高中生物复习导学案（五）2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体人教版选修3

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1、复习（五）2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体基础知识一、动物细胞融合（又叫：细胞杂交）1.概念：指         或         动物细胞结合形成一个细胞的过程，也称细胞杂交。2.结果：融合形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为          细胞。3.动物细胞融合原理：细胞膜的         。4.诱导动物细胞融合的方法：物理方法、化学方法、生物方法。5.过程：6.意义：细胞融合突破了有性杂交方法的局限，使         成为可能。这一技术成为研究         、    

2、     、肿瘤和生物         培育的重要手段。二、单克隆抗体1．概念：由单一B淋巴细胞进行无性生殖形成的细胞所产生的化学性质单一、特异性强的抗体。2.抗体：淋巴细胞（浆细胞）产生的，化学本质为         ，具有特异性。从血清中分离出的抗体         、纯度低、特异性差。3.哺乳动物感染病原体（如病毒、细菌等）后，体内会形成相应的B淋巴细胞。B淋巴细胞能分泌         ，凝集或杀死这些病原体。但是每一个B淋巴细胞只分泌         。因此，要想获得大量的         ，必

3、须克隆              ，形成         。4.单克隆抗体的制备（1）过程：第一步：将　　　　注射到小鼠体内进行免疫；第二步：从该小鼠脾脏中获得能够产生抗体的　　　　　　　细胞，与小鼠的　　　　　　　　　细胞在　　　　　　　，或聚乙二醇的诱导下融合；第三步：在特定的　　　　　培养基中，筛选出　　　　　细胞；第四步：培养杂交瘤细胞，从中挑选出　　　　　　　　　　　　　　　　的细胞群，继续培养；第五步：将该杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或注射到小鼠　　　　内增殖，然后再分离纯化单克隆抗体；（

4、2）杂交瘤细胞的特点：既能大量         ，又能产生           。5.提取单克隆抗体：从培养液或小鼠腹水中提取。特别提醒：在选择培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有　　　　　　　才能生长。B淋巴细胞的特点：　　　　　　　　　　　，缺点：　　　　　　　　　　骨髓瘤细胞的特点：　　　　　　　　　　　　　。杂交瘤细胞具备具备双亲的遗传物质，不仅能产生　　　　　，还能　　　　　，能大量产生单克隆抗体。6.单克隆抗体的应用（1）单克隆抗体的优点：         强、  

5、       高，并可能           。（2）诊断疾病：诊断病毒引起的疾病和用癌细胞制备的单克隆抗体定位诊断．（3）用于治疗疾病和运载药物：①运用药物与单克隆抗体连接在一起制成＂生物导弹＂．②优点：疗效高，毒副作用小。【总结归纳】一、植物体细胞杂交与动物细胞融合比较植物细胞杂交(番茄马铃薯植株)动物细胞融合(单克隆抗体制备)过  程第1步原生质体的制备(酶解法)正常小鼠的处理(注射灭活抗原)第2步原生质体的融合(物化法)动物细胞融合(物化生法)第3步杂种细胞的筛选和培养杂交瘤细胞的筛选和培养第4步

6、杂种植株鉴定提纯单克隆抗体(特异性强、灵敏度高)原理/理论基础细胞膜的流动性、植物细胞的全能性细胞膜的流动性、细胞增殖融合前处理酶解法除去细胞壁：纤维素酶、果胶酶注射特定抗原法免疫处理正常小鼠促融因子物理法：电刺激、离心、振动化学法：聚乙二醇物化法：与植物相同生物法：灭活的仙台病毒意义和用途(1)克服有性远缘杂交不亲和性障碍(2)培育作物新品种①制备单克隆抗体②有助于疾病的诊断、治疗、预防二、制备单克隆抗体时，为什么要选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞？提示：哺乳动物感染抗原后，其体内会形成相应

7、的B淋巴细胞，B淋巴细胞能分泌相应的抗体凝聚或杀死这些抗原。动物在免疫反应的过程中，每一种B淋巴细胞能分泌一种特异性抗体，要想获得大量的特异性抗体，必须使能分泌该单一抗体的B淋巴细胞大量增殖。B淋巴细胞具有产生单一抗体的能力，但不能在体外增殖；骨髓瘤细胞是一种癌细胞，它能在体外培养条件下无限增殖，但不能产生抗体。因此，把一种B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合，产生杂交瘤细胞，它会兼有两个亲本细胞的特性──在体外培养条件下能不断增殖，同时能产生出某种特异性的抗体。三、杂交瘤技术制备单克隆抗体的主要步骤（1）

8、抗原制备；（2）免疫动物；（3)免疫脾细胞和骨髓瘤细胞的制备；（4)细胞融合；（5）杂交瘤细胞的选择培养；（6）杂交瘤细胞的筛选；（7）杂交瘤细胞的克隆化；（8）单克隆抗体的检定；（9)分泌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立；（10）单克隆抗体的大量制备。一、选择题A1．科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（）A.经过免疫的B淋巴细胞B.不经过免疫的T淋巴细胞C.经过