分子生物学题库3

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1、七、问答题1．阐述原核生物的转录终止。(1)转录终止的两种主要的机制是什么?(2)描述翻译怎样能调节转录终止。(3)为什么在细菌转录终止中很少涉及到Pho因子?(4)怎样能阻止转录的终止?2．复制DNA的聚合酶(DNA依赖的DNA聚合酶)也有校正功能，解释为什么RNA聚合酶没有这种功能。3．讨论原核生物基因表达的聚合作用反应定向的重要性。假如核糖体从3’端到5’端读它的模板mRNA的话，那么将会发生什么情况?4．概括细菌细胞内的转录过程。5.概括典型原核生物启动子的结构和功能，并解释什么是保守序列。6．转录如何在基因或基因组末端终止?7．(1)如何区分由

2、启动子起始转录的RNA片段与5’端被加工过的RNA片段;(2)证明多肽是从氨基端到羧基端方向合成的。8．比较E．colirRNA和tRNA的转录和加工。9．区别可诱导和可阻遏的基因调控。10．衰减作用如何调控E.coli中色氨酸操纵子的表达?11．比较并指出细菌和真核生物RNA翻译机理的异同。12．什么是摇摆假说?13．指出E.coli和真核生物翻译起始的不同。14．S．NCohen于1973年构建了三个重组体，pSC102，pSC105，pSC109请说明这三个重组体是如何获得的?各说明了什么?15．基因克隆是如何使含有单个基因的DNA片段得到纯化的?

3、16．什么是细菌的限制—修饰系统(restriction-modificatonsystem,R-Msystem)17．细菌的限制—修饰系统有什么意义?18．说明限制性内切核酸酶的命名原则要点。19．Ⅰ类限制酶具有哪些特点?在基因工程中有什么作用?20．Ⅲ类限制酶有哪些特点?21．何谓限制性内切核酸酶的切割频率?22．什么是限制性内切核酸酶的星号活性?受哪些因素影响?23．双酶消化法(doubledigests)绘制限制性内切核酸酶酶谱的原理。24．什么是DNA多态性(DNApolymorphism)?25．限制性片段长度多态性(restrictionf

4、ragmentlengthpolymorphism，RFLP)。26．计算下列三种酶各自在某染色体DNA序列上识别位点间的平均距离：AluⅠ：5’AGCT3”EcoRⅠ:5’GAATTC3’3TCGA5’3’CTTAGG5’AcyⅠ:5’GPuCGPyC3’3’CPyGCPu5’(注：Py=任何一种嘧啶；Pu=任何一种嘌呤)123图15.1酶切电泳图谱1～2：HindⅢ切割；3～4：ＥcoRV切割；5～6：HindⅢ+ＥcoRV；1、3、5是质粒DNA：2、4、6是15号克隆。图15.2用EcoRⅠ、HpaⅡ单独切割及用这两种酶混合切割30kbBamHⅠ

5、片段产生的DNA带27．在细菌质粒pBP1的四环素抗性基因tetR的中间有一个HindⅡ的切点。用HindⅢ切割果蝇基因组DNA，以pBP1为载体构建基因组文库。分子杂交证明克隆15带有果蝇的目的基因。用HindⅢ和EcoRV对克隆15进行了酶切分析，电泳结果如图15.1(用酶切的pBP1质粒DNA作对照)，旁边标出了片段的大小。(1)绘制含有插入片段和不含插入片段时的pBPl的限制性图谱，并标明四环素抗性基因的位置—;(2)如果用克隆在另一个与pBP1完全不同源载体上的四环素抗性基因作为探针，进行Southern印迹杂交，预测上述电泳图会出现什么样的杂

6、交带?(3)如果用克隆15的果蝇DNA片段作为探针进行Southem印迹杂交，放射自显影的结果又是如何?28．为什么大多数内切酶被称为“限制”酶。29．据Science杂志报道:一种重要的遗传疾病可由导致DNA中碱基替换的诱变剂在体外进行人工诱导。设计一种快速用以鉴定疾病基因型的检测方法。30．为了绘制长为3.0kbBamHⅠ限制性片段的限制性图谱，分别用EcoRⅠ、HpaⅡEcoRⅠ十HpaⅡ消化这一片段的三个样品，然后通过凝胶电泳分离DNA片段，溴化乙锭染色后观察DNA带型(图15.2)。请根据这些结果，绘制一个限制性图谱，要标明E.coRⅠ和Hpa

7、Ⅱ识别位点间的相对位置，以及它们之间的距离(kb)。31．1967年，有5个实验室几乎同时独立发现了DNA连接酶，每个实验室的实验有什么特点?32．简述DNA和RNA连接酶的催化反应机制。33.影响DNA连接酶催化连接反应的因素有哪些?34．什么是Klenow酶?有哪些活性?在基因工程中有什么作用?35.如何利用T4DNA聚合酶制备3’隐含末端或双链平末端?12336.如何利用T4DNA聚合酶进行双链DNA的3’末端标记?37．如何利用T4DNA聚合酶制备平末端?38．反转录酶有两种类型，一是来源于禽类骨髓母细胞瘤病毒(AMY,aviammyelobla

8、stosisvirus)，另一种来源于鼠类莫洛尼氏白血病毒(M—MLV，Molo