鸡白痢免疫血清制备ppt课件

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1、鸡白痢免疫血清制备组员：凌豪李昀哲张万石佑铭尤智强ppt制作：凌豪实验目的和要求了解影响机体免疫应答强度的因素;明确初次应答和再次应答抗体产生的规律；制备鸡白痢的抗血清；熟悉佐剂的制备和动物免疫的常用方法；了解抗体检测的常用方法。在免疫学实验中,为制备抗体通常以抗原性物质给动物注射,经一定时间后,动物血清中可产生大量特异性抗体，这种含有特异性抗体的血清称免疫血清。实验原理免疫应答的影响因素抗体的产生通常与抗原的质和量、动物种类以及接种的途径有密切关系。一、抗原分子的结构和性质1.分子量：分子量越大，免疫原性越强。2.化学组成及结构（1）蛋白

2、质（2）多糖：具有免疫原性,较蛋白质弱。（3）核酸：多无免疫原性。3.结构的复杂性4.分子构象5.易接近性6.物理状态二、宿主方面的因素1.遗传因素同种动物不同品系及不同个体对同种抗原产生不同强度的免疫应答。2.其他因素年龄、性别与健康状态。三、免疫原的剂量及进入途径（1）剂量1）剂量不足或过多均不引起免疫应答。2）重复进入引起强免疫应答。（2）途径：皮内、皮下、肌肉、静脉、腹腔、呼吸道和口服免疫应答水平依次降低。抗体产生的一般规律初次应答和再次应答规律。抗体产生的顺序规律：IgM-IgG-IgA-IgD-IgE初次应答和再次应答抗体产生比

3、较抗原抗体反应抗原与抗体特异性结合，形成抗原抗体复合物。物质基础:1）抗原表位与抗体高变区间的互补结合2）抗原表位与抗体高变区的沟槽分子表面的结合3）抗原抗体之间的结合力4）亲水胶体转化为疏水胶体抗原抗体反应的一般规律特异性与交叉反应性；可逆性：表面的结合，有可逆性；抗原抗体交叉反应示意图实验方案免疫佐剂制备及动物初次免疫（第一周）再次免疫及血清采集（第二周）血清采集及抗体检测（第三周）W1W2W3未免疫血清采集再次免疫血清采集初次免疫血清采集初次免疫再次免疫实验材料动物：家兔（每组一只）抗原：鸡白痢沙门氏菌标准型C79—1菌株佐剂：完全福

4、氏佐剂。其它：普通琼脂培养皿、菌液标准比浊管、注射针筒、离心机、离心管、无菌三角烧瓶、恒温箱、冰箱、毛细管琼脂培养液、酒精、0.01%硫柳汞第一次实验步骤1.免疫原制备用鸡白痢沙门氏菌标准型C79-1菌株接种在普通琼脂培养基培养制备菌液，菌液经灭活，酒精沉淀处理，制成免疫原，按细菌标准比浊管确定免疫原的浓度。2.动物免疫血清制备将免疫原液与完全弗氏佐剂等量混和制成免疫抗原每毫升含菌量为10亿,于兔背最长肌分两点注射。每点注射0.5毫升作为基础免疫,以后每间隔6天耳静脉注射免疫原液一次,剂量依次为15亿30亿60亿120亿150亿第一次实验步

5、骤第二次实验步骤3.血清提取最后一次免疫7天后试血，效价达到预期要求，无菌采血，分离血清，分装与中性瓶，按血清量1/500cc加入硫柳汞防腐，4摄氏度保存。Thanks!