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时间:2019-10-11
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1、大叶蛇葡萄总黄酮提取物的HPLC指纹图谱研究摘要目的:建立犬叶蛇葡萄(Ampelopsismegalophylla)总黄酮提取物的规范化HPLC指纹图谱。方法:用70%乙醇回流提取制备大叶蛇葡萄总黄酗提取物,采用RP-HPLC分析。色谱柱为AngilentTC~C18(4.6mmX250mm,5um),流动相为乙膳-0.2%磷酸水梯度洗脱,检测波长265nm,柱温为30°C,进样量为20nL。结果:测定了11批人叶蛇葡萄总黄酮提取物的指纹图谱,标定了10个共有指纹峰,方法学考察结果符合指纹图谱技术耍求。结论:建立的犬叶蛇葡萄总黄酮提取物的HPLC指
2、纹图谱,为大叶蛇葡萄总黄酗提取物的质量控制提供了依据。关键词大叶蛇葡萄;总黄酮;高效液相;指纹图谱StudyonHPLCFingerprintofTotal-FlavonoidfromAmpelopsismegalophyllaAbstract0bjective:ToestablishaHPLCfingerprintoftotal-flavonoidfromAmpelopsismegalophylla.Methods:Thesampleswerepreparatedwith70%ethanolbyrefluxextractionandanalyze
3、dbyRP-HPLCwithanAgilenTC-QscolumiiC4.6mmx250mm,5pm),gradientlyelutedwiththemixtureofacetonitrileand0.2%phosphoricacidaqueousat30°C,andmonitoredwithUVdetectorat265nm,andsamplevolumeinjectedwas20gL.Results:TheHPLCfingerprintsoftotal-flavonoidfromAmpelopsismealophyllashowed10comm
4、onpeaksin11batchesofsamplesandtheresultwasinaccordancewiththetechnicalrequirementoffingerprinSpectrum.Conclusion:ThisHPLCfingerprintsprovidedabasisforthecontrollingthequalityofthetotal-flavonoidofAmpelopsismegalophylla.Keyword:Ampelopsismegalophylla,Total-flavonoid,HPLC,Finger
5、print大叶蛇葡萄(A田pelopsis/negalophyllaDUset.Gilg)是湖北西部地区民间常用中草药,曾以“霉茶”之名收载于《湖北中草药志》,药用其叶及嫩茎。具有清热利湿、活血化淤的功能,用于高血压病、痢疾、泄泻、小便淋痛、头昏目胀等治疗[1]o课题组前期从屮分离并鉴定了10余种化合物,其中主为黄酮类成分⑵,药理研究表明大叶蛇葡萄的提取物具有降血压和抗病毒的作用氏"。口前,指纹图谱已成为国内外公认的鉴别中药品种和评价中药质量的最有效手段⑸。它是一种综合的、可量化的色谱鉴定手段,借以鉴别真伪,评价原料药材、半成品和成品质量均一性和稳
6、定性,其基本属性是整体性和模糊性⑹结合以上屮药色谱指纹图谱的特点,我们为此采用RP-HPLC法建立大叶蛇葡萄的指纹图谱,确定各共有峰的归属,为其活性物质的质量控制捉供了参考依据。本文将对11批大叶蛇葡萄总黄酮捉取物HPLC指纹图谱分析1仪器与试剂1.1仪器戴安P680高效液相色谱仪(四元泵、紫外检测器170U及配套色谱工作站);GZX-9146MBE数显鼓风干燥箱;SK7200HP超声清洗器;AL204型万分Z—分析天平;旋蒸仪(上海亚荣科技公司)。1.2试剂乙腊(AR,美国);甲醇(AR,美国);双蒸水;磷酸溶液;其余试剂均为分析纯。1.3材料对
7、照品蛇葡萄素、杨梅素、杨梅甘均为口制,经HPLC归一法检测,纯度大于98%;对照品郴皮营(中国药品生物制品检定所,批号:100081-200406);11批约材均经湖北中医约大学生药教研室张秀桥教授鉴定为葡萄科蛇葡萄属植物大叶蛇葡萄AmegalophyllaDielset.GiIg的茎叶。样品来源见表1。表1大叶蛇葡萄样品来源及采收时间样品编号样品采集地采集时间1号样(S1)湖北省来凤县大河镇牡丹坪村2011.6.122号样(S2)湖北省来凤县大河镇冷水溪村2011.6.123号样(S3)湖北省来凤县大河镇满店村2011.6.124号样(S4)湖北
8、省来凤县大河镇杉木塘村2011.6.125号样(S5)重庆市酉阳县兴龙镇兴平村2011.6.106号样(S6)重庆市酉阳县
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