【总结】6.2动植物细胞杂交

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1、再生出细胞壁脱分化再分化1、过程：植物细胞融合植物组织培养去壁去壁人工诱导方法：酶解法（纤维素酶、果胶酶）方法？物理法：离心、震动、电激化学法：聚乙二醇（PEG）融合完成标志二、植物体细胞杂交技术植物细胞A植物细胞B原生质体A原生质体B融合的原生质体AB杂种细胞AB愈伤组织杂种植株植物组织培养植物体细胞杂交所属范畴步骤原理意义无性繁殖细胞全能性①脱分化②再分化保持优良性状繁殖速度快大规模生产克服远源杂交不亲和的障碍①去细胞壁②植物细胞融合③植物组织培养细胞膜流动性、细胞全能性染色体变异、基因重组(二)动

2、物细胞培养过程动物组织块（胚胎、幼龄）细胞悬液原代培养传代培养剪碎胰蛋白酶(胶原蛋白酶)胰蛋白酶动物细胞培养不能培养成生物体细胞贴壁接触抑制（动物组织消化后初次培养）（分瓶继续培养，10-50代发生突变获得不死性）植物组织培养和动物细胞培养比较比较项目植物组织培养动物细胞培养原理培养基性质培养基特有成分培养结果培养目的细胞的全能性细胞增殖固体培养基液体培养基蔗糖、植物激素葡萄糖动物血清植物体细胞群快速繁殖、培育无病毒植株获得细胞、细胞分泌蛋白电激使两细胞融合成重组细胞。物理化学方法激活形成重组胚胎。卵母

3、细胞采集培养减二中期卵母细胞供体牛供体细胞注入去核卵母细胞代孕母牛克隆牛体细胞培养去核卵母细胞去核胚胎移植(三)体细胞核移植过程：分娩动物细胞培养动物体细胞核移植原理结果细胞增殖动物细胞核的全能性获得细胞群获得克隆动物4、单克隆抗体融合过程5、诱导方法：物理方法：化学法：生物法：灭活的病毒电激聚乙二醇（PEG)思考：为什么灭活的病毒能作诱导剂？细胞分散（胰蛋白酶）灭活丧失感染性保留融合活性抗体的传统生产方法从血清中分离抗体该法制备抗体的特点：产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。多种效应B细胞动物

4、体内多种抗体抗原植物细胞杂交与动物细胞融合的比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理融合前处理使用的酶诱导方法主要用途细胞膜流动性细胞全能性细胞膜流动性纤维素酶、果胶酶胰蛋白酶物理方法（离心、振荡、电激）化学方法（PEG）物理方法化学方法灭活的病毒获得杂种植株制备单克隆抗体去细胞壁后诱导原生质体融合使细胞分散后诱导细胞融合