山东省黄瓜细菌性茎软腐病病原菌鉴定与抗病品种筛选

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1、山东省黄瓜细菌性茎软腐病病原菌鉴定与抗病品种筛选摘要：本试验以黄瓜细菌性茎软腐病病原菌为研究对象，对黄瓜田间发病情况进行观测，分离病原菌并对其形态、致病性及生理生化特性进行分析测定和分子生物学鉴定，同时利用该菌对36份黄瓜资源进行抗病筛选。结果表明：研究地块黄瓜细菌性茎软腐病发病率为5.62%〜43.76%,平均为24.69%。病田中分离得到的黄瓜细菌性茎软腐病病原菌经鉴定为荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)。36份黄瓜资源中筛选得到2份高感资源，24份感病资源，10份中抗病资源。

2、关键词：黄瓜细菌性茎软腐病；荧光假单胞菌；抗病资源中图分类号：S436.421.1文献标识号：A文章编号：1001-4942(2018)07-0133-05AbstractInthisexperiment,withthepathogenofcucumberbacterialstemsoftrotasstudyobject,themorbiditysituationofcucumberinthefieldwasobserved.Themorphological,pathogenicity,physiologi

3、calandbiochemicalcharacteristicsofthepathogenicbacteriawereanalyzedandmolecularbiologyidentificationwasconducted.Thenthebacteriawasusedtoscreentheresistantvarietiesfrom36cucumberresources・Theresultsshowedthattheincidenceofcucumberbacterialstemsoftrotwas5.6

4、2%〜43.76%,withanaverageof24.69%.ThepathogenofcucumberbacterialstemsoftrotisolatedfromthediseasefieldwasidentifiedasPseudomonasfluorescens・Therewere2high-susceptivecultivars,24middle-susceptivecultivarsand10resistantcultivarsin36cucumberresources.KeywordsCu

5、cumberbacterialstemsoftrot；Pseudomonasfluorescens；Resistantresources黄瓜为葫芦科黄瓜属一年生草本植物，富含维生素、蛋白质、尼克酸、钙、磷、铁等营养成分，具有清热止渴、利水消肿的作用[1],是我国一种日常食用的蔬菜。黄瓜细菌性茎软腐病是黄瓜上常见且严重发生的病害之一,主要为害叶片、叶柄，还可侵染茎蔓和果实，因受害部位会流出胶状物，又叫“黄瓜流胶病”。该病近几年在山东省、山西省、河北省、河南省、辽宁省等黄瓜主产区大面积发生[2],造成严重经济损

6、失。叶片感病多从叶缘开始发病，形成褪绿病斑并伴有黄色晕圈，后随病情发展病斑变为黄褐色。茎干发病初期，发病部位呈水浸状，有流胶现象，湿度大时可见大量白色菌脓溢出。成株期果实发病时，果实表面正常，纵向剖开果实，其内部组织已变褐腐烂或呈开裂状，严重时表面出现白色脓状物［3-5］o李焕玲［6］经过形态学和分子生物学鉴定，表明引起黄瓜茎软腐病病原菌为胡萝卜软腐果胶杆菌巴西变种(Pectobacteriumcarotovorumsubsp.Brasiliense),但未进行抗病资源筛选。本研究对黄瓜细菌性茎软腐病田间发

7、病情况进行观测，对引起山东省黄瓜细菌性茎软腐病的病原进行鉴定，并对36份黄瓜资源进行抗病性筛选，以期为培育优良的抗黄瓜细菌性茎软腐病品种提供支持。1材料与方法1.1试验材料供试黄瓜细菌性茎腐病病原菌于2016年11月取自济南市育苗场典型的黄瓜发病植株，常规方法保存。待测黄瓜资源36份，由山东省农业科学院蔬菜花卉研究所植保室提供。均于2017年10月23日播种，每份材料种植25株，常规田间管理。1.2田间调查发病情况2016年7月至2017年10月在济南市育苗场调查黄瓜茎软腐病地上部和根部的危害症状。采取5点

8、取样法调查田间发病率，计算病情指❷1.3室内病原菌分离及相关鉴定1.3.1分离与纯化利用LB培养基对采集的病叶进行病原菌分离。具体方法为：用灭菌解剖刀切取叶片病健交界处，用70%乙醇浸泡10〜30s,无菌水冲洗2〜3次［7］,将消毒后的叶片放入无菌水中用银子碾碎，离心30s,用移液枪吸取上清液涂抹在LB培养基平板上，28「C培养12h备用。1.3.2生理生化测定待检测菌株均在LB培养基上培养24h,参考方中达［7