岛津LC-10AT型高效液相色谱仪常见故障及解决方法

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1、岛津LC-10AT型高效液相色谱仪常见故障及解决方法王利张亚东薛永(江苏省淮安市第三人民医院江苏淮安223001)【中图分类号】R197.38【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2010)34-0437-01我院于2003年购进日木岛津LC-10AT型高效液相色谱仪，主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统组成。它有高压、高速、高灵敏度、高分辨率、高稳定性等特点，可以对血清中的药物浓度、激素、蛋白质等物质进行分析，我院多年来使用该仪器进行药物浓度分析，在使用过程中遇到一些故障，对故障处理

2、积累了一些经验，现总结如下。1柱压问题压力过高、过低都属于柱压问题。压力过高是高效液相在使用中最常见的问题，指的是压力突然升高，一般都是由于流路中有堵塞的原因。此时，我们应该分段进行检查。首先断开真空泵的入口处，此时PEEK管里充满液体，使PEEK管低于溶剂瓶，看液体是否自由滴下，如果液体不滴或缓慢滴下，则是溶剂过滤头堵塞。处理方法：用30%的硝酸浸泡半个小时，再用超纯水冲洗干净。如果液体自由滴下，溶剂过滤头正常，再检查；打开Purge阀，使流动相不经过柱子，如果压力没有明显下降，则是过滤白头堵塞。处理方法：将过滤白头

3、取出，用10%的异丙醇超声半个小时。如果压力降至100PSI(6.7Bar)以下，过滤白头正常，再检查；把色谱柱出口端取下，如果压力不下降，则是柱子堵塞。处理方法：如果是缓冲盐堵塞，则用95%的水冲至压力正常。如果是一些强保留的物质导致堵塞，则要用比现在流动相更强的流动相冲至压力正常。假如按上面的方法长时间冲洗压力都不下降，则可考虑将柱子的进出口反过来接在仪器上，用流动相冲洗柱子。这时，如果柱压仍不下降，只有换柱子入口筛板，但一旦操作不甚，很容易造成柱效下降，所以尽量少用。压力过低的现象一般是由于系统泄漏，处理方法：寻

4、找各个接口处，特别是色谱柱两端的接口，把泄漏的地方旋紧即可。当然还有一个原因就是泵里进了空气，但此吋表现的往往是压力不稳，忽高忽低,更严重一点会导致泵无法吸上液体。处理方法：打开Purge阀，用3-5ml/min的流速冲洗，如果不行，则要用专用针筒在排空阀处借住外力将气泡吸岀。2保留时间漂移保留吋间重现是液相性能好坏的一个重要标志，同一种东西，两次的保留时间相差不要超过15s,超过了半分钟可看做保留吋间漂移，就无法进行定性，要考虑以下原因：(1)温控不当。解决方法：调好柱温，检查是否有打开的窗户或空调对着柱温箱。(2)

5、流动相比例变化。解决方法：检查四元泵的比例阀是否有故障(3)色谱柱没有平衡。解决方法：在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱(4)流速变化。解决方法：重新设定流速(5)泵中有气泡。解决方法：从泵中除去气泡。3峰型异常问题峰型问题是液相的主要问题，在做液相过程中，我们就是要变换不同的条件来改善不好的峰型，对于各种各样的异常峰，要区别对待，从主要问题出发，一个一个加以解决。(1)拖尾峰。解决方法：柱超载，降低样品量；增加柱直径采用较高容量的固定相；峰干扰，对样品进行清洁过滤；调整流动相；硅梵基作用，加入三乙胺，用碱致钝化

6、柱增加缓冲液或盐的浓度降低流动相pH值；柱内烧结不锈钢失效，更换烧结不锈钢；加在线过滤器，对样品进行过滤；死体积或柱外体积过大，将连接点降至最低；尽可能使用内径较细的连接管；柱效下降,更换柱子；采用保护柱，对柱子进行再生。(2)所岀峰比预想的小。解决方法:样品黏度过大；进样品故障或进样体积误差；检测器设置不正确.定量环体积不正确；检测池污染；检测器灯出现问题。(3)一个峰或几个峰是负峰。解决方法：流动相吸收本底高；进样过程中进入空气；样品组分的吸收低于流动相。(4)所有峰均为负峰。解决方法：信号电缆接反或检测器输出极性

7、设置颠倒；光学装置尚未达到平衡。(5)出现双峰或肩峰。解决方法：进样量过大；样品浓度过高;保护柱或色谱柱柱头堵塞；保护柱或色谱柱污染或失效；柱塌陷或形成短通道。4出现鬼峰解决方法：进样阀残余峰，在每次进完样后用充足的时间来平衡和清洗系统；样品中存在未知物，改进样品的预处理；流动相污染，更换新流动相，尽可能现配现用，隔夜的流动相再次使用时要过滤；尽可能使用HPLC级试剂；流路中有小的气泡，打开Purge阀，加大流速排除。5色谱图中未出峰解决方法：系统未进样或样品分解；泵未输液或流动相使用不正确；检测器设置不正确；针对以上

8、情况成因作相应调整即可。总之，在高效液相色谱仪的使用过程中，需不断积累经验，根据仪器的特点进行调整维护，使实验结果能更好的服务临床，提高医院的治疗水平。