半月板移植实验研究及临床应用进展

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1、半月板移植实验研究及临床应用进展屮华外科杂志1998年第7期第36卷综述作者：周勇唐农轩范清宇单位：710038两安，第四军医大学唐都医院骨科近10余年來，针对半月板结构与功能重建，许多学者进行了异体半月板移植实验研究,并应用于临床实践。利用移植同种异体半月板在结构及功能上重建、修复被切除半月板的膝关节，被认为是半月板外科的--种重要的替代治疗措施口〜5］。一、同种异体半月板移植的实验研究同种显体半月板移植的基础源于半月板的组织学及结构特征。与关节滑膜连接的外侧1/4到1/3半月板处，有数根动脉支形成血管网并发出侧支穿入半月板，支配半月板边缘20%的区域。半月板邻近滑膜缘的裂伤通过缝合可以

2、愈合，不致引起半月板组织结构变化［6］。止是滑膜缘丰富的血管支成为移植半月板成活的基础并为移植半月板提供营养支持。成熟的关节软骨保存及临床应用方法是半月板移植的重要前提。众多学者研究及临床应川业已证明异体关节软骨可冷冻保存，经冷冻保存组织的免疫原性明显卞降。由于细胞处于软骨基质的包裹之中，移植后不发生明显的免疫反应。经保存组织内40%〜50%的软骨细胞可以存活,-•俟营养通道建立，组织即恢复新陈代谢并保持原有纽织结构［7］。William［8］进行了犬同种异体半月板移植的实验研究，观察了移植半月板的生物学行为，发现移植半月板边缘可与关节滑膜组织良好愈合，术后12周向滑膜缘向移植半月板内长入

3、的血管数量增加，半月板内有软件细胞存活，胶原纤维排列规则，无变性融合；移植半刀板有传导载荷的力学性能。He［9］利用毛细血管成像技术研究移植的异体半刀板血管再生的结果证实，术后12周有丰富的新牛毛细血管由关节滑膜缘向移植半月板内牛长oKeating等［10］对36只山羊进行了冷冻保存同种异体半月板移植的实验研究，结果表明移植半月板与滑膜缘牢固愈合，移植半月板形态正常；术后7个月内移植半月板及关节内未发生免疫反应，其原因被认为是可引起免疫反应的细胞成分被包裹于基质中而不能暴露致敏的缘故。Ochi等［11,12］进行的鼠新鲜异体半月板移植细胞及体液免疫反应的观察研究表明，新鲜异体半月板移植不引

4、起宿主的细胞及休液免疫反应，新鲜异体半月板移植无明显免疫排斥反应发生，并认为新鲜异体半月板可能不需经特殊的处理措施即可应用。但Van等［13］和Khoury等［14］通过对新鲜及冷冻保存的异体半月板人类白细胞抗原(HLA)及ABH抗原的研究证实，半月板内纤维软骨细胞表面HLA-I类抗原阳性并含有ABH阳性内皮细胞，异体半月板虽经冷冻保存，但细胞农而的HLA及ABH抗原分子结构仍存在，细胞成分虽被缺乏免疫原性的软骨基质包裹，但抗原成分一经暴露，仍可引发一定程度的免疫反应，并认为应用经冷冻保存的异体半月板较新鲜者更少免疫反应，从而保证较高的移植成功率。Amoczky等［2］1992年以犬为实验

5、对象进行了经冷冻保存半月板的细胞再生过程的实验研究，结果显示经液氮冷冻保存的自体半月板正位移植后即行Na235SO4核索标记检查其内缺乏核素标记，表明此时无活性细胞成分；Jackson等［15］用DNA探针技术研究新鲜异体移植半月板内活性细胞结果也表明未经移植的半月板内无供体DNA标记。但移植两周时移植半月板内10%的活性细胞成分再生，并认为活性细胞成分系源于受体关节滑膜缘内的滑膜细胞；4周后移植半月板内活性细胞数量明就增加，细胞代射活性增强，表现为细胞线粒体增生活跃，蛋白合成增加，宿主DNA含量接近正常对照组，术后12周至24周移植半月板内活性细胞数量、结构及分布与正常对照半月板相同，经

6、冷冻保存的半月板及移植半月板生物力学性能及组织学性状无明显变化。Jackson等［16］进行的类似研究结果则表明，在・156°C保存30天移植的同种异体半月板内，结构完整的细胞数量仅有30%,而营养通道建立后，活性细胞数量迅速增多，再生的纤维软骨细胞可合成并分泌细胞外基质、胶原及蛋白多糖，水含量增加12%〜24%,蛋白多糖含量移植早期降低，但6个月后逐渐增高接近正常对照组。对移植半月板而言，细胞分布表现为半月板屮间多退变细胞，而其接近滑膜缘及半月板上下表面的组织中增牛活跃的活性细胞成分较多，这与接近营养区密切相关。正是关节腔的滑液及逐渐增生的滑膜血管通道为移植半月板提供了必要的营养支持。N

7、abeshimaL17］1995年报告了纤维蛋白胶（fibringlue）及内皮细胞生长因子（endothelialcellgrowthfactor）局部注射对移植异体半月板早期愈合的影响。结果表明，应用纤维蛋白胶或（和）内皮细胞生长因子于移植半月板滑膜缝合缘局部注射，无免疫反应发生；单纯缝合组早期愈合率为22%；注射纤维蛋白胶者为52%；而注射纤维蛋口胶及内皮细胞生长因子者为64%,且早期移植半月板内即有细胞再牛，术后