地紧密的愈伤组织，切成0．5～0．8cm左右的1．2．4生根待无根苗长至2cm高左右时，切取大小接入表2培养基中．在培养20d后可观察到愈无根苗转入由不同激素配比的培养基中，激素配比伤组织表面长出白色小突起，随后白色突起进一步见表4．生根培养基采用1／2MS为基本培养基，蔗生长成为圆形或圆锥形突起的小鳞茎雏体，随着培糖质量浓度为l5L，其它培养条件与1．

8、2．1相养时间的延长，小鳞茎体积逐渐膨大，培养45d后同，在培养60d统计生根情况．统计鳞茎的诱导率．从表2实验结果显示，在B和B培养基配方2结果与分析中6一BA的质量浓度一定时，随着NAA质量浓度由0．1mg／L增加到0．3mg／L时，其鳞茎的诱导率2．1不同激素配比对鳞片叶产生愈伤组织的影响随之增加