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时间:2019-10-06
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1、大蒜素提取工艺的探讨指导教师:包清彬姓名:余秋永班级:生物工程4班学号:200312431前言1.大蒜素的介绍(1)大蒜是百合科葱属植物蒜的鳞茎,以鳞茎、花茎、嫩叶为主要产品,基产品营养丰富(每100g大蒜中含有硫胺素0.24、蛋白质4.4g)味道鲜美,能增进食欲,并有杀菌作用,对冠心病、高血压、动脉粥样硬化症等有防治作用,此外大蒜素对霉菌有明显的抑制作用,是理想的抗菌剂原料。(2)提取大蒜素的方法主要有3种:水蒸气蒸馏法、有机溶剂提取法和超临界萃取法。水蒸气蒸馏法所需设备简单,操作方便,但是其大蒜素提取率很低。超临界萃取法提取率高、品质好,但生产成本高、设备复杂、
2、操作技术难度大。本次实验采用有机溶剂乙醇提取大蒜素并进行其工艺探讨。确定其影响因素及最佳工艺参数。2实验材料与仪器1.实验材料及试剂大蒜(购于红光菜市场)无水乙醇、95%乙醇、氯化钡、氢氧化钠、浓硫酸、浓硝酸、浓盐酸(以上试剂均为分析纯)、甲基橙、pH试纸、蒸馏水2.实验仪器JA2003型电子天平JJ-2组织捣碎匀浆机KXH101-24型干燥箱抽滤装置(布氏漏斗、SHB-3循环水多用真空泵)HH-S数显恒温水浴锅722型光栅分光光度计DZF-6020型真空干燥箱5810R型冷冻离心机(Centrifuge)80-2BT台式低速离心机可调电炉3实验方法1.大蒜素的提取
3、(1)提取原理大蒜素并非单一成分组成,它是由二十多种易挥发物组成,主要有大蒜新素,大蒜辣素及多种烯丙基、丙基、甲基组成的硫醚化合物。采用不同的溶剂,控制不同的条件,就会得到不同的产物。根据此机理,本实验采用乙醇有机溶剂萃取大蒜素,探讨一下影响提取率的主要因素及其工艺。滴加10%氢氧化钠溶液至黄色,用1:1盐酸调节pH=2~3之间。在电炉上加热至微沸,趁热加入10ml15%氯化钡溶液,搅拌均匀,在90℃水浴上保温2h,搅拌均匀后取10ml在低速离心机离心半个小时。取上清液作为空白对照在680nm下测溶液的吸光度,再对比附录Ⅰ硫酸钡浓度与光密度值的标准曲线算出硫酸钡的量
4、,从而推算出大蒜素的含量。(1)式中:32.06:硫分子量;233.39:硫酸钡分子量;c:硫酸钡的浓度;V:测定提取液体积(ml);162.26:大蒜素分子量;m:大蒜素的重量。(3)氯化钡浓度与光密度值的标准曲线配置5.6ppm、4.48ppm、3.36ppm、2.24ppm、1.12ppm五种浓度的硫酸钡溶液,用蒸馏水作空白对照,用712型分光光度计在波长680nm下测定其吸光值A。画图做出氯化钡浓度与光密度值的标准曲线。实验数据硫酸钡浓度/ppm吸光度5.64.483.362.241.120.000.3850.3260.2490.1750.0880.0003
5、.单因素及正交实验考察1)单因素实验考察(1)酶解温度对大蒜素提取率的影响将大蒜用组织捣碎机捣成蒜泥,取5份样品(每份20g),分别在30、35、40、45和50℃水浴锅中放置0.5h,然后加入体积分数(下同)95%乙醇80ml于30℃下萃取1.5h,离心分离、减压浓缩后测定萃取液中的大蒜素含量。(2)酶解时间对大蒜素提取率的影响将大蒜用组织捣碎机捣成蒜泥,取5份样品(每份20g),分别在40℃下酶解0.3、0.5、1、1.5和2小时,然后加入体积分数(下同)95%乙醇80ml于30℃下萃取1.5h,离心分离、减压浓缩后测定萃取液中的大蒜素含量。(3)乙醇体积分数对
6、大蒜素提取率的影响将大蒜用组织捣碎机捣成蒜泥,取5份样品(每份20g),在40℃水浴锅中放置0.5h,然后分别加入体积分数65%、75%、85%、95%乙醇80ml于30℃下萃取1.5h,离心分离、减压浓缩后测定萃取液中的大蒜素含量。(4)萃取温度对大蒜素提取率的影响将大蒜用组织捣碎机捣成蒜泥,取5份样品(每份20g),在40℃水浴锅中放置0.5h,然后分别加入体积分数95%乙醇80ml分别在25、30、35、40、45℃下萃取1.5h,离心分离、减压浓缩后测定萃取液中的大蒜素含量。(5)萃取时间对大蒜素提取率的影响将大蒜用组织捣碎机捣成蒜泥,取5份样品(每份20g
7、),在40℃水浴锅中放置0.5h,然后分别加入体积分数95%乙醇80ml在30℃下分别萃取1、1.5、2、2.5、3h,离心分离、减压浓缩后测定萃取液中的大蒜素含量。(6)料液比对大蒜素提取率的影响将大蒜用组织捣碎机捣成蒜泥,取5份样品(每份20g),在40℃水浴锅中放置0.5h,然后分别按料液比1:2、1:3、1:4、1:5、1:6ml加入体积分数95%乙醇,在30℃下分别萃取1.5h,离心分离、减压浓缩后测定萃取液中的大蒜素含量。2)正交实验由上节单因素分析结果可知用有机溶剂萃取大蒜素的最佳工艺条件为加入醪液比为1:4的95%乙醇在40℃下酶解半个小时,在3
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