资源描述：
《犊牛腹泻的诊断与治疗》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、犊牛腹泻大肠杆菌的分离鉴定和药敏试验犊牛腹泻是指肠蠕动亢进，肠内吸收不全或吸收困难，致使肠内容物与多量水分被排出体外的一种犊牛疾病。其临床特征是拉稀便、软便或水样便，呕吐，脱水，体重减轻和酸中毒，死亡较快。本病一年四季均可发生，尤其以夏末秋初多发，其中3周龄以内的新生犊牛发病率和死亡率最高，被称为新生犊牛的杀手。所以哺乳期牍牛的饲养管理是奶牛生产屮的一个重要阶段，如呆此时由于营养缺乏或管理不善，则不仅直接给奶牛场造成巨大的经济损失，而且也影响到犊牛的生长发育和成年后的泌乳性能。可以说，犊牛腹泻是影响犊牛健康生长的最主要的疾病之一。因此，如何预防犊牛腹泻就成了重中之重。它分为营养性（如由牛
2、奶饲喂过量，牛奶突然改变成分，低质代乳品，奶温过低等引起）和传染性（如由细菌、病毒、寄生虫等引起）腹泻两种。但是，这一分类是人为的，生产实践中往往是由于营养性腹泻或饲养管理不当而使犊牛更易患传染性腹泻。大肠杆菌是引起新生犊牛腹泻的主要病原菌。2012年4月，山东潍坊某牛场半开放式圈舍中饲养的10F1龄以上23头犊牛中11头犊牛陆续发生腹泻，粪便稀薄，有臭味，有黄白色便、带血丝便、泡沫样便。病牛10H龄Z前一律先在一普通民房中饲养，10日龄以后被转移至带有运动场的半开放式圈舍中，自从被转移过来以后，陆续有牛发生腹泻。兽医曾用头砲类和磺胺类抗菌药物治疗，未见明显显效，已数头犊牛死亡。1.材料
3、与方法1・1材料1.1.1病料采自山东省潍坊某奶牛场腹泻病死犊牛采取粪样、肝、肠、脾等脏器病料。1.1.2试验动物昆明系小鼠，购于潍坊医学院实验动物中心。3日龄乳鼠购于潍坊医学院实验动物中心。1・2方法1.2方法1.2.1细菌的分离培养及形态学鉴定将采集的腹泻粪样按常规方法接种于麦糠凯培养基、伊红美蓝培养基和血琼脂培养基上,37°C培养24h,观察在平板上的生长情况。以无菌接种环分别挑取麦糠凯和伊红美蓝培养基上的单个菌落，接种普通琼脂斜面,37°C纯培养24h,对纯培养物涂片,革兰染1.2.2离菌曲生化试验挑取矗培养物接种于三糖铁琼脂、糖微量发酵管（葡萄糖、乳糖、麦芽糖、蔗糖、甘露醇）、
4、尿素分解管、赖氨酸、苯丙氨酸生化管、磷酸盐葡萄糖豚水、硫化氢、靛基质反应管、硝酸盐还原管、构椽酸盐管，甲基红（MR）试验、VP试验等,37°C培养24h~72h,观察并记录结果[9]°1.2.3分离菌的血清型鉴定将纯培养的待检菌液接种于普通琼脂平板,37°C培养24h,用5g/L的石炭酸生理盐水将菌苔洗下，制成浓稠的悬液,经121e、2h高压灭菌破坏K抗原，冷却后取等量的菌悬液与大肠埃希菌0抗原定型血清在玻璃板上混匀，半分钟内出现凝集者为阳性，同时设生理盐1.2.4分离菌的致病性检测随机挑取麦康凯上纯培养的菌落，接种于营养肉汤中，取24h内培养物,备用。取健康小鼠20只，随机分为试验组和
5、对照组，每组10只。将上述制备的待测菌液腹腔接种于试验组小鼠,0.4mL/只;对照组小鼠注射等量生理盐水，观察72ho剖检死亡小鼠，无菌采集心脏和肝脏,涂片、镜检。同时抽取少量腹水在伊红美兰培养基上均匀涂抹,37肝脏,涂片、镜检。同时抽取少量腹水在伊红美兰培养基上均匀涂抹,37e培养18h~24h后，观察结果[12]o1.2.6分离菌的药物敏感性试验按世界卫生组织（WHO）推荐的Kirby-Barer法进行，在普通营养琼脂平皿上挑取2个形态上相似、直径1mm左右的菌落接种于3mL肉汤中,37e培养16h,用无菌棉拭子蘸取菌液涂布琼脂平板表面（可重复来回划线）,待稍干后，用无菌银子将各种定
6、量浓度抗菌药圆纸片分别贴于培养基表面，各片距离要相等,37e培养24h观察结果。根据药物纸片有无抑菌圈及其大小来判断该菌对各种药物的敏感程度。用质控标准菌株大肠埃希菌ATCC25922控制试验的精确度和准确度。根据NCCLS提供的标准（表1）判定药敏结果。表1药敏纸片的种类及判定标准Z嚅1Categoryandcriteriaofantibioticresistanceslip药物Antibiotics纸片药物含量/（Lg#片-1）Drugcontents抑菌圈直径/mmDiameterofantimicrobialcircle耐药Resistance中敏Midstensitivity敏
7、感Sensitivity氯霉素Chloramphenicol30[1213~171812~141514~171815~181913~1415链霉素Streptomycin10[ll红霉素Erythromycin15[13四环素Tetracycline30[14庆大霉素Gentamicin10[12氟哌酸Norfloxacin10[1516~2021卡那霉素Kanamycin30[1314~1718丁胺卡那霉素Amika
