数据分析——基线和阈值的设定

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1、数据分析——基线和阈值的设定确定正确的基线设定合适的阈值注意:同样的实验最好使用同样的基线和阈值,这样可以增加实验的准确性、重复性。但是阈值和基线不能被保存,因此必须记录基线的缺省值在3~15循环阈值的缺省值是基线范围内荧光信号强度标准偏差的10倍双击Y轴,将图转化为线图,确定最先出现的反应是否出现在15个循环后,如果是出现在15个循环后,那么不需要调整基线高丰度靶基因经常在PCR循环早期开始扩增需要调整基线的循环终止值先将基线终止循环数定为6,单击Update然后确定第一个检测到扩增的循环数(比第一个检测到扩增的循环数少1或2个循环的数量)将基线终止循环数定为8双击Y轴,将图转化为对数图不

2、正确的基线设置基线终止循环数太低基线终止循环数太高阈值的缺省值是基线荧光信号强度标准偏差的10倍可以将阈值线的光标移到符合下列条件的扩增曲线的位置:指数扩增的线性阶段精度最大敏感性最大

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