DB21∕T 2451-2015 玉米品种真实性鉴定 SSR分子检测方法

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1、ICS65.020.20B21DB21辽宁省地方标准DB21/T2451—2015玉米品种真实性鉴定SSR分子检测方法MaizevarietygenuinenessverificationwithSSRmarkers2015-04-01发布2015-06-01实施辽宁省质量技术监督局发布DB21/T2451—2015目次前言.................................................................................II1范围...........

2、....................................................................12规范性引用文件.....................................................................13术语、定义和缩略语.................................................................14方法原理................................

3、...........................................25仪器设备、试剂和溶液配制...........................................................26检测步骤...........................................................................37结果分析和表示......................................................

4、...............68结果判定...........................................................................6附录A（规范性附录）核心引物名称和序列..............................................7附录B（规范性附录）溶液配制........................................................9IDB21/T2451—2015前言本标准按照GB/

5、T1.1-2009给出的规则起草。本标准由辽宁省农村经济委员会提出并归口。本标准起草单位：辽宁省种子管理局。本标准起草人：朱志成、李波、高振环、邹畅、肖国峰、王汝宝、李洪建、赵前程、王见中、温浩、李鹏、史鸿儒、安辉、徐策、孙丽红、王东坡。IIDB21/T2451—2015玉米品种真实性鉴定SSR分子检测方法1范围本标准规定了玉米品种真实性鉴定的原理、仪器设备、检测步骤及结果判定。本标准适用于玉米品种真实性SSR分子鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用

6、于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T3543.2农作物种子检验规程扦样GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3术语、定义和缩略语3.1术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1.1品种真实性供检样品与该品种的对照样品是否相符。3.1.2对照样品省级以上种子管理部门收集并保存的与品种名称相符的种子样品。3.1.3参照品种已知等位变异SSR位点的品种。3.1.4SSR分子检测通过SSR分子标记检测玉米品种基因组DNA的差异，鉴定玉米品种真实性的检测方法。3.2缩

7、略语1DB21/T2451—2015CTAB：cetyltrimethylammoniumbromide，十六烷基三甲基溴化铵。DNA：deoxyribonucleicacid，脱氧核糖核酸。dNTPs：deoxyribonucleosidetriphosphates，脱氧核苷三磷酸。PAGE：polyacrylamidegelelectrophoresis，聚丙烯酰胺凝胶电泳。PCR：polymerasechainreaction，聚合酶链式反应。SDS：sodiumdodecylsulfate，十二烷基苯磺酸钠

8、。SSR：simplesequencerepeat，简单重复序列。Taq酶：Taq-DNApolymerase，耐热DNA聚合酶。4方法原理由于不同玉米品种遗传组成不同，基因组DNA中简单重复序列的重复次数存在差异，这种差异可通过PCR扩增及电泳方法进行检测，从而能够鉴定玉米品种真实性。5仪器设备、试剂和溶液配制5.1仪器设备5.1.1PAGE检测平台高速冷