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时间:2019-10-19
《PCR 各种缓冲液的配方》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、PCR各种缓冲液的配方1.电泳缓冲液50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液 终浓度配制1L溶液成分 各成分的用量2mol/LTris碱 242g1mol/L冰乙酸 57.1mlEDTA (pH=8.0)18.622g(200ml的0.5mol/LEDTA(pH8.0))水 补足1L 2.5×Tris-硼酸(TBE)缓冲液成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量445
2、mmol/LTris碱 54g445mmol/L硼酸盐 27.5g硼酸10mmol/LEDTA 20ml的0.5mol/LEDTA(pH8.0)水 补足1L 染料1%溴酚蓝(bromophenolblue)加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中,搅拌或涡旋混合直到完全溶解。1%二甲苯青FF(xylenecyanoleFF)溶解1g二甲苯青FF于足量水中,定容到100ml。10mg/ml的溴化乙锭(ethidiumbromide)
3、小心称取1g溴化乙锭,转移到广口瓶中,加100ml水,用磁力搅拌器搅拌直到完全溶解。用铝箔包裹装液管,于4℃贮存。3.凝胶上样液(gelloadingsolutions)6×碱性凝胶上样液(室温贮存)成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.3N氢氧化钠 300ul10N氢氧化钠6mmol/LEDTA 120ul0.5mol/LEDTA(pH8.0)18%聚蔗糖(400型) 1.8g0.15%溴甲酚绿 15mg0.25%二甲苯青F
4、F 25mg水 10ml4.6×聚蔗糖凝胶上样液(室温贮存)成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.15%溴酚蓝 1.5ml1%溴酚蓝0.15%二甲苯青FF 1.5ml1%二甲苯青FF5mmol/LEDTA 100ul0.5mol/LEDTA(pH8.0)15%聚蔗糖(400型) 1.5g水 补足到10ml5.6×溴酚蓝/二甲苯青/聚蔗糖
5、凝胶上样液(室温贮存)成分及终浓度 配制10ml溶液各成分用量0.25%溴酚蓝 2.5ml1%溴酚蓝0.25%二甲苯青FF 2.5ml1%二甲苯青FF15%聚蔗糖(400型) 1.5g水 补足到10ml6.6×甘油凝胶上样液(4℃贮存)成分及 终浓度配制10ml溶液各成分用量0.15%溴酚蓝 1.5ml1%溴酚蓝 0.15%二甲苯青FF 1.5ml1%二甲苯青
6、FF5mmol/LEDTA 100ul0.5mol/LEDTA(pH8.0) 50%甘油 3ml 水 3.9ml 7.6×蔗糖凝胶上样液(室温贮存)成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.15%溴酚蓝 1.5ml1%溴酚蓝0.15%二甲苯青FF 1.5ml1%二甲苯青FF5mmol/LEDTA 100ul0.5mol/LEDTA(pH8.0)40%聚蔗糖
7、 4g水 补足到10ml 8.10×十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液(室温贮存)成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.2%溴酚蓝 20mg0.2%二甲苯青FF 20mg200mmol/LEDTA 4ml0.5mol/LEDTA(pH8.0)0.1%SDS 100ul10%SDS50%甘油 5ml水 补足到10ml
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