色谱技术精解

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1、色谱现象In1903，俄国植物学家MichaelTsweett’sWork(seeBer.Deut.Botan.Ges.,1906;24:384).Chromatography=(chromatus=color,graphein=towrite).A、图形包含的意义B、分离机制C、柱效D、分离度纸层析12色谱分离图示34层析谱的本质是使一种液体均匀地渗过一个相当细碎的物质的柱体，这些物质通过某种过程有选择地阻留了液体内的某些组分。马丁（A.J.P.Martin）（英）57液相色谱1、一般过程2、分类3、名词术语4、理论4.1、塔板理论4.2、速率理论4.3、分离度4

2、.4、定性分析4.5、定量分析4.6、定量方法5应用:违禁药物分析6层析的发展史年代发明者发明的色谱方法或重要应用1906Tswett用碳酸钙作吸附剂分离植物色素。最先提出色谱概念1931Kuhn,Lederer用氧化铝和碳酸钙分离a-、b-和g-胡萝卜素。使色谱法开始为人们所重视。1938TaylorUray用离子交换色谱法分离了锂和钾的同位素。1941Martin,Synge提出色谱塔板理论；发明液-液分配色谱；预言了气体可作为流动相（即气相色谱）。1952Martin,James从理论和实践方面完善了气-液分配色谱法。1956VanDeemter提出色谱速率理

3、论，并应用于气相色谱。1957基于离子交换色谱的氨基酸分析专用仪器问世。1958Golay发明毛细管柱气相色谱。1965Giddings发展了色谱理论，为色谱学的发展奠定了理论基础。1975Small发明了以离子交换剂为固定相、强电解质为流动相，采用抑制型电导检测的新型离子色谱法。1981Jorgenson创立了毛细管电泳法。77.1色谱原理与分类组件及过程：A色谱柱(column)：B固定相(stationaryphase)：C流动相(flowphase)：D洗脱液(elution)：E检测器(detector)：F部分收集器(portioncollector)8

4、7.1.2色谱分类1)、按应用的目的A、制备性色谱(preparationChromatography)：工业规模，实验室规模B、分析性色谱(analyticalChromatography)：GC、LC、HPLC、TLC等。92)、按流动相A、GC:气-固色谱法(固定相为固体)气-液色谱法(将不挥发的液体固定在适当的固体载体上作为固定相)B、LC液-固色谱(固定相为固体)液-液色谱(液体固定相固定在适当的固体上)103)、按色谱的展开形式A、柱色谱法B、毛细管色谱法C、平板色谱法：硅胶板色谱、纸色谱11按处理量分⑴分析色谱（10mg）⑵半制备色谱(10-50mg)

5、⑶制备色谱(0.1-1g)⑷工业生产规模色谱(>20g/d)年产10g合格的重组人粒细胞集落刺激因子（rhGM-CSF），其产值高达1亿元。RecombinantHumanGranulocyte-MacrophageColonyStimulatingFactor12CSF药理作用：重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-CSF）作用于造血祖细胞，促进其增殖和分化，其重要作用是刺激粒、单核巨噬细胞成熟，促进成熟细胞向外周血释放，并能促进巨噬细胞及噬酸性细胞的多种功能。13【适应症】1.预防和治疗肿瘤放疗或化疗后引起的白细胞减少症。2.治疗骨髓造血机能障碍及骨髓增生

6、异常综合征。3.预防白细胞减少可能潜在的感染并发症。4.使感染引起的中性粒细胞减少的恢复加快。14纸层析是一种常用的快速分离、鉴定方法，可用于定性分析以及确定分离方案，但一般不用于定量分析介质：滤纸操作方法：将试样溶于适当溶剂中，点样于滤纸的一端；选用适当的展开剂，借助毛细管现象从点样的一端向另一端流动，展开结束后，取下滤纸，晾干，染色显迹。15展开剂的选择展开剂可以是单一溶剂，也可以是混合溶剂。常用的氨基酸纸层析体系中使用的展开剂为：正丁醇-甲酸-水（15：3：2）展开方式：3种上行色谱下行色谱径向色谱16纸层析和薄层层析分离过程纸层析和薄层层析也属于色谱分析法。

7、但与其它色谱方法不同的是在分离过程中一般不使用动力源。纸层析和薄层层析流动相的移动是依靠毛细作用。将试样点在色谱滤纸或层析板的一端，并将该端浸在作为流动相的溶剂（常称之为展开剂）中，随着溶剂向上的移动，经过试样点时，带动试样向上运动。17薄层色谱法将固定相涂布在惰性固体上，形成薄层进行色谱分离的方法常用的固定相有：硅胶和氧化铝优点：设备简单、操作方便快速显色方式多，如可以选用浓硫酸等进行显色灵敏度高（较纸层析）可以大量制备18操作技术1.层析纸和层析板特制的色层滤纸。按需要剪裁成长条形（或筒型）。层析板是用专门的涂布器把浆状的吸附剂（硅胶或氧化铝，200～250