《动物细胞培养和核移植技术》教案

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1、《动物细胞培养和核移植技术》教案汉江中学熊红萍【目标】1.简述动物的细胞培养过程及条件。2.举例论证动物细胞培养技术的应用及意义。3.简述动物核移植的过程原理及意义。【重点】动物细胞培养的过程；动物核移植的过程。【难点】原代培养和传代培养的概念。情景导航复习：植物细胞工程技术材料分析：对于大面积烧伤的病人，自体健康皮肽非常冇限，使用他人的皮肤，來源不足会产生排斥反应。怎样才能获得大量自体的健康皮肤呢？新课探究一、动物细胞培养1・发展历史：多媒体演示2、动物细胞培养的过程多媒体演示单个细胞（）（）细胞株（）细胞系►►►（1）细胞牛长的特性：贴壁牛长，

2、接触抑制现象。在细胞培养的过程中，进行的细胞分裂方式为冇丝分裂，悬液中分散的细胞很快会贴壁生长，当数量不断增多时，出现—接触抑制一现象，细胞分裂就会停止。故而需要多次消化，分瓶培养。（2）理解原代培养和传代培养的概念：原代培养：动物组织消化示的初次培养。传代培养：分瓶后继续培养的过程通称为传代培养。在细胞培养的过程中，细胞的生长会有两次“危机”，第一次在原代培养10代左右。只有少数细胞可以度过“危机”，继续传卞去；传代40—50代的细胞群叫细胞株。笫二次“危机”在传代50代Z后，超过5（）代的细胞会克服细胞寿命的口然极限，获得不死性，这部分细胞一经

3、突变，朝着等同于癌细胞的方向发展，能无限传代下去。这样的细胞叫细胞系。通常情况下，10代以内的细胞能够保证正常的二倍体核型，所以通常在实践上应用10代以内的细胞冷冻保存。3、动物细胞培养的条件（1）.无菌、无毒的坏境：需对培养液和培养用具进行灭菌处理，添加一定量的抗牛素；定期更换培养液。（2）.营养：合成培养基成分有葡萄糊、氨基酸，促生长因子、无机盐、微最元素等。除了合成培养基，通常还需加入血清、血浆等天然成分。合成培养基和天然培养基的区别？（3）.温度和pH：适宜温度为36.5+0.5°C；pH为7.2〜7.4。（4）.气体环境：置于含95%空气

4、+5%二氧化碳的混合气体的培养箱中。细胞培养所需气体主要有氧氧和二氧化碳，前者是细胞代谢所必需的，后者的主要作用是维持培养液的pH。4・概念归纳动物细胞培养的概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。动物细胞培养的原理是什么？5、动物细胞培养技术的应用（1）.大规模生产冇重要价值的生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体。（2）.健康细胞的培养：培养烧伤病人的细胞用于自体移植。（3）.基因工程的受体细胞的培养（4）.检测有毒物质，判断某种物质的毒性大小，原理是动物细胞经该物质处理后，畸变细

5、胞所占的比例越人，说明该物质毒性越人。思考：动物细胞培养如何检测有毒物质毒性的大小？【提示】用含有一定浓度有毒物质的细胞培养液和匸常细胞培养液同吋培养匸常细胞，通过对照观察变异细胞的百分数來确定其毒性强弱。归纳：植物组织培养和动物细胞培养的区别比较项目植物组织培养动物细胞培养原理细胞的全能性细胞增殖培养基性质固体培养基液体培养基培养基特有成分蔗糖植物激素葡萄糖动物血清培养结果植物体细胞株、细胞系培养目的快速繁殖、培育无病毒植株获得细胞或细胞分泌蛋白二、动物细胞的核移植技术和克隆动物1.过程多媒体演示蝌蚪细胞核移植过程多媒体演示多利羊体细胞核移植过程

6、2.定义动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核移入一个C经去掉细胞核的卵母细胞屮，使其重组并发育成一个新的胚胎，最终成为动物个体。该动物叫克隆动物。（核移植的结果：产生克隆动物）克隆的理解：广义的克隆即指无性生殖，冇分子水平的，细胞水平的，个体水平的克隆。举例介绍种类：胚胎细胞核移植和体细胞核移植原理：动物细胞核的全能性供体细胞的培养：—•般都选用10代以内的细胞，目的是为了保证细胞正常的遗传基础。.接受细胞核的卵母细胞必须体外培养到减数第二次分裂时期的次级卵母细胞。它的优点冇哪些？培育过程涉及哪些生物技术？思考：克隆动物是对供体生物的完全复制吗？3

7、体细胞核移植技术的应用前景（多媒体演示）畜牧业上：保护濒危物种：医药科研：人类疾病的动物模型。移植性克隆。4存在的问题：克隆动物的成活率低，健康状况问题。克隆的伦理问题：生殖性克隆和治疗性克隆随堂训练1动物细胞培养的细胞來源于（）A任何个体的细胞B只能来源于动物的胚胎细胞C只能取自幼龄动物的组织细胞D胚胎或幼龄动物的组织器官2动物细胞工程常用的技术手段中最基础的是（）A动物细胞培养B单克隆抗体C动物细胞融合D胚胎核移植3动物细胞培养的培养液和植物组织培养的培养基中共冇成分是（）A葡萄糖B蔗糖C动物血清D维生素4卜-列与动物细胞培养有关的表述，不正确

8、的是（）A培养液屮通常含荷萄糖，氨基酸，无机盐，维生素，动物血清等B原代培养的细胞通常培养到10代左右就会生长停滞C动物细