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《紫花苜蓿-根瘤菌高效共生体筛选及其田间作用效果研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、紫花苜蓿-根瘤菌高效共生体筛选及其田间作用效果研究曾昭海I隋新华2胡跃高'陈文新彳陈丹明彳郃瑞路彳(屮国农业人学农学与生物技术学院草业工程研究屮心,北京,10094)(屮国农业人学生物学院农业部微生物资源及其应用重点实验室,北京,100094)(屮国农业人学吴桥试验站,吴桥,)摘要从屮国农业大学根瘤菌菌种保藏屮心筛选出19株苜蓿根瘤菌,利川河北吴桥的土壤,经温室盆栽实验筛选出适介Vector苜蓿品种的3株高效根瘤菌CCBAU30138、CCBAUN210及CCBMJN96077。并将三株菌进行田间接种效果验证,田间试验结果表明,接种CCBAUCCBAU30
2、138.CCBAUN210和CCBAUN96077后,全年干草产量分别比对照增加11.9%、10.2%和13.73%,单位面积蛋白质产量比对照增产19.63%、15.63%和13.59%。上述结果说明,通过土壤筛选的高效根瘤菌可以应用到牛产中。关键词:根瘤菌、紫花苜蓿、筛选、田间效果冃U吞提高紫花苜蓿产量最重要的方法是给苜蓿接种高效根瘤菌。该措施可以使共生体从空气中固氮的总量达到200—400kg/ha.(N.A.ProvorovetaL1994)。日前美国有80%的紫花苜蓿在种植之前进行根瘤菌接种。在加拿大和澳大利亚,紫花苜蓿接种根瘤菌技术已经被普遍接受
3、。紫花苜蓿一根瘤菌共生固氮效率涉及到寄主植物、根瘤菌和环境间复杂的互作。完全有效的结介仰赖寄主植物相关基因和根瘤菌相关基因的相容性(Tan,1981)0Dhigg(1978)和Tan(1981)研究结果衣明,与紫花苜蓿固氮过程相伴随的乙烘述原率和其它的一些性状受基因控制,Tan(1981)研究还发现,紫花苜蓿乙烘还原率的变异在不同的根瘤菌间差异较人。Tan(1986)揭示各种变异成分对总变异的贡献发现,紫花苜蓿品种变异对总变异的贡献超过30%,根瘤菌菌系的变异占26%,超过3696的变界是紫花苜蓿与根瘤菌的互作引起的。木实验利川华北地区的土壤,在温室条件下
4、对华北地区最近推广的紫花苜蓿品种Vecter进行高效根瘤菌筛选,并将筛选的高效根瘤菌在田间条件卜迪行进一步验证。以检验该高效菌的接种效果。材料与方法1.1材料及其来源1.1.1品种及其来源:根据近年在黄淮海平原品种比较试验及推广应用现状与前杲,选择Vector苜蓿品种,该品种主要由加拿人北极星公司引进。1.1.2菌株及其来源表1供试菌株及其来源Table1•Strains,itshostandorigin菌系名称寄主植物來源地区CCBAU25119紫花苜蓿山东CCBAU25132紫花苜蓿山东CCBAU25166紫花苜蓿山东CCBAU3004紫花苜蓿河北CC
5、BAU30015紫花肯蓿河北CCBAU30085天蓝苜蓿河北CCBAUCCBAl'30138紫花肯蓿河北CCBAU45236紫花苜蓿河南CCBAU96068紫花苜蓿新疆CCBAUN96077紫花苜蓿新疆CCBAU96174紫花苜蓿新疆CCBAUNM006紫花肯蓿内蒙CCBAUNMG024-1紫花苜蓿内蒙CCBAUNMG038-1紫花苜蓿内蒙CCBAUQH180紫花苜蓿青海CCBAUQH401-1紫花TY蓿青海CCBAUSH249紫花苜蓿陕西CCBAUSX080紫花苜蓿山西CCBAUN210紫花苜蓿宁夏1.2温室土壤及试验地概况:1.2.1温室土壤来源及概况
6、:温室土壤來源于河北省吴桥县屮国农业大学实验站,随机选取5个样点,在田间去掉表层3-5cm土壤后进行取样。土壤类型为壤土,冈值为8.3,有机质含量为1.12%,全氮含量为0.092%,速效磷为19.35mg/kg,速效钾为77.91mg/kg01.2.2试验地概况:试验地位于中国农业大学吴桥试验站。屈黑龙港流域中部。海拔14m,地下水位6—9m,1995—2001年平均降水量为509.6mm,2002年前10个月的总降水量为248.lmnio供试土壤为壤质底粘潮土,地面平坦,土层深厚。耕层土壤有机质含量为0.88%,全氮为0.058%,碱解氮为22.5mg
7、/kg,有效磷为17.lmg/kg,速效钾81.6mg/kgo1・3研究内容与方法1.3.1根瘤菌培养:将匕述菌株分别平板划线培养,挑起单菌落接种在YM八培养基上,在28°C培养箱中培养72小时,用无菌水洗下根瘤菌体,装入无菌三角瓶中。1.3.2种子处理及接种:将种子放在培养皿中的纱布上,用无菌水浸湿纱布,放在28°C培养箱屮催芽48小时。将从各地取冋土壤放入花盆内,将花盆放入托盘屮,从托盘屮定期浇入适量水,从花盆底部穿一纱布以利于吸水。川银子将发芽的种了放入培养皿屮用菌液浸泡15分钟,然后栽植于13X15cm花盆屮,每个花盆栽植20株。吸取菌液接种于种子
8、周围,根据测定菌液的0D值(入=600nm),接种时保证每棵种苗接