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时间:2019-10-13
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1、第八十一章临床检验第一节临床血液学检验血常规检查【标本】抗凝静脉血(有些仪器也可用末梢血)。【方法】血液细胞H动分析仪测定法。【试剂】血液细胞自动分析仪配套试剂。【操作】详见口己实验室血液细胞口动分析仪使用手册。【附注】1.血常规包括白细胞计数及分类、红细胞计数、血红蛋白浓度、红细胞比积、血小板计数等项目。这些项目亦有相应的手工方法,详见有关资料。2.半白动及全自动血液细胞分析仪从设计上均要求用抗凝静脉血。其优点为:(1)静脉血能正确地反映病人实际情况,重复性好;(2)利于延长仪器的使用寿命;(3)解决了釆血盘的交叉感染问题等。3.血细胞
2、计数应用EDTA・K2:为抗凝剂(EDTA・K?・2H201.5〜2.2mg可抗凝1ml血)。4.贮血容器应选川有盖塑料管。抗凝血采集后在室温中贮存应不超过6h:如需制作血涂片应在2h内完成。5.测定前必须将EDTA・&抗凝血充分混匀。6.血细胞分析仪测定最适温度为18〜22°C,低于15°C或高于30°C,均可使细胞体积发生改变,影响各参数的结果。7.血细胞分析仪用于白细胞分类只能当作一种过筛手段,当白细胞、红细胞、血红蛋白和血小板的任何一项有明显升高或降低;白细胞分类出现界常结果(屮间细胞群百分率>8.0%);红细胞、白细胞和血小板的
3、任何一个直方图出现界常图形等情况,须用显微镜检查及分类。嗜酸性粒细胞直接计数【标本】末梢血或抗凝静脉血。【方法】直接计数法。【试剂】1.Hinkclmann液;2.乙醇-伊红稀释液;3.伊红-丙酮稀释液。【操作】1.小试管中加稀释液0.38mlo2.常法取末梢血20ul,加入管内混匀,待红细胞溶解后两侧充池。3.静置3〜5min,用低倍镜(必要时用高倍镜)镜下计数10个大方格内嗜酸性粒细胞数。总数X20X106=嗜酸性粒细胞/L。【附注】1.血液稀释后应T1h内计数完毕。2.充池前要充分混匀,但乂不宜用力过猛。3.住院病人采集标木时间力求
4、统一,以免受口间生理变化的影响。红细胞沉降率测定【标本】抗凝静脉血。【方法】魏氏法。【试剂】109mmol/L枸椽酸钠溶液。【操作】1.3mmX100mm试管1支,在2ml容量处刻上记号,加抗凝剂0.4ml。2.静脉釆血后,取卜•针头,加血至刻度,旋转混合。3.用血沉管(300mmX2.5mm)吸取上述混匀血液至”0”刻度处,拭去管外附着的血液,将管垂直立在血沉架上。4.记时,室温中静置lh,观察血浆高度,以红细胞卜-沉的毫米数报告之。【附注】1.红细胞在单位时间内下沉的速度与血浆蛋口的量与质,血浆中脂类的量和质,红细胞的大小与数量,是否
5、成串钱相聚以及血沉管的内径、清洁度、放置位置是否垂直,室温高低等因索都有关系。2.标本采集时应空腹。3.血液和抗凝剂的比例要准确。4.血沉管内径要标准(2.5mm),放置耍垂直。5.做血沉的标木要在采集后3h内测定,并充分混匀。6.室温过低、过高和贫血时,对结果有影响。为此,血沉应尽量放在18〜25°C室温卜-测定。室温过高时血沉加快,可以按温度系数校正。室温过低时血沉减慢,无法校正。网织红细胞计数【标本】末梢血或抗凝静脉血。【方法】百分计数法。【试剂】10g/L煌焦汕蓝生理盐水溶液或10g/L煌焦汕蓝ACD溶液。【操作】1.于小试管屮滴
6、加1滴煌焦汕蓝生理盐水溶液或煌焦汕蓝ACD溶液。1.加入末梢血或静脉血2滴于上述试管中,混匀。2.静置15〜20min后,取用1滴制成薄片。3.油镜下检查1000个红细胞中网织红细胞数,以百分率或绝対值报告。【附注】1.活体染色时间不能过短,室温低时,放37°C温箱。2.网织红细胞也可用Miller窥盘计数法、荧光染色或流式细胞仪计数。嗜碱性点彩红细胞计数【标本】末梢血。【方法】7T分计数法。【试剂】1.甲醇;2.碱性亚甲基蓝染液(保存2〜3周)。【操作】1.按常法制成薄血片,自然干燥后,用甲醇固定3mino2.用碱性亚甲基蓝染液染色1〜
7、2min,水洗待干。3.川汕镜计数1000个红细胞中嗜碱性点彩红细胞数,以百分率报告。【附注】1.川碱性亚甲基蓝染液染色后,红细胞星浅蓝绿色,嗜碱性点彩呈深蓝色。2.也可川瑞氏染色,嗜碱性点彩呈蓝黑色。3.山于点彩红细胞分布不匀,必要时扩大计数红细胞数。红斑狼疮细胞检查【标本】静脉血。【方法】改良血块法。【操作】1.抽取患者血液2〜3ml,注于干燥试管内,于室温待凝。2.于凝固刚形成时,用竹签将凝块搅碎,并将残余凝块除去。3.以2000〃分钟离心沉淀10分钟,使白细胞聚集在同一层面,以利于狼疮细胞形成。4.置37°C温箱内温育2h。5.収
8、出口细胞层及其上下各少许,置红细胞比积管中,以2000r/分钟离心,沉淀10分钟。6.吸去上层液,轻轻吸取白细胞层,制成薄片3〜4张。7.以瑞氏染液染色、镜检。【附注】1.整个操作时间不能超过
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