PCR 各种缓冲液的配方

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时间:2019-10-19

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1、PCR各种缓冲液的配方1.电泳缓冲液50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液   终浓度配制1L溶液成分                                         各成分的用量2mol/LTris碱    242g1mol/L冰乙酸    57.1mlEDTA (pH=8.0)18.622g(200ml的0.5mol/LEDTA(pH8.0))水        补足1L                  2.5×Tris-硼酸(TBE)缓冲液成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量445

2、mmol/LTris碱   54g445mmol/L硼酸盐   27.5g硼酸10mmol/LEDTA    20ml的0.5mol/LEDTA(pH8.0)水           补足1L                     染料1%溴酚蓝(bromophenolblue)加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中,搅拌或涡旋混合直到完全溶解。1%二甲苯青FF(xylenecyanoleFF)溶解1g二甲苯青FF于足量水中,定容到100ml。10mg/ml的溴化乙锭(ethidiumbromide)

3、小心称取1g溴化乙锭,转移到广口瓶中,加100ml水,用磁力搅拌器搅拌直到完全溶解。用铝箔包裹装液管,于4℃贮存。3.凝胶上样液(gelloadingsolutions)6×碱性凝胶上样液(室温贮存)成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.3N氢氧化钠          300ul10N氢氧化钠6mmol/LEDTA           120ul0.5mol/LEDTA(pH8.0)18%聚蔗糖(400型)        1.8g0.15%溴甲酚绿           15mg0.25%二甲苯青F

4、F          25mg水                 10ml4.6×聚蔗糖凝胶上样液(室温贮存)成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.15%溴酚蓝             1.5ml1%溴酚蓝0.15%二甲苯青FF           1.5ml1%二甲苯青FF5mmol/LEDTA            100ul0.5mol/LEDTA(pH8.0)15%聚蔗糖(400型)         1.5g水                 补足到10ml5.6×溴酚蓝/二甲苯青/聚蔗糖

5、凝胶上样液(室温贮存)成分及终浓度            配制10ml溶液各成分用量0.25%溴酚蓝           2.5ml1%溴酚蓝0.25%二甲苯青FF        2.5ml1%二甲苯青FF15%聚蔗糖(400型)       1.5g水                补足到10ml6.6×甘油凝胶上样液(4℃贮存)成分及           终浓度配制10ml溶液各成分用量0.15%溴酚蓝        1.5ml1%溴酚蓝  0.15%二甲苯青FF      1.5ml1%二甲苯青

6、FF5mmol/LEDTA        100ul0.5mol/LEDTA(pH8.0)    50%甘油           3ml            水               3.9ml         7.6×蔗糖凝胶上样液(室温贮存)成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.15%溴酚蓝         1.5ml1%溴酚蓝0.15%二甲苯青FF      1.5ml1%二甲苯青FF5mmol/LEDTA        100ul0.5mol/LEDTA(pH8.0)40%聚蔗糖 

7、        4g水             补足到10ml    8.10×十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液(室温贮存)成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.2%溴酚蓝           20mg0.2%二甲苯青FF        20mg200mmol/LEDTA      4ml0.5mol/LEDTA(pH8.0)0.1%SDS          100ul10%SDS50%甘油         5ml水             补足到10ml

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