血培养检测规范化操作详解

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1、摘自：《血培养检测规范化操作》主编：徐英春、倪语星、王金良，上海科学技术出版社　　来源：微生物之家　　一、血培养检测采血指征：对入院的危重患者未进行系统性抗生素治疗前，应及时进行血液培养，患者出现以下体征时可作为采集血培养的重要指征：　　1．发热（≥38℃）或低温（≤36℃）。　　2．寒战。　　3．白细胞增多（>10×109/L，特别有“核左移”未成熟的或带状的白细胞增多。　　4．粒细胞减少（成熟的多核白细胞<1×109/L）。　　5．血小板减少。　　6．皮肤粘膜出血。　　7．昏迷。　　8．多器官衰竭。　　或同时具备上述几种体征时应采血培养。在评估可疑新生儿败血症时

2、，除发热或低烧外，很少培养出细菌，应该补充尿液和脑脊液培养。肺炎链球菌与流感嗜血杆菌菌血症的患儿（特别是2岁以下的幼儿）一般多见于门诊，常伴有明显发热（≥38.5℃）和白细胞增多（≥20×109/L）。老年菌血症患者，可能不发热或不低热，如伴有身体不适，肌痛或中风可能是感染性心内膜炎的重要指征。　　血培养检测皮肤消毒程序：　　血培养为防止皮肤寄生菌污染，可使用消毒剂（碘酊或碘伏）对皮肤进行严格仔细的消毒处理，最大限度地减低皮肤污染。感染性心内膜炎，特别是心脏瓣膜修复术的感染，可能由皮肤寄生的微生物引起（例如：表皮葡萄球菌或棒杆菌属）。因此，在采集过程中血培养的污染一

3、定要减小至最低程度。用做培养的血液均不应该在静脉或动脉的导管中抽取，除非静脉穿刺无法得到血液或用来评价与导管感染相关性指标。如果抽取了导管血，也应同时在其他部位穿刺获取非导管内静脉血液进行血培养。　　皮肤消毒严格按以下步骤进行：　　1．首先用70%酒精擦拭静脉穿刺部位待30秒钟以上。　　2．然后用一根碘酊或碘伏棉签消毒皮肤（1%-2%碘酊30秒或10%碘伏消毒60秒），从穿刺点向外以1.5cm~2cm直径画圈进行消毒。　　3．最后用70%酒精脱碘。　　严格执行三步消毒后，可行静脉穿刺采血。注意对碘过敏的患者，只能用70%酒精消毒，消毒60秒钟，待穿刺部位酒精挥发干燥

4、后穿刺采血。　　血培养检测培养瓶消毒程序：　　1．用70%酒精或碘溶液（不要使用碘）消毒血培养瓶橡皮塞子。　　2．酒精作用待60秒。　　3．在血液注入血培养瓶之前，用无菌纱布清除橡皮塞子表面剩余的酒精，然后注入血液。　　要点：血培养的关键是防止皮肤寄生菌或环境引起的污染，由污染菌引起的假阳性增加了患者抗生素的使用量，延长了住院日，延误病情诊断并增加了经济负担等。然而，在理想的消毒条件下，仍有3%~5%血培养中混有污染菌，它们来源于皮肤（表皮葡萄球菌，痤疮丙酸杆菌，梭杆菌属，类白喉群）或来源于环境（革兰阳性芽孢杆菌属，不动杆菌属），这些微生物有时有致病作用。对两次不同

5、部位血培养生长同一种微生物，不同类无菌部位标本培养中生长同一种微生物，微生物快速生长（48h内）。上述情况下，应考虑是真正的感染。临床实验室工作人员和医生之间应经常讨论血培养结果，建立良好的交流关系对各方面都有益处。例如查病例回顾性调查分析：1995~1999年血中分离的70例凝固酶阴性葡萄球菌，入院48h内检出者，39.3%（24例）为污染菌，48h后检出者（9例）100%为污染菌，污染菌检出时间显著长于病原菌。提示血培养中凝固酶阴性葡萄球菌污染率较高。因此，采血前严格执行皮肤消毒程序非常重要。　　血培养检测采血量：　　对从菌血症或真菌菌血症患者血培养中获得微生物

6、，每个培养瓶抽取的血量是唯一重要的变量。当培养的血量从2ml增加到20ml时，血培养的阳性率增加30%~50%，因为培养的血液量增加1ml，阳性率增加3%~5%。　　用静脉穿刺获得的血量，成人和儿童不同。儿童，特别是新生儿很难获得大量的血液，对婴幼儿和儿童，一般静脉采血1ml~5ml用于血培养，当细菌浓度足够高时，血液少于1ml也足以检测菌血症。标本量大于1ml，细菌量也增加，对于感染的儿童没毫升血液比成人有更多的微生物。对于成人血培养的标本量少于10ml不易培养出细菌，每瓶最低限量应是10ml血液，20ml~30ml最合适，血液和肉汤的比一般推荐为1:5至1:10

7、。几乎所有现代的血培养系统假如血液量均在10ml以上。虽然静脉采血30ml可增加细菌量，但这不太切合实际，这很容易造成医院获得性贫血。　　血培养的数量和采血时间：　　血培养的数量和采血时间关系到菌血症的病理生理学，一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单次血培养。研究已经证实，采集适量的血液注入2~3瓶血培养瓶中足以检测所有的菌血症和真菌菌血症。对间歇性菌血症，用于培养的血液应在估计寒战或体温高峰到来之前采集，因为细菌流入血液与寒战发作通常间隔1h，在发烧时血液可能没有细菌，实际上，血培养通常是在寒战或发烧后进行。由于细菌很快会从血液中清除，因此，在寒战或发烧后应