溶液配制-(24387)

《溶液配制-(24387)》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、实验室常用缓冲液配置方案1×TEBuffer组成浓度：10mMTris-HCl1mMEDTAPH=8.0配制量：500ml配制方法：量取下列溶液于500ml烧杯中1MTris-HClBufferPH=8.05ml0.5MEDTAPH=8.01ml向烧杯中加入约400mlddH2O均匀混合；将溶液定容到500ml后，高温高压灭菌；室温保存.1)1MTris-HCl(pH8.0)组份浓度：1MTris-HCl配制量：1L配制方法：1.称量121.1gTris置于1L烧杯中。2.加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。3.加入42ml浓盐酸调节所需要的pH值。4.将溶液定容至1L。5

2、.高温高压灭菌后，室温保存。15）0.5MEDTA(pH8.0)组份浓度：0.5MEDTA配制量：1L配制方法：称取186.1gNa2EDTA·2H2O，置于1L烧杯中。2.加入约800ml的去离子水，充分搅拌。3.用NaOH调节pH值至8.0（约20gNaOH)。注意：pH值至8.0时，EDTA才能完全溶解。4.加去离子水将溶液定容至1L。5.适量分成小份后，高温高压灭菌。6.室温保存。实验室常用缓冲液配置方案1)1MTris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)组份浓度：1MTris-HCl配制量：1L配制方法：1.称量121.1gTris置于1L烧杯中。2.加入约800ml的去

3、离子水，充分搅拌溶解。3.按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。PH值浓HCl7.4约70ml7.6约60ml8.0约42ml4.将溶液定容至1L。5.高温高压灭菌后，室温保存。注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。2)10×TEBuffer(pH7.4,7.6,8.0)组份浓度：100mMTris-HCl,10mMEDTA配制量：1L配制方法：1.量取下列溶液，置于1L烧杯中。1MTris－HClBuffer（PH7.4，7.6，8.0）100ml500mMEDTA(PH8.0)20

4、ml2.向烧杯中加入约800ml的去离子水，均匀混合。3.将溶液定容至1L后，高温高压灭菌。4.室温保存。3)1.5MTris-HCl(pH8.8)组份浓度：1.5MTris-HCl配制量：1L配制方法：1.称量181.7gTris置于1L烧杯中。2.加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。3.用浓盐酸调节pH值至8.8。4.将溶液定容至1L。5.高温高压灭菌后，室温保存。注意：应使溶液冷却至室温后再调定溶液的pH值大约降低0.03个单位。pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，4)3M醋酸钠(pH5.2)组份浓度：3M醋酸钠配制量：10

5、0ml配制方法：1.称量40.8gNaAc·3H2O置于100-200ml烧杯中，加入月40ml的去离子水搅拌溶解2.加入冰醋酸调节pH值至5.23.加去离子水将溶液定容至100ml4高温高压灭菌后，室温保存。5)PBSBuffer组份浓度：137mMNaCl,2.7mMKCl,10mMNa2HPO4,2mMKH2PO4配制量：1L配制方法：1.称量下列试剂，置于1L烧杯中。NaCl8gKCl0.2gNa2HPO41.42gKH2PO40.27g2.向烧杯中加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。3.滴加浓盐酸将pH值调节至7.4，然后加入去离子水将溶液定容至1L。4.高温高压灭菌

6、后，室温保存。注意：上述PBSBuffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充6)10M醋酸铵组份浓度：10M醋酸铵配制量：100ml配制方法：1.称量77.1g醋酸铵置于100～200ml烧杯中，加入约30ml2.加去离子水将溶液定容至100ml。1mMCaCl2和的去离子水搅拌溶解。0.5mMMgCl2。3.使用0.22mm滤膜过滤除菌。4.密封瓶口于室温保存。注意：醋酸铵受热易分解，所以不能高温高压灭菌。7)苯酚/氯仿/异戊醇(25:24:1)配制方法：1.说明：从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯酚/氯仿/异戊醇（25:24:1)。氯仿可使蛋白质变性并有助于液相与有机相

7、的分离，而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡。2.配制方法：将Tris-HCl平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇（24:1）混合均匀后，移入棕色玻璃瓶中8）10％(W/V)SDS4℃保存。组份浓度：10％配制量：100ml配制方法：(W/V)SDS1.称量10g高纯度的SDS置于100-200ml烧杯中，加入约80ml的去离子水，68℃加入溶解2.滴加浓盐酸调节pH值至7.23.将溶液定容至100ml后，室温保存。9）2NNaOH组份浓度：2NNaOH