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时间:2019-10-07
《ATCC菌株操作说明-中文版(最新)》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、操作前请仔细阅读使用说明“KWIK-STIKMicroorganisms”产品的使用说明防范与限制(PRECAUTIONSANDLIMITATIONS)这类产品仅适用于体外实验。这些设备以及后来在培养基上生长出的微生物属生物危害材料(biohazardmaterial)。这些设备含具有活性的微生物,在一定的环境下可能致病。需使用适当的技术避免任何微生物的暴露和接触。微生物实验室需有相关实验装备,且有可接收、处理、储存、丢弃生物危害材料的设备。使用这类设备的微生物实验室工作人员必须在生物危害材料的操作过程,维护,储存,丢弃等方面接受过培训,具备一定经验,能熟练示范。
2、相关机构和法规对生物危害材料的处理作了规定。各实验室需了解并遵守该生物危害材料处理规定。储存与有效期(STORAGEANDEXPIRATION)在原装密封瓶或含干燥剂的袋中的LYFODISK®、KWIK-STIK™和KWIK-STIK™PlusMicroorganisms三类产品应存放在2°C-8°C。冻干的微生物制剂在有效期内将保持其规格和性能,有效期在设备标签上标明。若出现以下情况,LYFODISK®,KWIK-STIK™andKWIK-STIK™PlusMicroorganisms三类产品不能使用:储存不正确;有过度暴露在湿热环境中的迹象;已过有效期。MBL技
3、术资料TIB.081TMKWIK-STIK操作流程撕掉标签上的拉片,将其贴于捏管帽处安瓿瓶中部(仅一次),从凹口处撕开产品包装初级培养平板或QC记录上使其释放水合液体立即将拭子浸于水合悬液中垂直握住试管并通过挤捏压碎轻拍之,使液体流小球,使其与入含小球的管底液体混合采用适合的生物危害处理法TM丢弃KWIK-STIK用一无菌接种环在先前接种区挤压并旋转拭子,接种于初级培立即培养接种好域划线10-20次,促使其分离出养平板,接种圈的直径约25mm的初级培养平板单菌落注:请严格按照“操作流程”、“推荐生长条件”和“推荐培养方法”活化标准菌株,不建议使用实验室自己的方法及文献方法活
4、化标准菌株,否则菌种供应商不保证菌株的质量且不提供相应的售后服务。21MBL技术资料TIB.081操作流程注:请严格按照“操作流程”、“推荐生长条件”和“推荐培养方法”活化标准菌株,不建议使用实验室自己的方法及文献方法活化标准菌株,否则菌种供应商不保证菌株的质量且不提供相应的售后服务。31MBL技术资料TIB.081推荐生长条件TM(适用于LYFODISK®和KWIK-STIK产品)如何选择最适合的菌种生长条件1.最初的生长最好是在非选择性琼脂培养基上。除非特殊情况或特别推荐,最初的生长一般不考虑液体方法8培养基。这是由于在液体培养基中获得冻干菌株的缓冲活性炭酵母提取物琼
5、脂-----35℃,正常环境,3-5纯种比较困难,污染所带来的杂菌可能会过度生长,天。影响得到目标菌株的纯种。方法9V琼脂或巧克力琼脂-----35℃,5%-10%CO2环2.以下列出可供选择的琼脂培养基和相应的生长条境,48小时。件,供各实验室培养菌种时参考。方法10脑心浸出液肉汤,胰蛋白胨大豆肉汤,或0.85%生方法1理盐水均可选用。胰蛋白胨大豆琼脂,非选择性羊血琼脂,标准计数平非选择性羊血琼脂或胰蛋白胨大豆琼脂-----35℃,正板,或营养琼脂-----35℃,正常环境,24-48小时。常环境,24-48小时。方法2方法11非选择性羊血琼脂-----35℃,
6、正常环境,24-48小时。先接种于MRS肉汤中-----35℃,正常环境,48小时;方法3然后接入含羊血的哥伦比亚CNA培养基中巧克力琼脂(含血红蛋白和NAD)-----35℃,5%------35℃,5%CO2环境,48小时。10%CO2环境,24-48小时。方法12方法4马铃薯葡萄糖琼脂-----45℃,正常环境,48-72小时。厌氧血琼脂-----35℃,厌氧环境,48-72小时;方法13部分专性厌氧菌可能需要5-7天,才能充分生长;取一颗冻干颗粒于10B精氨酸肉汤中,若是对于梭菌,以下新鲜配制的平板也可选用:营养琼KWIKSTIK则溶于自带的培养基中。
7、作系列梯度稀脂,胰蛋白胨大豆琼脂和标准平板计数琼脂(标准方释(例如,1:10,1:100,1:1000,1:10000)。在35℃法琼脂);只是需额外培养24小时。下,正常环境中培养。精氨酸瓶中液体一旦变成粉方法5红色(24-48小时),转接0.1mL到A-8琼脂,划线沙保氏葡萄糖Emmons琼脂-----25℃,正常环境,2-7分离。人型支原体,35℃,5-10%CO2环境;解脲支天;原体,35℃,厌氧环境,培养96个小时。使用显微沙保氏葡萄糖琼脂-----25℃,正常环境,2-7天;镜观察平板菌落。非选择
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