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《三疣梭子蟹血细胞群间基因表达差异研究技术的探索【开题报告+文献综述+毕业论文】》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、本科毕业论文目录本科毕业论文开题报告生物科学三疣梭子蟹血细胞群间基因表达差异研究技术的探索一、综述本课题国内外研究动态,说明选题的依据和意义三疣梭子蟹是海洋甲壳动物中重要的捕捞对象之一,我国从南到北广大海域都有分布,资源丰富,是我国沿海重要养殖品种之一。浙江省七十年代平均年产量1万5千吨,八十年代以来,平均年产量增长至3万多吨,1985年高达5万6千吨,是出口和内销的重要水产品。在世界范围内虾、蟹养殖业迅速发展的同时,由于高密度养殖和过剩投饵等原因,近年来养殖病害呈逐年上升趋势,导致养殖池的饲养环境急剧恶化,由细菌和病毒引起的传染性疾病也逐渐增多,制约了
2、三疣梭子蟹养殖产业的健康可持续发展。研究三疣梭子蟹血细胞群间基因表达差异研究技术的探索,用于制订繁殖保护措施,合理利用梭子蟹资源有着重要意义。甲壳动物缺乏特异性免疫,其免疫防御主要依赖于血细胞的吞噬、包囊以及血淋巴中的一些酶和免疫因子的抗菌、杀菌作用来完成。一般认为甲壳动物血细胞由颗粒细胞、半颗粒细胞及透明细胞三类组成。但不同类型血细胞功能及参与的免疫防御反应目前还不是很清楚。本研究的目的在于建立一种研究方法,使之可用于研究免疫相关基因在三疣梭子蟹不同细胞群中的表达差异,为探索免疫相关基因及不同类型血细胞的功能奠定基础。在本研究中,由于没有三疣梭子蟹不同
3、血细胞的特定抗体,无法用荧光标记流式细胞术对血细胞进行分离,曾尝试利用细胞直径的差异与细胞的明暗差异进行流式细胞术18本科毕业论文目录分离,但效果不好(数据未列出),只能尝试密度梯度离心法进行血细胞的分离。但在未用甲醛处理前,可能是表明蛋白的相互作用下,半颗粒细胞与透明细胞粘连成团,无法将二者有效分离,因此采用甲醛固定法使细胞表明蛋白变性,使血细胞完全分散。通过对Percoll不连续密度梯度优化,最终实现了对血细胞群的有效分析,得到较为纯净的不同细胞类型。并直接使用甲醛固定细胞裂解液作为模板,从中提取RNA并进行RT-PCR扩增。本研究的目的在于建立一种
4、研究方法,使之可用于研究免疫相关基因在三疣梭子蟹不同细胞群中的表达差异,为探索免疫相关基因及不同类型血细胞的功能奠定基础。二、研究的基本内容,拟解决的主要问题:通过对三疣梭子蟹血细胞分离,获得各组分细胞中基因,并对其进行克隆后电泳分析其表达差异。三疣梭子蟹由于其独特的免疫机制,为确定其免疫相关基因的表达存在差异而提供了研究空间。本研究目的在于进一步研究三疣梭子蟹血细胞群间基因表达差异研究技术的探索,为三疣梭子蟹的病害防治奠定基础。三、研究步骤、方法及措施:(一)试验步骤:三疣梭子蟹血细胞分离,获得各组分细胞中基因,并对其进行克隆后电泳分析其表达差异。(二
5、)研究方法:Percoll不连续梯度离心法,PCR扩增,电泳检测分析。(三)措施血细胞甲醛固定,采用特异性引物进行PCR扩增,电泳检测分析。18本科毕业论文目录四、参考文献:[1]吴冠芸,潘华珍,吴军.生物化学与分子生物学实验常用数据手册.北京:科学技术出版社,1999.pp89-91.[2]廖永岩,周友广,叶富良.斑节对虾与黑斑口虾姑血相的比较研究.中山大学学报,2000,39:271-2770).[3]薛庆善.体外培养的原理与技术.北京:科学技术出版社2001pp176-226.[4]陈平,黄槐,池信才.四种对虾血细胞组成及超微结构.水生生物学报19
6、98,22(2):158-163).[5]裴雪涛.干细胞实验指南.北京:科学技术出版社,2006.pp4-5.[6]高健,李跃华.甲壳类的体液免疫因子及其环境作用[J].水产养殖,1992,(006)2l一23.[7]陆宏达.2002.中华绒螯蟹血细胞的显微、亚显微形态结构及其分类.水生生物学报,26:7-15.[8]战文斌,张利峰,张志栋,周丽,宋微波.中国对虾血细胞单克隆抗体研制及对虾血细胞类型的鉴别.高技术通讯,2001,(6):19-22.[9]VandeBraakCBT,FoberR,BoonJH.1996.Cellularandhumoral
7、characteristicsofPenaeusmonodon(Fabricius,1978)haemolyph[J].CompHaematolInt,6:194-203.18本科毕业论文目录毕业设计文献综述生物科学无脊椎动物血细胞分类、分离研究【摘要】:甲壳动物的免疫反应主要依靠吞噬、包囊和凝集,属于非特异性免疫。对血细胞分型的研究正在从采用传统的形态学方法向采用生物技术方法的方向发展,单克隆抗体技术已经应用于血细胞分型,结果更为客观准确。而血细胞分离研究对于研究细胞化学特性与功能方面有着重要意义。【关键词】:无脊椎动物;血细胞;分离;分类甲壳类动物是
8、节肢动物门里形态结构和栖息环境差异多样性最高的动物种群。由于该种群在淡、海水水域