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《以人皮肤成纤维细胞作为饲养层细胞培养人胚胎干细胞》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、现彳弋生物医学进展ProgrcssinModcrnBiomcdicinc2009Vo1.9N0.16-3001--^础研究•以人皮肤成纤维细胞作为饲养层细胞培养人胚胎干细胞*杨俊林刘雄昊喻姣玲冯励谭杨李卓吴鄭玲仟梁徳牛夏家辉奔高庭潘盛(中南大学医学遗传学国家重点实验室湖南长沙410078)摘要目的：比较人皮肤成纤维细胞(humandcrmalf'ibroblasts,HDFs)与小鼠胚胎成纤维细胞(Mouseembryonicfibroblasts,MEFs)的增殖能力及研究人皮肤成纤维细胞作为饲养层支持人胚胎干细
2、胞(humanembryonicstemcells,hESCs)未分化生长的能力。方法：利用组织贴壁法从人皮肤屮分离出HDFs，通过细胞形态的观察和牛长Illi线的绘制比较HDFs与MEFs的体外增殖能力。将HDFs作为饲养层细胞与hESCs共培养，传代12代后，检测hESCs碱性磷酸酶(AKP)、表而特界性标志及胚胎干细胞特异性转录HDFs可连续传代培养15代以上，10代以下的HDFs增殖迅速，hESCs因子。结果:IfljMEFs口笫4代起，增殖能力就明显下降；在HDFs饲养层上可传代培养12代以上，克隆边界清
3、晰，细胞排列紧密，碱性磷酸酶、表而标志物检测均呈阳性，表达了hESCsHDFs比MEFs具有更强的增殖能力；HDFs可作为培养hESCs的饲养层细胞。特异性转录因子。结论：关键词：人胚胎干细胞；人皮肽成纤维细胞；饲养层细胞R329.2中图分类号：A文章编号：1673-627316-3001-05文献标识码：(2009)Cultureofhumanembryoniccellsbyusinghumandermalfibroblastsasfccdcrcclls*YANGJun・lin,LIUXiong・hao,YUJi
4、aoJing,FENGMai,TANYang,LIZhuo,WUBen,GAOTing,PANSheng,WULing-qian,LIANGDe-sheng,XIAJia-huiChina(StateKeyLaboratoryofMedicalGenetics,CentralSouthUniversity,Changsha,410078,)ABSTRACTObjective:Tocomparetheproliferativepotentialofhumandermalfibroblasts(HDFs)andmous
5、eembryonicfibroblasts(MEFs),andtoexplorethefeasibilityforHDFsasfccdcrccllstosupportthcgrowthofhumancmbryoniccclls(hESCs).Methods:HDFswereobtaincdfromhumanskinbyusingthcmcthodoftissuc-adherenee.ThcprolifcrativccapaciticsofHDFsandMEFswerccomparcdbyccllmorphology
6、andgrowthcurve.HDFswercuscdasfeedcrccllstoculturehESCs.AftergrowingonHDFsforl2passages,thehESCsweretestedfortheexpressionsofaIkalinephosphatasc(AKP),thcccllsurfaccmarkcrsandccll-specifictranscriptionfactorofhESCs.Results:HDFscouldbcsubculturcdformorcthanl5pass
7、agcs5andrctaincdstrongproliferativepotentialbefore1Opassages,whileitdecreasedobviouslyinMEFsaftersubculturedfor4passages.ThchESCscanpassagedonHDFsfcedcrccllsfor12passageswithtightlypackedcellsandclearboundariesofclone^showingthepositiveresuitsofalkalincphospha
8、tasc(AKP)andthcccllsurfaccmarkcrsandthccxprcssionofhESCs・specifictranscriptionfactor.Conclusion:HDFsshowedastrongerproliferationabilitythanMEFs;HDFscansupportthegrowthofhESCs・Keywo
