《论文_DNA分子诊断技术应用研究进展(定稿)》

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1、摘要：介绍了DNA的多态性及其在医学、植物育种、破案等方而的应用，论述了DNA在各应用领域的研究进展，对其未来发展进行了展望。关键词：DNA分子诊断；遗传物质；多态性；DNA数码中图分类号：Q523文献标识码：A1DNA分子诊断技术可揭示DNA的多态性DNA分子诊断技术（DNA—baseddiagnostictechniques）是指通过直接分析遗传物质的多态性来诊断生物内在棊因排如特性、转录、复制及其外在性状表现规律的技术。经过短短20多年的发展过程，该技术已显露出其广阔的应用前景。DNA分子诊断技术可分为两大类：一类是以电泳技术和分子朵交技术为核心的分子诊断技术，

2、如RFLP（RestrictionFragmentLengthPo1ymorphism）技术及DNA指纹（DNAFingerprinting）技术等。该类技术的共同点是利用一种或几种限制性内切酶消化不同生物个体的DNA分子，再通过特异性克降或合成的探针进行分子杂交来揭示其DNA的多态性。另一类是以DNA扩增技术和电泳技术为核心的分子诊断技术，如RAP（RandomAmplifiedPolymorphic）技术及CAPSCC1eavedAmp1ifiedPo1ymorphicSequence）技术等。该类技术的共同点是利用合成的随机引物（常为5个〜10个或更多个寡聚核井

3、酸），通过PCR扩增不同生物个体的DNA分子，然后立接迹行电泳分析来揭示其DNA的多态性，从而在保学、植物冇种、破案等方而发挥作用。2DNA分子诊断技术应用研究进展2.1DNA分子诊断技术在医学上的应用在通常情况下，医生对疾病作出诊断是通过对病人的直接讯问或物理、化验检查来进行的。通过这一系列诊断方法的比较可以看出，以化验检查中的特异性和墩感性的分子水平上的检测为最理想。因为用化学或免疫方法对蛋白质和酶的分析都涉及到棊因的检测。而运用DNA检测（如DNA探针检测）来诊断疾病则对以达到前所耒有的特异性强、灵敏度高、既简便乂快速的目的。从分子牛物学的角度看，疾病的发牛就意

4、味着显常基因的出现，而如何测出显常基因，从目前的研究进展情况可知，有两类基因涉及到疾病的发生和发展。一类是内源基因（即病人本身的基因）发生了异常，如常见的遗传病；而另一类是外源基因，如通过微生物和寄生虫对人的感染，把其基因带入人体，从而引起各种感染和寄生虫病，这方面的疾病包括肝炎、痢疾、疟疾等。把内源基因的异常和外源基因的入侵检杏出来，这就是DNA分子诊断（基因诊断）方法。为快速、准确地对生物大分子进行DNA的探测，科学工作者经过长期艰苦的研究，终于开发成功了DNA探针。用于诊断的DNA探针是从各种导致疾病的病毒、细菌、癌细胞中提取的DNA分子在实验室复制而成的。所谓

5、DNA探针，就是DNA（单股）小片段用同位索以及酶、荧光分子或化学发光催化等予以标记而成°其诊断疾病的具体步骤如下：第一，先抽取病人的组织或体液作为化验样品，在抽取的样品小包含有致病有机体。第二，将样品中的DNA分离出来。第三，用化学方法或物理方法使样品中DNA的两条链分离开。第四，将DNA探针加到化验样品中寻找其互补链，并与之结合（杂交）在一起；找不到互补链的DNA探针可以被洗脱。这样，通过遗留在样品中的标记过的DNA探针进行基因分析就可判断该病人所得的疾病。DNA分子诊断已经用于临床的有腹泻病原菌病毒、人性病病原体、巨细胞病得、乙型肝炎病毒、苞诊病毒、癌症及艾滋病

6、毒，用于产前诊断遗传性疾病的有镰刀贫血症、地中海贫血和肌营养不良等，均取得了前所未有的诊断效果。近期公布的一份调查报告显示，川人肠杆菌内毒索基因探针调查一些泰国腹泻的儿童，得出了结论，它还可以检测这种内毒索人肠杆菌的水源污染，以这种方法检测水比传统方法敏感10000倍，检测粪便比传统方法敏感1000倍；川这种高效、敏感方法进行流行病调査，对采取有效预防措施很有帮助。2.2DNA分子诊断在植物育种上的应用杂交育种是植物最重要的育种技术，而亲本选配是杂交育种的关键步骤。亲本选配必须考虑的一个重要因素是测定亲本间的遗传距离，以确定其亲缘关系。山于受到体内外环境1大I素、数量

7、性状遗传及显性和上位性等因索制约，用传统的形态特征或同功酶等分析方法确定亲缘关系效率偏低，而采用DNA分子诊断技术，直接对遗传信息的载体DNA分子进行差异性分析，则能快速、准确地确定不同生物个体间的亲缘关系，从而提高育种效率，并可有效地测定杂种优势。DNA分子诊断技术不仅在杂交育种上有关键性的作用，而且在测定新培育出来的品系的纯度上也是不可缺少的。还有，它在甜种资源的研究中同样具有重要的应用价值。在杂交等育种实践中，往往会遇到这样的问题，新培育出來的品种或品系，有可能因管理或其他内外环境因素影响而岀现纯度卞降，从而影响产量与品质。采川DNA分子诊断技