栽培大豆和滩涂能的初步研究

《栽培大豆和滩涂能的初步研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、硕士学位论文栽培大豆和滩涂野大豆及其杂交后代苗期耐盐性与NHX1基因功能的初步研究指导教教授师专业名称细胞生物学研究方向植物逆境生物学答辩日期年四月IdentificationofSaltToleranceandFunctionAnalysisofNHX1GeneinGlycinemax^GlycinesojaandTheirHybridSeedlingsByZhouQihaoADissertationSubmittedtoNanjingAgriculturalUniversityInPartialFulfillmentofRequirementsfortheM

2、aster^DegreeSupervisedbyProf.YuBingjunDepartmentofPlantBiologyCollegeofLifeSciencesNanjingAgriculturalUniversityNanjing210095CompletedinApril,2010目录摘要IAbstractI第一章文献综述1植物耐盐机理及Na'/H"逆向转运蛋白的分了生物学研究11植物耐盐性生理机制研究11」盐胁迫对植物的伤害11.2植物对盐胁迫的适应性12植物Nf/H+逆向转运蛋白的分子生物学研究及应用32」细胞膜Na'/H'逆向转运蛋白的克降及结构

3、特征32.2液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因的分子克隆及进化分析32.3液泡膜Na+/H+逆向转运蛋口的拓扑结构及其特性52.4液泡膜Nf/TT逆向转运蛋口的表达及其调控机制62.5液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白与植物的耐盐性73讨论与展望84本研究的冃的和意义8第二章栽培大豆和滩涂野大豆及其杂交后代苗期耐盐性鉴定111材料与方法121.1植物材料121.2方法122结果与分析142」NaCl胁迫对三人豆品种叶和根屮IC含量的影响142.2NaCl胁迫对三犬豆品种叶和根小Na*含量的影响142.3NaCl胁迫对三大豆品种叶和根中C「含量的影响152.4大豆DN

4、A提取及耐盐标记棊因PCR扩增163讨论17第三章栽培大豆和滩涂野大豆及其杂交后代中NHX1基因的克隆及其功能的初步分析191材料与方法201.1材料201.2实验方法232结果与分析312」半定量RT-PCR312.2亚细胞定位332.3M/X八基因的原核表达373讨论40全文结论43仓新性45存在问题与展望45参考文献47致谢52缩略语AmpAmpicillin氨节青霉素APSAmmoniumpersulfate过硫酸钱CTABCetyltriethylammnoniumbromide十六烷基三甲基滉化钱cDNAComplementaryDNA互补DNADE

5、PCDiethylprocarbonatc焦碳酸二乙脂EDTAEthylenediaminetetraceticacid乙二胺四乙酸GFPGreenfluorescentprotein绿色荧光蛋白IPTGIsopropylthio-p-D-galactoside异丙基硫代■卩・D—半乳糖昔KanKanamycin卡那霉素LBLuria-BcrtanimediumLB培养基ODOpticaldensity光密度MSMurashige-SkoogmediumMS培养基DWDryweight干重PBSPhosphatesodiumbuffer磷酸缓冲液PCRPolym

6、erasechainreaction聚合酶链式反应RT-PCRReversetranscriptasc-PCR反转录聚合酶链式反应SDSSodiumdodecylsulfate1•二烷基硕酸钠SDS-PAGESodium-dodecyl-sulfate-polyacrylamide-ge1-electrophoresisSDS・聚丙烯酰胺凝胶电泳TEMEDN,N,N,N-tetramethylethyleuediamineN,N,N,N—四乙基乙二胺TrisTri-hydroxymcthy1aminomcthanc三坯甲基氨基甲烷X-gal5-bnno-4-ch

7、loro-3-indolyl-p-D-galactosidc5•漠氯・3・卩引味卩D・半乳糖昔bpBasepair碱基对摘要本研究以滩涂野大豆BB52种群、栽培大豆N23674品种及它们的杂交后代4076株系（F5代）幼苗为材料，用150n）mol・L“NaCl溶液胁迫不同吋间后，测定和分析叶和根中Nf、K+和含量变化。提取叶中DNA,通过抗盐标记基因PCR方法比较和分析了供试3大豆材料的耐盐性差异。使用半定量RT-PCR方法分析了大豆叶和根中Na+/H+逆向运转蛋白基因NHX1mRNA水平的盐胁迫响应差异。分别构建表达载体使AWX/基因在洋葱表皮细胞及大肠杆菌

8、BL21中进行表达。主要