细胞融合技术

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1、细胞融合技术第三节本节目标1．通过阅读了解细胞融合技术的一般原理，知道细胞融合的几种诱导方法。2．掌握细胞融合技术在育种上的应用，比较细胞融合技术育种与常规的杂交育种的优缺点。3．提出自己的单克隆抗体的制备方案，通过讨论和相互评价，在自主探究中，掌握单克隆抗体的制备技术及应用，体验科学家的科学探索过程。4、植物体细胞杂交及应用【重点、难点】1、细胞融合技术的一般原理，知道细胞融合的几种诱导方法。2、单克隆抗体的制备方案。3、植物体细胞杂交及应用一.细胞融合技术阅读课本第30-31页内容，回答问题：1.什么

2、叫细胞融合技术？2.常用的人工诱导细胞融合的方法有哪几种？哪一种重复性强，对原生质体伤害小，方法简单，可控性强？用人工方法诱导细胞融合，并在一定条件下使融合细胞分化再生，形成新物种或新品种的过程。物理法：离心、振动、电融合技术（电刺激。伤害小，可控性强）化学法：用聚乙二醇（ＰＥＧ）诱导灭活的病毒：仙台病毒、疱疹病毒等（适合动物）动物细胞融合（细胞杂交）－2个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程细胞A细胞B杂种细胞灭活的病毒物理法化学法仙台病毒疱疹病毒新城鸡瘟病毒离心振动电激聚乙二醇融合后形成的细胞称为杂交

3、细胞用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程细胞核病毒颗粒细胞核细胞电融合仪抗体是由何种细胞产生的？2.抗体是如何产生的？？二.动物细胞融合与单克隆抗体读下面一段文字资料，思考以下问题：长期以来，为了获得抗体，采用的是把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需抗体的方法。用这种方法获得的抗体，不仅产量低，而且抗体的特异性差，纯度低，反应不够灵敏。人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单

4、一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。1、请从以上文字资料中找出单克隆抗体的概念用单个B细胞进行克隆，得到的细胞群能够分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体，这种抗体就叫做单克隆抗体。（一）单克隆抗体概念1、如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？单克隆抗体问题讨论提示：1.什么样的细胞可以产生抗体？2.什么样的细胞可以无限增殖？设计方案：一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞－－能无限增殖杂种细胞单克隆抗体B淋巴细胞注射特定抗原蛋白骨髓瘤细胞培养骨髓瘤细胞融合（只考虑两两融合）培养液中

5、细胞有几种类型？融合细胞几种类型？骨髓瘤细胞---骨髓瘤细胞B淋巴细胞---B淋巴细胞B淋巴细胞---骨髓瘤细胞多种杂交细胞在具有筛选作用的培养基上培养专一抗体检验阳性克隆上述杂交细胞分开不同杂交细胞，克隆专一抗体，检验阳性细胞单克隆抗体注射到小鼠体内体外培养（二）、单克隆抗体的制备过程第1次筛选目的：得到杂交瘤细胞（多种）。第2次筛选目的：在杂交瘤细胞中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。该细胞继承双亲细胞的遗传特性，既能产生专一抗体又能无限增殖。杂交瘤细胞有何特点？特异性强，灵敏度高腹腔注射法①诊断疾病

6、（识别作用，如同位素标记单克隆抗体，可诊断肿瘤、心血管畸形等）（三）单克隆抗体的应用优点：准确、高效、简易、快速②用于治疗疾病和运载药物（主要用于癌症治疗，也可运载药物，如“生物导弹”）（导向作用，作为载体，生物导弹=单克隆抗体+药物，治疗肿瘤）（位置准确、疗效高、副作用小）诊断乳腺癌单克隆抗体小结两个过程动物细胞融合过程动物细胞培养过程“一二三”二次筛选—筛选杂交瘤细胞、能产生所需抗体的杂交瘤细胞一个新细胞——杂交瘤细胞三个优势——产量大、特异性强、灵敏度高(理化性质单一)的优势单克隆抗体三、植物体细胞

7、杂交技术与作物育种杂交的两个细胞用纤维素酶、果胶酶处理细胞壁（酶解法）原生质体Ａ、Ｂ经离心、振动、电刺激用聚乙二醇（ＰＥＧ）诱导融合后的原生质体再生细胞壁杂种细胞脱分化细胞分裂愈伤组织杂种植株再分化（植物体细胞融合完成的标志）植物细胞融合植物组织培养白菜甘蓝白菜－甘蓝植物体细胞杂交意义？p33细胞融合技术可以避免受精过程，在亲缘关系较远的物种间实现基因转移，创造出自然界没有的新物种。意义：克服远缘杂交不亲和的障碍，实现种间遗传物质的重组2、动植物细胞在结构上有何区别？这与它们杂交或融合过程有什么影响？3、

8、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？离心、振动、电激等物理方法；聚乙二醇诱导等化学方法问题讨论动物细胞无细胞壁，动物细胞融合过程中不须去除细胞壁和再生出细胞壁。１、植物体细胞杂交最终得到的是完整的植物个体，动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗？不能，只能得到杂交细胞4、动物细胞融合能利用上述两类方法吗？还有其他方法吗？能，还可以利用灭活的病毒（生物方法）进行诱导问题讨论５、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是否