生物选修3背诵材料(全)

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1、生物选修3背诵材料（全）DNA重组技术的基本工具lo基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的牛物类型和牛物产甜。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此乂叫做DNA重组技术或基因拼接技术。2.DNA重组技术的基本工具①、“分子手术刀”一一限制性核酸内切酶A、作用一一限制性核酸内切酶能识别双链DNA分子的某种特定的核昔酸序列，并在使每一条链中特定部位的两个核背酸之间的磷酸二酯键断开B、限制性内切酶的切割方式：①在中心轴

2、线两侧将DNA切开，切口是黏性末端。②沿着中心轴线切开DNA,切口是平末端。大肠杆菌的一种限制酶（EcoRl）能识别GAATTC序列，Smal识别CCCGGG序列：他们识别的核昔酸序列不同，但是切点都是在GIC之间。C比较有关的DNA酶（1）DNA水解酶：能够将DNA水解成四种脱氧核昔酸，彻底水解成麟酸、脱氧核糖和含氮碱基（2）DNA解旋酶：能够将DNA或DNA的某一段解成两条长链，作用的部位是碱基和碱基之间的氢键。注意：使DNA解成两条长链的方法除用解旋酶以外，在适当的高温（如94°C）、重金属盐的作用下，也可使DNA解

3、旋。（3）DNA聚合酶：能将单个的核甘酸通过磷酸二酯键连接成DNA长链。（4）DNA连接酶：是通过磷酸二酯键连接双链DNA的缺口。注意比较DNA聚合酶和DNA连接酶的异同点。①.DNA连接酶一一“分子缝合针”（1）DNA连接酶的分类：E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶。（2）作用及作用部位：E.coliDNA连接酶作用于黏性末端被切开的磷酸二酯键，T4DNA连接酶作用于黏性末端和平末端被切开的磷酸二酯键。②•基因进入受体细胞的载体一一“分子运输车”（1）分子运载车的分类：①质粒：常存在于原核细胞和酵母菌中，是一种分

4、子质量较小的环状的裸露的DNA分子，独立于拟核之外。②病毒:常用的病毒有噬菌体、动植物病毒等。（2）运载体使用的日的：①是用它做运载工具，将目的基因转运到宿主细胞中去。②是利用它在受体细胞内对目的基因进行大量复制。（3）作为运载体必须具备的条件：①在宿主细胞中保存下来并大量复制②有多个限制性内切酶切点③有一定的标志基因，便于筛选基因工程的基本操作程序冃的基因的获取一基因表达载体的构建一将冃的基因导入受体细胞一目的基因的检测与鉴定一基因的结构:基因是有遗传效应的DNA片段（注：RNA病毒为RNA）,分为编码区和非编码区。编码

5、区：能转录出mRNA,原核生物中也就是能编码蛋白质的区段非编码区：不能转录岀mRNA,也不能编码蛋白质的区段（1）原核细胞基因的结构非编码区中存在调控遗传信息表达的核昔酸序列：①编码区上游的RNA聚合酶结合位点，即启动子，可控制RNA聚合酶的结合。RNA聚合酶是一种蛋白质，能识别并结合调控序列中的结合位点，能催化DNA转录为RNA②编码区下游有终止子，可控制RNA聚合酶的停止、脱落。（2）真核细胞基因的结构（调控序列）二基因工程的基本操作程序lo目的基因的获取：A目的基因主要是指编码蛋白质的结构基因，目前被广泛提取使用的目

6、的基因有：苏云金杆菌抗虫基因、植物抗病基因（抗病毒、抗细菌）、人胰岛素基因等。B获得目的基因的方法（1）从基因文库中获取目的基因：基本概念的理解：①将含有某种牛物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因，称为基因文库。①将某种生物体内的DNA全部提取出來，选用适当的限制酶，将DNA切成一定范围大小的DNA片段，然后将这些片段分别与载体连接起来，导入受体菌的群体中储存，每个受体菌都含有了一段不同的DNA片段。这个群体包含了这种生物的所有基因。这种基因文库叫基因组文库。②有些基因

7、文库比较小，只包含了一种生物的一部分基因，这种基因文库叫做部分基因文库，如cDNA文库（用某种牛物发育的某个时期的mRNA反转录产生的多种互补DNA（也叫cDNA）片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群体叫做这种生物cDNA文库。）怎样提取：根据冃的基因有关信息，例如，根据基因的核昔酸序列，基因的功能，基因在染色体的位置，基因的转录产物mRNA以及基因的表达产物蛋白质等特性来获取目的基因。⑵利用PCR技术扩增目的基因：原理：DNA双链复制的基本原理前提：一段已知目的基因的核昔酸序列，根据这一序列合成引物。条件

8、：a・•四种脱氧核昔酸b.DNA的两条链为模板c.热稳定DNA聚合酶（Taq酶）d.—对引物（一小段单链DNA或RNA,一般20~30个碱基，能与DNA母链的一段碱基序列互补配对）e.温度控制和缓冲液PCR技术扩增过程：a、DNA变性（90°C・95°C）：双链DNA模板在热作用下，氢键断裂,形成单链D