一株抗鳗弧菌细菌素生产菌的筛选与鉴定【开题报告】

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1、毕业设计开题报告生物科学一株抗鳗弧菌细菌素生产菌的筛选与鉴定一、综述国内外的研究现状，说明选题的依据及意义细菌素是细菌在伴随着核糖体合成过程中产生的一类分泌到细胞外的小分子蛋白质或多肽类代谢物。细菌素与抗生素都由微生物产生，用量都很小，都具有一定的抗菌谱，能较强地抑制甚至杀死其他微生物。如在食品中加入十万分之几到万分之几的Nisin，就足以抑制许多革兰氏阳性菌的生长和繁殖。因为细菌素具有与抗生素相似的一些性质和作用，因此细菌素最初甚至被认为就是抗生素。但是细菌素和抗生素是有区别的。抗生素是某些微生物通过酶促反应将初级代

2、谢物转变为结构性的次级代谢物，诸如短杆菌肽S等，通过酶促反应把氨基酸转变为结构复杂的化合物。而Nisin等细菌素则需要通过核糖体来合成，是真正的蛋白质类物质。细菌素与抗生素的根本差别是:大部分细菌素只对近缘关系的细菌有损害作用，而且无毒、无副作用、无残留、无抗药性，同时也不污染环境。因此，细菌素的使用，可以部分减少甚至取代抗生素的使用。细菌素对同缘以及近缘的微生物，甚至对生活在同一个生态环境下其他种类的微生物也具有致命杀伤作用，由于细菌素具有蛋白质性质以及独特的作用方式使其明显的区别于经典抗生素，同时又具有高效、无毒、

3、耐酸、耐高温、无残留、无抗药性等优点，不仅在食品加工保存中等到广泛应用，在治疗细菌疾病等方面也受到很大关注，在水产养殖病害防治中也将具有广阔的应用前景。另外，细菌素作为一种小分子多肽比抗生素更环保也更安全，几乎无副作用。鳗弧菌为有鞭毛的革兰氏阴性细菌，无荚膜，不形成芽孢，能运动，氧化酶阳性。葡萄糖氧化反应呈阳性，具有典型的弧菌属细菌特征。鳗弧菌引起的水产养殖动物疾病在世界范围内流行，可感染鲑鱼、虹鳟、鳗鲡、香鱼、鲈鱼、鳕鱼、大菱鲆、牙鲆、黄鱼等。鳗弧菌是条件致病菌，当水产养殖动物在不良的环境条件下，遭遇不利刺激或是受伤

4、时，会诱发疾病的产生。感染鳗弧菌后的鱼虾会表现出病情逐步加深的症状，有研究学者报道，部分感染鳗弧菌的鱼体表最初出现局部褪色，鳍条、鳍基部及鳃骨下部充血发红，肛门红肿，继而肌肉组织有弥撒性或点状出血，体表发黑，鳍部出现溃烂；解剖检验时有明显的黄色粘稠腹水，肠粘膜组织腐烂脱落，部分鱼肝脏坏死。鳗弧菌（vibrioanguillarum）广泛存在于沿岸海水、沉积物和海洋动物体中,是海水鱼、虾、贝类的一种常见的细菌性病原。随着海水养殖业的日益发展,致病性鳗弧菌对养殖动物的危害也越来越严重。海洋细菌产生抗菌素对鱼的病原菌有抑制作

5、用，许多从水产养殖环境分离的细菌都可抑制已知的水产动物中出现的病原菌。抗生素的滥用，使鱼体中的细菌产生耐药性，且对环境、水体的污染性也大增，在全世界提倡环保的背景下，抗生素显然已经不能满足人们的需要，而细菌素的发现及研究成为21世纪新药物的主流。海洋细菌产生抗菌素对鱼的病原菌有抑制作用，许多从水产养殖环境分离的细菌可抑制已知的水产动物中出现的病原菌。通过研究肠道微生物类群与细菌素的关系,可以更好地选择益生菌菌种，使它们定植于养殖动物的肠道系统中，发挥出更好的功效。通过对抗鳗弧菌细菌素的实验，研究其安全性与有效性，可以针

6、对性地使用，从而防止造成水产养殖环境中微生态的失衡，且降低对应养殖对象的致病率，具有较大地经济效益与社会效益。抗鳗弧菌细菌素可替代抗生素，将其投放于鱼的饲料中，因细菌素本身是小分子蛋白质或多肽代谢物，因此对鱼体无损害，且也不会污染水体。二、研究的基本内容，拟解决的主要问题：（1）抗鳗弧菌细菌素产生菌菌株的筛选（初筛和复筛）；（2）抗鳗弧菌细菌素产生菌菌株的生长曲线；（3）抗鳗弧菌细菌素产生菌菌株的鉴定：包括菌株的菌落及菌株形态特征，菌株生理生化特征；菌株的16SrRNA序列测定及分析，构建分子系统树。三、研究步骤、方法

7、及措施：（1）文献查阅：通过各种期刊网查阅有关细菌素的论文；（2）实验方案设计：根据文献与实验目的设计，进行泥样采集；（3）筛选出目的菌株（4）数据统计分析：运用统计软件进行数据分析；（5）撰写论文：根据实验数据与参考文献撰写毕业论文。四、参考文献[1]吴后波，弧菌属细菌及其所致海水养殖动物疾病[J].中国水产科学，2001，8(1)：89-93.[2]杨少丽，王印庚.海水养殖鱼类弧菌病的研究进展[J].海洋水产研究，2005，26(4):75-83.[3]孙修勤，张进兴，曲凌云.中国台湾地区及世界部分主要海水养殖国家

8、养殖疾病综述[J]，渤海海洋.1999.17(4):88~102[4]胡元森，李翠香，不同培养基组合提高土壤细菌可培养性的研究[J].河南工业大学，2007，47(5):882～887[5]李会荣，俞勇，海洋有益菌的筛选与鉴定[J].中国海洋大学，2001，9：18-22[6]张士璀，范晓，马军英.海洋生物技术原理和应用［M］.北