肺气肿肺气虚证模型大鼠血液流变学实验研究（医学论文）

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1、肺气肿肺气虚证模型大鼠血液流变学实验研究作者：刘向国，方志斌，蔡圣荣，王元勋摘要：目的：观察肺气肿肺气虚证模型大鼠血液流变学的变化,探讨其在肺气肿肺气虚证发病中的作用机制。方法：将90只SD大鼠随机分为对照1个月、2个月、3个月组和模型1个月、2个月、3个月组，采用气管内注入脂多糖(LPS)和烟熏双因素复合制作肺气肿肺气虚证大鼠模型，观察模型大鼠血液流变学的变化。结果：与对照组相比，模型组大鼠动脉血全血黏度(高切、低切)、血浆黏度、红细胞压积、红细胞聚集指数及纤维蛋白原均升高。结论：肺气肿肺气虚证模型大鼠血液存在高黏、高浓、高聚的流变特性。关键词:肺气肿；肺气虚证；血液流变学肺气虚证是中医

2、的一个常见证候，是以肺功能减退为主要特征的全身多系统功能衰退综合征。研究发现，肺气虚证是肺气肿最常见的证型，它直接影响肺气肿的发生和发展，贯穿于肺气肿的整个病程之中[1],且肺气的盛衰与肺气肿病情轻重一致。本研究通过对肺气肿肺气虚证模型大鼠血液流变学变化的观察，探讨其在肺气肿肺气虚证发病中的作用机制，为肺气肿肺气虚证动物模型客观化、标准化评价及肺气虚证本质的研究提供实验依据。1材料与方法1.1实验动物与分组健康SD大鼠90只，雌雄各半，体质量200-250g（由安徽省全椒安立实验动物有限公司提供），随机分为对照1个月、2个月、3个月组，每组10只；模型1个月、2个月、3个月组，每组20只。

3、1.2仪器与试剂MDK3200K双通道全自动血流变仪：重庆麦迪克科技开发有限公司；脂多糖（LPS）:美国Sigma公司；造模用香烟：合肥卷烟=1厂生产合肥牌过滤嘴香烟，焦油含量15mg/支，尼古丁含量1・3mg/支。1.3肺气肿肺气虚证大鼠模型及对照组的制作模型制作根据参考文献［2］、［3］、［4］中的方法，按以下步骤进行：（1）LPS气管内注入：于实验第Id和第14d,用乙醯吸入法麻醉大鼠后，将大鼠固定于鼠板上，修剪颈部皮毛，消毒，切开颈部皮肤，钝性分离皮下组织及胸骨舌骨肌，暴露气管，用ImL注射器抽吸LPS(1mg/mL)200nL,针头刺入气管后将LPS注入，并注入少量空气以保证LP

4、S全部进入气管，立即将鼠板竖起并适度摇动,使LPS分布尽可能均匀，在切口局部滴入庆大霉素注射液，然后缝合皮肤并用碘酒棉球消毒。(2)烟熏：LPS气管内注入的次日，将大鼠分批置于1m3的烟室中，用锯末50g加10支香烟烟丝混合点燃烟熏，每日烟熏30mine对照组于实验第1d和第14d,按照与模型组相同的手术方法进行操作，往气管内注入等量生理盐水。手术次日，将大鼠置于无烟熏同样环境中饲养。1.4取材及切片每组大鼠分别于1个月、2个月、3个月造模成功后取右下肺和肺门组织置于10%甲醛中固定，常规冲洗、脱水、透明、浸蜡、包埋，连续5mm厚切片、HE染色、中性树胶封片，在光镜下观察肺组织形态学变化并

5、摄片o2结果2.1症状与体征模型组大鼠造模15d后先后出现精神萎靡，蜷伏少动，反应迟钝；毛失光泽、发黄、易脱落；咳嗽，气急，有些有呼吸道分泌物从口鼻流岀，偶可闻及气道痰鸣音。上述症状与体征从1个月至3个月逐渐加重。对照组始终未出现上述症状与体征。2.2肺组织形态学观察2.2.1大体观察与同时段对照组相比，肉眼见各时段模型组大鼠肺体积增大,肺边缘变钝，质软，弹性较对照组略低，且以3个月组最为明显。2.2.2光镜观察①对照组:大鼠支气管黏膜结构和肺组织结构清晰，支气管黏膜上皮排列整齐，纤毛明显可见。无支气管管腔扩张、上皮坏死脱落、纤毛脱失、炎细胞浸润等病理改变；肺泡壁无明显增厚，肺泡腔干净、匀

6、称（见图1）。②模型组：1个月模型组大鼠细支气管壁有慢性炎性细胞轻度浸润（见图2）o2个月模型组大鼠细支气管壁有慢性炎性细胞轻至中度浸润（见图3）o3个月模型组大鼠呼吸性细支气管及肺泡管、肺泡囊扩张，其周围的肺泡间隔变薄或断裂，扩张成大小不等的囊泡，部分呼吸细支气管及肺泡管扩张呈不规则气腔，部分肺泡相互融合形成肺大泡，细支气管壁有慢性炎性细胞重度浸润，黏膜层内有杯状细胞增生，纤毛上皮破损、坏死、脱落、纤毛减少（见图4、图5）o2.3血液流变学变化见表1O图1对照组正常肺组织（HE染色，X100）（略）图21个月模型组肺组织（HE染色,X200）（略）图32个月模型组肺组织（HE染色,X20

7、0）（略）图43个月模型组肺组织（HE染色,X400）（略）图53个月模型组肺组织（HE染色,X200）（略）各组大鼠血液流变学变化（略）注：模型组与同时段对照组相比*P<0.05,杆P<0.01从表1可见，模型组大鼠全血黏度（高切、低切）、红细胞压积及纤维蛋白原在造模1个月后开始升高，与1个月对照组相比，有显著差异(P<0.05或P<0.01);造模2个月后进一步升高,3个月后达最高峰，与3个月对照组相比，