病理学技术考点总结

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1、酶组织细胞化学技术酶组织化学技术的基本原理及方法1、金属沉淀反应,如硫代胆碱铜法,可证明胆碱酯酶和酯酶;2、藕联偶氮色素法3、色素形成与染色法一碱性磷酸酶（AKP）AKP最适宜PH值为9.2-9.4,可被金属阳离子或某些氨基酸激活，多见于活跃的部位，如小动脉、肾小管上皮等。■AKP染色方法：1、Gomri钙钻法：AKP为黑色注意爭项：此法对含铁血黄索和钙盐也可形成棕黑色沉淀，必要时应予以鉴别。并且川于透明的二甲苯为AR级别。2、Gossrau偶氮口引味酚法：酶活性部位呈暗褐色（坚牢蓝VB）、浅红色（坚牢蓝BB）、蓝色（坚牢紫B）二酸性磷酸酶（ACP）AC

2、P前列腺活性最强，在肝脏内毛细胆管旁活性最强。■ACP染色方法：1、Berry硝酸铅法：ACP为棕黑色，特异性抑制酶是氟化钠。2、Leder-Stutt改良蔡酚AS-TR磷酸酯法：ACP为红色。三三磷酸腺昔酶（ATP）ATP分为三类：膜性ATP、肌球蛋白ATP、线粒体ATP,以上三种酶不可用甲醛固定，用冷冻法。膜性ATP肌球蛋白ATP线粒体ATP激活剂NaK+Ca+Mg+抑制剂Ca+Mg+Ca+PH值7.2-7.59.0-9.4存在部位肝脏毛细胆管近曲小管刷状缘毛细血管等心肌其次是件骼肌■ATP染色方法：1、Wachstein-Meisel镁激活酶法：

3、ATP为棕黑色。2、Dubowitz-Brooke钙激活酶法：ATP为棕黑色。注意事项：镁激活的ATP止常肝定位于毛细胆管；钙激活ATPR分于红肌纤维和口肌纤维有意义，对于区分神经性肌萎缩和肌源性肌萎缩有价值。四胆碱酯酶（CHE）广义胆碱酯酶分为胆碱酯酶和乙酰胆碱酯酶，胆碱酯酶的活性中心是丝氨酸，主要分布于血浆、耽腺利唾液腺；乙酰胆碱酯酚主要分布于神经肌肉接头等处。■CHE染色法1、Snell-Garrett胆碱铜法：CHE呈黄色或棕黄色。2、Karnovsky-Roots铁氧化铜法：CHE呈红棕色或深棕色。2希4-3并七冷殊弦屛g少叭淤]__十譌笛「墜

4、包"±r^“丄"应令鬲谭纠曲列的用心如抵柏删坷無总總,厅7、为扌巒'…丁支初书'兴佝雁洱n屮必%）创M砸乙af平）耳0勿。尸/令乡玄另右肪杨磁爾励Mo广厚乡0弓召t敷轸＞2（QC（◎-*6代破飆涵採2函、躱笏颅IWgk氏6他（秦A也网;&一加必2锂涵腳凸斗、叫Qf、力申宅或咼g协皋・*h匕）亠3-qd"0^力晏疏▽二小力叩纟**-Rz七決却y玄适菇祐锹谦热碍羽MCkI必西恶畅临汶0[0uuc（—pay/0&江^]尸以侍〃用亍琢Q必核酸分子杂交技术核酸分子杂交技术：具有•定同源性的原条核酸单链在•定的条件下（适辽的温室度及离子强度等）可按碱基互补原成双链。

5、杂交的双方是待测核酸序列及探针（probe），待测核酸序列可以是克隆的基因征段，也可以是未克隆化的基因组DNA和细胞总RNA。核酸探针是指用放射性核素、牛物素或其他活性物质标记的，能与特定的核酸序列发牛特异性互补的已知DNA或RNA片段。根据其来源和性质可分为CDNA探针、基因组探针、寡核昔酸探针、RNA探针等。Southern杂交、Northern杂交、原位杂交（ISH）、荧光原位杂交（FISH）、芯片杂交（属于固一液相杂交）。核酸分子杂交技术基本方法:1、固定：多聚甲醛2、玻片和组织切片处理：增强组织通透性和核酸探针的穿透性有以下方法，如消化酶、去污

6、剂、TritonX-lOOo降低背景色，多聚甲醛固定后浸入醋酸酊和三乙醇胺。240度烘烤片子除去RNA酶3、杂交：4、杂交后处理：处理切片用浓度由高到低，但温度是由低到高的盐溶液。5、显示：免疫组织化学技术在病理诊断中的应用

7、叶驱屮十从皿；U?肠位炒*、—^#痂戒注泉嘶礙・・「0越<3・劭从上枚松狷林g⑵從臥刊亠C忑炒分勿纸/痞冬V弹滋仏彷必血4缈曲_旃坯鈕礬打蕩妇/玄_尸M:骇也初層E一春•尚〃諒邦勿以衬疣/虽施馬®'卄皿矩如kM凍曰Q岐邂&麦••诩电伽咖九,霧功嗫刃翊^___[%%佈如屈J*倂他巨I毎"一亀—/WQi_木力衣4^^卜必从?5讷勺73：必镯屉竝—如血丄型丼仪吟/必S"护綽册痙-一细胞凋亡检测技术第，二辽芒豊凋亡的形态学和生物学特点一.凋亡过程中细胞的形态学变化和生化学改变1.形态学改变⑴细胞表面结构如伪足、微绒毛等丧失。(2)细胞皱缩及变形。(3)细胞质浓缩

8、。(4曲染色懿怨二昱期逡色质聚集于核周边部而呈新月形，晚期细胞核碎裂成大小不等：