猪流行性腹泻诊断方法研究进展

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1、猪流行性腹泻诊断方法研究进展【摘要】猪流彳亍性腹泻(porcineepidemicdiarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcineepidemicdiarrheavims,PEDV)引起的乳猪的一种以呕吐、腹泻和脱水为主要特征的急性接触性肠道传染病。由于与该病类似的肠道性传染病较多，所以仅通过临床症状和病理组织学变化很难做出准确的诊断。只冇借助实验室诊断技术进行鉴别诊断才能作出确诊。随着对PEDV基因组分子生物学研究的不断深入，多种分子生物学诊断技术开始出现，本文针对该病现有的分子生物学诊断方法

2、进行了阐述。【关键词】猪流行性腹泻；分了生物学；诊断；研究进展AdvancesindiagnosticmethodsporcineepidemicdiarrheaAbstrctPorcineepidemicdiarrheaisapigletfromporcineepidemicdiarrheaviruscausesvomiting,diarrheaanddehydrationasacuteintestinalinfectiouscontactthemainfeature.Becausethediseaseis

3、similartointestinalinfectiousdiseases,whichiswhyonlythroughclinicalsymptomsandpathologicalchangesisdifficulttomakeanaccuratediagnosis.Onlybymeansoflaboratorydiagnostictechniquesinordertomakethedifferentialdiagnosisconfirmed.Withthestudyofgenomicmolecularbio

4、logyPEDVdeepeningvarietyofmolecularbiologydiagnostictechniquesbegantoappear,thepaperforthediseaseexistingdiagnosticmethodsofmolecularbiologyaredescribed.KeywordsPorcineepidemicdiarrhea;MolecularBiology;Diagnosis;Progressadvance猪流行性腹泻(porcineepidemicdiarrhea

5、,PED)是由猪流彳亍性腹泻病毒(porcineepidemicdiarrheavirus,PEDV)引起的—•种严重的病毒性传染病。该病的特征是可以导致哺乳仔猪发生严重的腹泻、呕吐、脱水，并且致死率极高⑴。猪流行性腹泻(PED)在1971年在英国首次被报道，Z后1978年在H本、徳国、比利时等地爆发。在1976年，中国首次报道了该病。在这Z后的20年间，该病已经在我国的20多个省份爆发，给农民及养猪业造成了巨大的损失。在欧洲,猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的腹泻主要集屮在架子猪、育肥猪及青年种猪。在我国，

6、各年龄的猪都极易感染PEDV的猪群⑵。在寒冷季节，猪的病毒性腹泻主耍由猪流行性腹泻病毒引起，保冇与冇肥猪的群的感染率较高于哺乳仔猪和母猪[3]O1.基因型PEDV基因组是单股正链RNA,与其他的冠状病毒具有相似性。PEDV基因组5'端有一个帽子结构(cap),3'端有一个Poly(A)尾。现在已经测定了PEDVCV777株完整的基因组序列，大小为28033bp⑷。目前除了人冠状病毒229E毒株(1ICoV-229E)外，已知的其他冠状病毒成员都有Kozak序列，但是序列有所差异[5]o基因组序列包括6个ORF

7、,从5'-3'依次为编码复制酶多聚蛋Slab.纤突蛋白、ORF3蛋白、小膜蛋白、膜糖蛋白和核衣壳蛋白的基因。在我国有不同于CV777疫苗株的新基因型的PEDV在流行，而他是否是CV777疫苗株的变杲株，还需要进一步的实验验证⑹。2.实验室诊断方法PED在临床症状匕与猪传染性胃肠炎(TGE)极其相似，而通过临床症状很难鉴别出这两种病，有吋还会与猪轮状病毒共同感染。所以，通常用实验室诊断技术来检验是否是PEDV引起的腹泻。常用的实验室诊断技术有微量血清中和试验、免疫电镜法(immunoelectronmicros

8、copy,IEM)、免疫荧光法(fluorescentantibodytechnique,FAT)、酶联免疫吸附试验(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELTSA)、反转录-聚合酶链式反应(reversetranscription-PCR,RT-PCR)等。下面介绍一下如今实验室经常检查的几种分子生物技术：2.1反转录-聚合酶链式反应随着分子生物学的不断发展，关于PEDV