nsaids干预raw2647细胞炎症模型甘油磷脂代谢的uplcqtofms分析

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1、目录中文摘要I[Abstract]i引言1第一章文献综述11」RAW264.7细胞中甘油磷脂类物质的含量和分布11.2RAW264.7细胞与甘油磷脂代谢的相关性研究11.3非當体抗炎药作用机制的研究现状21.4细胞脂质组学和磷脂组学41.5UPLC/Q-TOFMS的原理及应用51.5.1UPLC/Q-TOFMS仪器结构简介及工作原理51.5.2UPLC/Q-TOFMS的应用71.6化学计量学在脂类组学中的应用81.7本研究的目的和意义9第二章RAW264.7细胞甘油磷脂成分的UPLC/Q・TOFMS分析112.1引言112.2实验材料122.2.1实验主要耗材122.2.2实验主要仪器及

2、设备132.3实验试剂的配制132.3.1细胞培养液的配制132.3.2亮氨酸■脑啡肽的配制132.3.3盐酸溶液的配制132.3.4标准品的酉己制132.4实验方法132.4.1细胞的培养与样品的制备132.4.2UPLC/Q-TOFMS分析152.5实验结果162.5.1UPLC分离的结果162.5.1RAW264.7细胞中廿油磷脂类成分的一级质谱鉴别结果172.5.2RAW264.7细胞中甘油磷脂类成分的二级质谱鉴别结果172.6讨论382.6.1对细胞样品的考察382.6.2对色谱条件的优化42263方法的重现性考察432.6.4RAW264.7细胞甘油磷脂类成分的一级质谱鉴别4

3、72.6.5RAW264.7细胞屮甘油磷脂类成分的二级质谱鉴别482.7本章小结62第三章NSAIDs干预不同状态RAW264.7细胞的UPLC/Q-TOFMS分析633.1引言633.2实验材料633.2.1实验主要耗材633.2.2实验主要仪器和设备643.3实验试剂的配制643.3.1细胞培养液的配制643.3.2MTT的配制643.3.3非笛体抗炎药溶液的配制653.3.4KLA的配制653.4实验方法653.4.1细胞培养653.4.2MTT实验653.4.3细胞样品的分组及制备653.4.4TNF-a的测定663.4.5细胞中甘油磷脂类成分的提取673.4.6样品的UPLC/

4、Q-TOFMS分析673.5实验结果673.5.1不同组样品中细胞的形态差异673.5.2MTT实验结果693.5.2TNF-a的测定结果693.5.4建立UPLC/Q・TOFMS甘油磷脂代谢总离子流谱图703.6讨论713.6.1细胞形态的差异性713.6.2样品的TNF・a测定713.7本章小结71第四章化学计量学分析724.1引言724.2数据预处理及数据分型724.2.1导出UPLC/Q-TOFMS总离子流图的数据734.2.2ESI4-及ESI■离子模式下的数据分型764.2.3生物标记物的筛选764.3数据分型结果及讨论764.3.1PCA建模方法对样品的分型764.3.2P

5、LS-DA建模方法对样品的分型794.3.3PCA和PLS-DA对数据分型结果的讨论824.3.4PCLDA和PLSDA建模方法对样品的分型834.3.5PCLDA和PLSDA对数据分型结果的讨论864.4生物标记物的筛选结果及讨论904.4.1SBBS方法筛选生物标记物904.4.2筛选生物标志物的讨论984.4.3潜在生物标记物的生物学意义1024.5本章小结105第五章结论、创新点与展望1065」研究成果1065.1.1RAW264.7细胞中甘油磷脂类成分的UPLC/Q-TOFMS分析1065」.2NSAIDs干预不同状态RAW264.7细胞的UPLC/Q-TOFMS分析••…10

6、65.1.3化学计量学分析1065.2创新性1075.3展望参考文献攻读硕士期间发表的论文中英文缩略词表致谢107109119120121中文摘耍NSAIDs干预RAW264.7细胞炎症模型甘油磷脂代谢的UPLC-Q/TOFMS分析中文摘要RAW264.7细胞是小鼠单核巨噬细胞白血病细胞，其甘油磷脂类成分在炎症反应、免疫反应和吞噬反应中发挥着关键的作用。本研究运用脂组学方法，探讨与炎症发生、消退过程相关的廿油磷脂类生物标记物。1.RAW264.7细胞甘油磷脂类成分的UPLC-Q/TOFMS分析木研究建立Kdo2-LipidA诱导下的RAW264.7细胞炎症模型，运用UPLC-Q/TOFM

7、S分析RAW264.7细胞中的甘油磷脂类代谢物，采用ESI+和ESI■两种离子模式，建立了全面、快速分离RAW264.7细胞中甘油磷脂类成分的分析方法，通过一级质谱的精确分子量信息、二级质谱的裂解碎片信息以及与标准品、参考文献相比对的方法，鉴别了RAW264.7细胞中的78个廿油磷脂类成分，有22个磷脂酰乙醇胺、49个磷脂酰胆碱、4个磷脂酰甘油、1个磷脂酰肌醇和2个未知的甘油磷脂类成分，可能有5个甘油磷脂成分是RAW264.7细胞中